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Fetal bovine serum (FBS)

胎牛血清

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: F7524
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A Method to Efficiently Cryopreserve Mammalian Cells on Paper Platforms
Author:
Date:
2020-09-20
[Abstract]  This protocol describes a simple method to cryopreserve mammalian cells within filter papers as an alternative to conventional slow-freezing approach. The method involves treating paper fibers with fibronectin, using low concentrations of the cryoprotectant dimethyl sulfoxide (DMSO), and slow freezing cells to -80 °C at a 1 °C min-1 rate. In our method, the biocompatibility, large surface area, 3D porosity and fiber flexibility of the paper, in combination with the fibronectin treatment, yield recovery of cells comparable to conventional approaches, with no additional fine-tuning ... [摘要]  [摘要] 该协议描述了一种简单的方法,可在滤纸中冷冻保存哺乳动物细胞,以替代常规的慢速冷冻方法。该方法包括使用纤连蛋白处理纸纤维,使用低浓度的冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO),然后以1°C min -1的速率将细胞缓慢冷冻至-80°C 。在我们的方法中,纸的生物相容性,大表面积,3D孔隙率和纤维柔韧性与纤连蛋白处理相结合,可产生与传统方法相当的细胞回收率,而无需对冷冻和解冻程序进行额外的微调。我们期望纸质冷冻保存方法这将为保存哺乳动物细胞领域带来几项优势,包括在单位体积内容纳更多数量的细胞,并且释放后无细胞损失。该方法需要最小的存储空间,在该存储空间中,可以将具有大面积的纸平台卷起和/或折叠并存储在库存中,并允许按需方式有效地运输/分配细胞。此外,该方法的另一个特征包括细胞球体和3D细胞培养物的形成和冷冻保存。


[背景] 哺乳动物细胞的成功保存,长期保存,维护和分配是​​重要的研究领域,目前仍在深入的科学研究中。特别是,冷冻细胞的及时稳定供应与组织工程研究有关,例如细胞培养,药物开发和测试以及再生和生物治疗医学。

当前的常规细胞冷冻保存方案包括缓慢和快速的冷冻和玻璃化(Pegg,2002; Baust 等,2009)。在这些方法中,将各种浓度的冷冻保护剂添加到细胞悬浮液中,然后以低至1°C min -1 ...

Analyzing the Quenchable Iron Pool in Murine Macrophages by Flow Cytometry
Author:
Date:
2020-03-20
[Abstract]  Tissue-resident macrophages are pivotal for a tightly-regulated iron metabolism at a cellular and systemic level, since subtle iron alterations increase the susceptibility for microbial infections or drive multiple diseases. However, research on cellular iron homeostasis in macrophages remains challenging due to the limited amount of available methods using radioactive 59Fe isotopes or strong iron chelators, which might be inapplicable in certain experimental settings. This protocol describes the analysis of the quenchable iron pool (QIP) in macrophages by loading these cells with ... [摘要]  [摘要 ] 驻留在组织中的巨噬细胞对于在细胞和全身水平上严格调节铁代谢至关重要,因为细微的铁改变会增加对微生物感染的敏感性或引发多种疾病。然而,由于使用放射性59 Fe同位素或强铁螯合剂的可用方法数量有限,因此巨噬细胞中细胞铁稳态的研究仍然具有挑战性,这在某些实验环境中可能不适用。该协议 描述了通过向这些细胞加载外源铁配合物来分析巨噬细胞中的可淬灭铁池(QIP)。因此,由于巨噬细胞的铁摄取能力与细胞内铁水平成反比,因此可以确定细胞质的铁库。因此,该测定法能够准确分析细胞质铁通量的微小变化,并且几乎适用于所有实验室环境。另外,该方案还可以用于体外和体内的其他免疫细胞类型。

[背景 ] 由于用于全身铁代谢它们的中心调节功能,在多种组织中的巨噬细胞中迅速地改变在不同的刺激的遭遇它们的细胞内的铁水平的微生物感染和疾病(Nairz 等人,2017) 。值得注意的是,大多数细胞中的铁离子被细胞质中的主要铁存储蛋白铁蛋白结合或定位于线粒体或溶酶体等区室(Ma 等,2015 ; Soares和Hamza,2016 ...

Optogenetic Tuning of Ligand Binding to The Human T cell Receptor Using The opto-ligand-TCR System
Author:
Date:
2020-03-05
[Abstract]  T cells are one major cell type of the immune system that use their T cell antigen receptor (TCR) to bind and respond to foreign molecules derived from pathogens. The ligand-TCR interaction half-lives determine stimulation outcome. Until recently, scientists relied on mutating either the TCR or its ligands to investigate how varying TCR-ligand interaction durations impacted on T cell activation. Our newly created opto-ligand-TCR system allowed us to precisely and reversibly control ligand binding to the TCR by light illumination. This system uses phytochrome B (PhyB) tetramers as a ... [摘要]  [摘要] T细胞是免疫系统的一种主要细胞类型,利用其T细胞抗原受体(TCR)结合并响应源自病原体的外来分子。配体-TCR相互作用的半衰期决定了刺激的结果。直到最近,科学家还是依靠突变TCR或其配体来研究变化的TCR-配体相互作用持续时间如何影响T细胞活化。我们新创建的光配体-TCR系统使我们能够通过光照精确且可逆地控制配体与TCR的结合。该系统使用植物色素B(PhyB )四聚体作为光调节的TCR配体。PHYB 可光转化的结合(ON)之间,并且通过分别为660nm和740nm的光照射,非结合性(OFF)构象。PhyB ON能够结合通过将PhyB 相互作用因子(PIF)融合到TCRβ链而产生的合成TCR 。将PhyB 切换为OFF构象会破坏这种相互作用。PhyB 四聚体与PIF-TCR 足够长的结合导致T细胞活化(通过钙内流测量)。在这里,我们描述了有关如何为我们的光配体-TCR系统生成四聚体配体,如何通过流式细胞仪测量配体-TCR结合以及如何通过钙内流量化T细胞活化的协议。

[背景 ] ...

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