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Fetal Bovine Serum

胎牛血清

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: F7524
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High-throughput Microscopic Analysis of Salmonella Invasion of Host Cells
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  Salmonella is a Gram-negative bacterium causing a gastro-enteric disease called salmonellosis. During the first phase of infection, Salmonella uses its flagella to swim near the surface of the epithelial cells and to target specific site of infection. In order to study the selection criteria that determine which host cells are targeted by the pathogen, and to analyze the relation between infecting Salmonella (i.e., cooperation or competition), we have established a high-throughput microscopic assay of HeLa cells sequentially infected with fluorescent ... [摘要]  沙门氏菌是革兰氏阴性细菌,引起称为沙门氏菌病的胃肠疾病。在感染的第一阶段,沙门氏菌使用其鞭毛在上皮细胞表面附近游泳并靶向特定的感染部位。为了研究确定哪种宿主细胞被病原体靶向的选择标准,并分析感染沙门氏菌( ie ,合作或竞争)之间的关系,我们有建立了对荧光细菌依次感染的HeLa细胞的高通量显微镜检测。使用自动化图像分析管道,我们定量表征了感染和未感染细胞的众多参数。基于此,我们建立了一个预测模型,使我们能够识别宿主细胞易受感染的参数。我们发现宿主细胞易损性有两个来源:病原体诱导的细胞易感性从沙门氏菌摄取中出现并持续存在于感染过程的后期阶段;以及与细胞固有属性相关的宿主细胞固有的脆弱性,例如局部细胞拥挤和胆固醇含量。我们的方法基于形态学或分子宿主细胞参数预测单层上皮细胞中沙门氏菌感染的概率。在这里,我们提供了工作流程的详细描述,包括基于计算机的分析管道。我们的方法有可能应用于研究宿主 - 病原体相互作用的其他组合。

【背景】鼠伤寒沙门氏菌血清型鼠伤寒沙门氏菌通过摄入受污染的食物或水感染宿主,引起沙门氏菌病。一旦细菌到达肠道的远端回肠,它们就会侵入广泛的宿主细胞,包括肠上皮细胞(Watson和Holden,2010)。在宿主细胞入侵的第一阶段,沙门氏菌选择其目标,使用其鞭毛游泳并扫描上皮表面(Misselwitz et ...

An in vitro Co-culture System for the Activation of CD40 by Membrane-presented CD40 Ligand versus Soluble Agonist
Author:
Date:
2018-07-05
[Abstract]  One fundamental property of the TNR receptor (TNFR) family relates to how ‘signal quality’ (the extent of receptor ligation or cross-linking) influences the outcome of receptor ligation, for instance the induction of death in tumour cells. It is unequivocal that membrane-presented ligand (delivered to target cells via cell-surface presentation by co-culture with ligand-expressing third-party cells) induces a greater extent of carcinoma cell death in vitro in comparison to non-cross-linked agonists (agonistic antibodies and/or recombinant ligands). The CD40 receptor epitomises this ... [摘要]  TNR受体(TNFR)家族的一个基本特性涉及“信号质量”(受体连接或交联的程度)如何影响受体连接的结果,例如肿瘤细胞中的死亡诱导。毫无疑问,膜呈递配体(通过与表达配体的第三方细胞共培养通过细胞表面呈递递送至靶细胞)在体外诱导更大程度的癌细胞死亡非交联激动剂(激动性抗体和/或重组配体)。 CD40受体集中体现了TNF受体 - 配体相互作用的这种基本特性,因为CD40交联的程度决定了细胞命运。膜呈递CD40配体(mCD40L),但不是可溶性激动剂(例如,激动性抗CD40抗体),诱导高水平的促炎细胞因子分泌并导致恶性肿瘤细胞广泛死亡(细胞凋亡)但不是正常的)上皮细胞。在本文中,我们描述了通过mCD40L激活CD40并随后检测细胞凋亡的各种特征(包括细胞膜透化,DNA片段化,半胱天冬酶活化)以及细胞内细胞死亡介质检测的共培养系统(包括衔接蛋白,促凋亡激酶和活性氧,ROS)。

【背景】TNFR及其配体在调节淋巴组织以及上皮(尤其是癌)细胞中的细胞增殖或死亡中的作用已经在广泛研究中,因为它们诱导细胞死亡(主要通过细胞凋亡)的能力代表了有希望的目标。用于癌症治疗。然而,重要的是,当以可溶性对膜结合形式存在时,TNFR激动剂引发细胞死亡的能力存在明显差异。当作为单独治疗施用时,可溶性激动剂通常表现出相对低的细胞毒性效力,而膜呈递的配体似乎是优越的(Albarbar ...

An Image-based Assay for High-throughput Analysis of Cell Proliferation and Cell Death of Adherent Cells
Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract]  In this protocol, we describe a method to monitor cell proliferation and death by live-cell imaging of propidium iodide (PI)-stained adherent mammalian cells. PI is widely used to assess cell death. However, it is usually used in end-point assays. Recently, we implemented the use of PI for real-time cell death assessment by automated imaging. Cells are seeded in a 96-well format, and after attachment, the treatments are added directly to the wells together with PI. Thereafter, cells are subjected to automated time-lapse imaging and quantification by computer software. Combined analyses of ... [摘要]  在该协议中,我们描述了通过碘化丙啶(PI)染色的贴壁哺乳动物细胞的活细胞成像来监测细胞增殖和死亡的方法。 PI广泛用于评估细胞死亡。 但是,它通常用于终点检测。 最近,我们通过自动成像实现了PI的实时细胞死亡评估。 将细胞以96孔形式接种,并且在附着后,将处理与PI一起直接加入到孔中。 之后,通过计算机软件对细胞进行自动延时成像和定量。 相衬和荧光图像的组合分析允许评估对细胞增殖的处理效果以及细胞死亡的程度和动力学。

【背景】多种基于细胞的测定可用于确定细胞死亡,但其中大多数测定包括MTT(溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓)测定,晶蓝染色,和各种基于流式细胞术的方法,都有作为终点分析的限制。最近,我们使用自动荧光成像系统(Essen Bioscience的IncuCyte ZOOM)(Sehgal等人,2017)将碘化丙啶(PI)用于细胞死亡的活细胞评估。通过对相差图像进行组合分析,可以同时检测细胞抑制和细胞毒性效应。这种方法证明是可靠和可重复的,以及非常简单和便宜。在我们最近的出版物中,我们将它用于三种不同的癌细胞系(LNCaP,PC3和MCF7),以有效地确定和比较ER Ca 2 +泵抑制剂毒胡萝卜素各种药物类似物(Tg )(Sehgal et ...

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