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Fetal calf serum (FCS)

胎牛血清

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: F7524
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Analyzing the Quenchable Iron Pool in Murine Macrophages by Flow Cytometry
Author:
Date:
2020-03-20
[Abstract]  Tissue-resident macrophages are pivotal for a tightly-regulated iron metabolism at a cellular and systemic level, since subtle iron alterations increase the susceptibility for microbial infections or drive multiple diseases. However, research on cellular iron homeostasis in macrophages remains challenging due to the limited amount of available methods using radioactive 59Fe isotopes or strong iron chelators, which might be inapplicable in certain experimental settings. This protocol describes the analysis of the quenchable iron pool (QIP) in macrophages by loading these cells with ... [摘要]  [摘要 ] 驻留在组织中的巨噬细胞对于在细胞和全身水平上严格调节铁代谢至关重要,因为细微的铁改变会增加对微生物感染的敏感性或引发多种疾病。然而,由于使用放射性59 Fe同位素或强铁螯合剂的可用方法数量有限,因此巨噬细胞中细胞铁稳态的研究仍然具有挑战性,这在某些实验环境中可能不适用。该协议 描述了通过向这些细胞加载外源铁配合物来分析巨噬细胞中的可淬灭铁池(QIP)。因此,由于巨噬细胞的铁摄取能力与细胞内铁水平成反比,因此可以确定细胞质的铁库。因此,该测定法能够准确分析细胞质铁通量的微小变化,并且几乎适用于所有实验室环境。另外,该方案还可以用于体外和体内的其他免疫细胞类型。

[背景 ] 由于用于全身铁代谢它们的中心调节功能,在多种组织中的巨噬细胞中迅速地改变在不同的刺激的遭遇它们的细胞内的铁水平的微生物感染和疾病(Nairz 等人,2017) 。值得注意的是,大多数细胞中的铁离子被细胞质中的主要铁存储蛋白铁蛋白结合或定位于线粒体或溶酶体等区室(Ma 等,2015 ; Soares和Hamza,2016 ...

Optogenetic Tuning of Ligand Binding to The Human T cell Receptor Using The opto-ligand-TCR System
Author:
Date:
2020-03-05
[Abstract]  T cells are one major cell type of the immune system that use their T cell antigen receptor (TCR) to bind and respond to foreign molecules derived from pathogens. The ligand-TCR interaction half-lives determine stimulation outcome. Until recently, scientists relied on mutating either the TCR or its ligands to investigate how varying TCR-ligand interaction durations impacted on T cell activation. Our newly created opto-ligand-TCR system allowed us to precisely and reversibly control ligand binding to the TCR by light illumination. This system uses phytochrome B (PhyB) tetramers as a ... [摘要]  [摘要] T细胞是免疫系统的一种主要细胞类型,利用其T细胞抗原受体(TCR)结合并响应源自病原体的外来分子。配体-TCR相互作用的半衰期决定了刺激的结果。直到最近,科学家还是依靠突变TCR或其配体来研究变化的TCR-配体相互作用持续时间如何影响T细胞活化。我们新创建的光配体-TCR系统使我们能够通过光照精确且可逆地控制配体与TCR的结合。该系统使用植物色素B(PhyB )四聚体作为光调节的TCR配体。PHYB 可光转化的结合(ON)之间,并且通过分别为660nm和740nm的光照射,非结合性(OFF)构象。PhyB ON能够结合通过将PhyB 相互作用因子(PIF)融合到TCRβ链而产生的合成TCR 。将PhyB 切换为OFF构象会破坏这种相互作用。PhyB 四聚体与PIF-TCR 足够长的结合导致T细胞活化(通过钙内流测量)。在这里,我们描述了有关如何为我们的光配体-TCR系统生成四聚体配体,如何通过流式细胞仪测量配体-TCR结合以及如何通过钙内流量化T细胞活化的协议。

[背景 ] ...

High-throughput Microscopic Analysis of Salmonella Invasion of Host Cells
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  Salmonella is a Gram-negative bacterium causing a gastro-enteric disease called salmonellosis. During the first phase of infection, Salmonella uses its flagella to swim near the surface of the epithelial cells and to target specific site of infection. In order to study the selection criteria that determine which host cells are targeted by the pathogen, and to analyze the relation between infecting Salmonella (i.e., cooperation or competition), we have established a high-throughput microscopic assay of HeLa cells sequentially infected with fluorescent ... [摘要]  沙门氏菌是革兰氏阴性细菌,引起称为沙门氏菌病的胃肠疾病。在感染的第一阶段,沙门氏菌使用其鞭毛在上皮细胞表面附近游泳并靶向特定的感染部位。为了研究确定哪种宿主细胞被病原体靶向的选择标准,并分析感染沙门氏菌( ie ,合作或竞争)之间的关系,我们有建立了对荧光细菌依次感染的HeLa细胞的高通量显微镜检测。使用自动化图像分析管道,我们定量表征了感染和未感染细胞的众多参数。基于此,我们建立了一个预测模型,使我们能够识别宿主细胞易受感染的参数。我们发现宿主细胞易损性有两个来源:病原体诱导的细胞易感性从沙门氏菌摄取中出现并持续存在于感染过程的后期阶段;以及与细胞固有属性相关的宿主细胞固有的脆弱性,例如局部细胞拥挤和胆固醇含量。我们的方法基于形态学或分子宿主细胞参数预测单层上皮细胞中沙门氏菌感染的概率。在这里,我们提供了工作流程的详细描述,包括基于计算机的分析管道。我们的方法有可能应用于研究宿主 - 病原体相互作用的其他组合。

【背景】鼠伤寒沙门氏菌血清型鼠伤寒沙门氏菌通过摄入受污染的食物或水感染宿主,引起沙门氏菌病。一旦细菌到达肠道的远端回肠,它们就会侵入广泛的宿主细胞,包括肠上皮细胞(Watson和Holden,2010)。在宿主细胞入侵的第一阶段,沙门氏菌选择其目标,使用其鞭毛游泳并扫描上皮表面(Misselwitz et ...

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