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Methanol

甲醇

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: 322415
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Paper Lateral Flow Biosensor for Nodavirus Reverse Transcribed RNA Detection
Author:
Date:
2020-08-05
[Abstract]  Paper nanobiosensors have been established as an excellent platform for analysis of veterinary and human pathogens causing various diseases. Especially, lateral flow assays or biosensors ideal for sensitive, rapid, robust and accurate analysis in laboratory setups and on-site analysis. Viral RNA detection is of great importance for public health as well as animal health protection. In that aspect, the present protocol focuses on the development of functionalized gold nanoparticle-based lateral flow biosensor for fish nervous necrosis virus (Nodavirus) nucleic acids detection. Total viral RNA, ... [摘要]  [摘要] 纸纳米生物传感器已经成为分析导致各种疾病的兽医和人类病原体的一个极好的平台。尤其是侧向流分析或生物传感器是实验室设备和现场分析中灵敏、快速、可靠和准确分析的理想选择。病毒RNA检测对公共卫生和动物健康保护具有重要意义。在这一方面,本协议的重点是开发功能化金纳米粒子侧流生物传感器,用于鱼类神经坏死病毒(Nodavirus)核酸检测。从鱼类标本中分离出的总病毒RNA进行逆转录PCR扩增,扩增产物与特异性寡核苷酸探针混合。当有nodavirus产物存在时,形成红色检测线。这种方法对基础研究有很大的意义,因为它消除了耗时、繁琐的电泳程序的需要,并且可以在养鱼场对养鱼户进行调整。利用这种生物分析平台进行病害监测,无需耗费大量时间和成本,对水产养殖和环境安全有很大影响。

[背景] 关注点和/或现场生物分析一直是关注人类和动物福祉的研究工作的最终目标。基于纸基的传感平台具有功能化简单、重现性好、制造成本低等优点,是一种极具吸引力的分析平台。纸基分析设备已应用于小分子、蛋白质和各种核酸的分析(Parolo和Merkoçi,2013;Bahadir和Sezgintürk,2016;Jiang等人,2019)。侧流生物传感器(LFB)是一种带有干试剂的预制材料条带,通过流体样品激活。它们专为一次性一次性使用而设计,只要有足够的开/关信号(Posthuma ...

Expression and Ni-NTA-Agarose Purification of Recombinant Hepatitis C Virus E2 Ectodomain Produced in a Baculovirus Expression System
Author:
Date:
2018-10-05
[Abstract]  In this protocol, we describe the production and purification of the ectodomain of the E2661 envelope protein (amino acids 384-661) of the Hepatitis C virus, which plays a fundamental role in the entry of the virus into the host cell. This protein has been expressed in both prokaryotic and eukaryotic systems but in small quantities or without native protein characteristics. In our case, we use the Baculovirus expression system in insect cells. E2661 is secreted into the extracellular medium and purified by means of affinity chromatography a Ni-NTA-column because the ... [摘要]  在该协议中,我们描述了丙型肝炎病毒的E2 661 包膜蛋白(氨基酸384-661)的胞外域的产生和纯化,其在病毒进入中起基础作用。 进入宿主细胞。 该蛋白质已经在原核和真核系统中表达,但是少量或没有天然蛋白质特征。 在我们的例子中,我们在昆虫细胞中使用杆状病毒表达系统。 E2 661 被分泌到细胞外培养基中并通过亲和层析Ni-NTA-柱纯化,因为该蛋白质在其氨基末端具有六个组氨酸的标签。 纯化的蛋白质具有天然样构象,并且大量生产,每升约5-6mg。
【背景】丙型肝炎病毒(HCV)是全世界慢性肝炎,肝硬化和肝细胞癌的主要原因(Major et al。,2001; Alter,2006)。此时,没有HCV疫苗,抗病毒药物用于治疗HCV感染(Imran et al。,2014)。然而,治疗费用昂贵且不是100%有效(Kohli et al。,2014)。 HCV包膜糖蛋白E2负责与细胞受体的相互作用,因此它是研究病毒感染周期的第一步的主要候选者。由于糖基化和聚集,先前的表达系统产生低水平的异质蛋白质,并且难以区分经历生产性和非生产性折叠的分子(Flint ...

Isolation of Intact Vacuoles from Petunia Petals and Extraction of Sequestered Glycosylated Phenylpropanoid Compounds
Author:
Date:
2018-07-05
[Abstract]  Plant vacuoles are the largest compartment in plant cells, occupying more than 80% of the cell volume. A variety of proteins, sugars, pigments and other metabolites are stored in these organelles (Paris et al., 1996; Olbrich et al., 2007). Flowers produce a variety of specialized metabolites, some of which are unique to this organ, such as components of pollination syndromes, i.e., scent volatiles and flavonoids (Hoballah et al., 2007; Cna'ani et al., 2015). To study the compounds stored in floral vacuoles, this compartment must be separated from ... [摘要]  植物液泡是植物细胞中最大的隔室,占细胞体积的80%以上。各种蛋白质,糖,色素和其他代谢物存储在这些细胞器中(Paris et al。,1996; Olbrich et al。,2007)。花产生多种特殊代谢物,其中一些是该器官特有的,如授粉综合征的成分, ie ,气味挥发物和黄酮类化合物(Hoballah et al。, 2007; Cna'ani et al。,2015)。为了研究存储在花液泡中的化合物,必须将该隔室与细胞的其余部分分开。为了能够分离液泡,首先通过将刺穿的花冠与纤维素酶和macrozyme酶一起孵育来产生原生质体。在过滤和几个离心步骤后,通过显微镜观察显示原生质体与碎片和受损/破裂的原生质体分离。裂解浓缩的原生质体,并通过Ficoll梯度离心提取液泡。 Vacuoles用于隔离代谢物的定量GC-MS分析。这种方法使我们能够将空泡识别为糖基化挥发性苯丙酸类的亚细胞聚集位点,并假设共轭气味化合物在通向顶空的途径中被隔离(Cna'ani et al。,2017) 。

【背景】植物空泡占植物细胞中细胞体积的80%。这些细胞器对植物生长和发育至关重要,在整个植物的生命中具有不同的功能。 ...

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