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Scissors, 9 cm

剪刀

公司名称: Fine Science Tools
产品编号: 14060-09
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Organotypic Slice Culture of the Embryonic Mouse Brain
Author:
Date:
2020-07-05
[Abstract]  Organotypic slice culture is a powerful technique for exploring the embryonic development of the mammalian brain. In this protocol we describe a basic slice culture technique we have used for two sets of experiments: axon guidance transplant assays and bead culture assays. [摘要]  [摘要]器官型切片培养是探索哺乳动物大脑胚胎发育的有力技术。在这个方案中,我们描述了一种基本的切片培养技术,我们已经用于两组实验:轴突引导移植实验和珠子培养实验。

[背景] 器官型切片培养是近年来广泛应用的一种技术,在神经发育领域已成为一种特别流行的技术。它的最大优点是可以在体外培养发育中的神经细胞,同时保持组织的体内结构。在该方案中,我们描述了我们在最近的论文(Clegg等人,2019)中用于两个实验的切片培养技术。首先,我们进行了轴突引导移植实验,将荧光标记的组织移植到非荧光宿主切片上,观察轴突的生长情况。这是先前用于研究胼胝体发育的一个改进版本,但可以很容易地用于检查其他轴突束,如丘脑皮质束(Niquille et al.,2009)。其次,我们进行了微珠培养实验,将浸有重组FGF蛋白的小球植入组织中,检测组织对FGF蛋白的分子和细胞反应。以这种方式使用浸过蛋白的小球提供了一种在特定位置聚焦输送重组蛋白的方法,与将所有组织均匀暴露于蛋白质的浴敷法不同。这模拟了体内的情况,即形态发生素(如FGF17)在特定的解剖位置表达,然后在组织中扩散。该技术可用于探索对多种不同重组蛋白或药物的反应。

Hair Follicle Stem Cell Isolation and Expansion
Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract]  Stem cells are widely used for numerous clinical applications including limbal stem cell deficiency. Stem cell derived from the bulge region of the hair follicle have the ability to differentiate into a variety of cell types including interfollicular epidermis, hair follicle structures, sebaceous glands and corneal epithelial cells when provided the appropriate cues. Hair follicle stem cells are being studied as a valuable source of autologous stem cells to treat disease. The protocol described below details the isolation and expansion of these cells for eventual clinical application. We used ... [摘要]  干细胞被广泛用于许多临床应用,包括角膜缘干细胞缺陷。 当提供适当的提示时,源自毛囊凸出区域的干细胞具有分化成多种细胞类型的能力,包括滤泡间表皮,毛囊结构,皮脂腺和角膜上皮细胞。 正在研究毛囊干细胞作为自体干细胞治疗疾病的宝贵来源。 下面描述的方案详细描述了这些细胞的最终临床应用的分离和扩增。 我们使用双报告小鼠模型来观察这些细胞在角膜缘干细胞缺陷小鼠模型中的分离和最终分化。

【背景】干细胞被广泛用于多种翻译和临床应用。一种这样的临床应用是用于治疗角膜缘干细胞缺陷(LSCD)。当角膜缘干细胞群存在功能障碍或丧失时,LSCD发生,这对于由于先天性或获得性病理而维持健康的眼表非常重要。 LSCD的主要治疗策略是从患者健康眼睛的角膜缘活检组织培养自体上皮细胞片(Pellegrini等人,1997; Shortt等人,2007) 。这种策略的局限性在于它只适用于患有单侧LSCD的患者。那些有双侧LSCD的患者必须依靠免疫相关活体供体或尸体组织的同种异体角膜缘活检。由于全身性免疫抑制治疗的需要和供体组织的有限可用性,治疗成功率降低。一些研究小组一直在研究使用培养的口腔粘膜细胞治疗LSCD并取得了一些成功。然而,这些细胞通常不能表达角膜上皮分化标记角蛋白12(Inatomi等,2006),并且经常导致外周血管新生的发展(Nakamura等人, ,2004; ...

Isolation of Mouse Cardiac Neural Crest Cells and Their Differentiation into Smooth Muscle Cells
Author:
Date:
2017-09-05
[Abstract]  Cardiac neural crest cells (CNCCs) originate at the dorsal edge of the neural tube between the otic pit and the caudal edge of the 3rd somite, and migrate into the pharyngeal arches and the heart. We have shown that fibronectin (Fn1) plays an important role in the development of the CNCC by regulating the differentiation of CNCCs into vascular smooth muscle cells around pharyngeal arch arteries (Wang and Astrof, 2016). This protocol describes the isolation of CNCCs from the neural tube and from the caudal pharyngeal arches, and the differentiation of neural crest-derived cells into ... [摘要]  心脏神经嵴细胞(CNCC)起源于神经管的背部边缘,位于第3个体节的耳穴和尾缘之间,并迁移到咽弓和心脏。 我们已经表明,纤连蛋白(Fn1)通过调节CNCCs到咽弓动脉周围的血管平滑肌细胞的分化,在CNCC的发展中起重要作用(Wang and Astrof,2016)。 该方案描述了CNCC与神经管和尾尾弓的分离,以及神经嵴衍生细胞分化成平滑肌细胞。 该方案从(Newgreen和Murphy,2000; Pfaltzgraff等人,2012)改编。
【背景】以前发表的方案描述了从神经管分离神经嵴细胞。然而,在耳孔和第三体细胞之间的神经管区域中的神经嵴细胞包括有助于许多不同细胞类型的神经嵴细胞群体;例如,迷走神经嵴细胞也来自该区域。在该方案中,我们修改了用于分离心脏神经嵴细胞的常规方法。而不是使用神经管,我们在胚胎期(E)9.5(22-25个体节期)使用尾部咽部弓形区。这是在将心脏神经嵴细胞分化为血管平滑肌细胞之前。神经嵴培养物通常含有污染性间充质细胞,通常表达平滑肌基因。为了鉴定神经嵴衍生细胞,我们从以下交叉产生的胚胎中分离出神经嵴细胞:Fn1flox / flox; ROSAmTmG / mTmG雌性小鼠×Fn1 +/-;Tfap2αIRESCre/ ...

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