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Dimethyl sulfoxide

二甲亚砜(DMSO)

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: D8418
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Cell-free Reconstitution of the Packaging of Cargo Proteins into Vesicles at the trans Golgi Network
Author:
Date:
2020-03-05
[Abstract]  Protein sorting at the trans Golgi network (TGN) plays important roles in targeting newly synthesized proteins to their specific destinations. The aim of this proposal is to reconstitute the packaging of non-Golgi resident cargo proteins into vesicles at the TGN, utilizing rat liver cytosol, semi-intact mammalian cells and nucleotides. The protocol describes how to perform the vesicle formation assay, how to isolate vesicles and how to detect cargo proteins in vesicles. This reconstitution assay can be used to quantitatively measure the efficiency of the packaging of a specific cargo ... [摘要]  [摘要] 反式高尔基体网络(TGN)上的蛋白质分选在将新合成的蛋白质靶向其特定目的地方面起着重要作用。该提议的目的是利用大鼠肝细胞溶质,半完整的哺乳动物细胞和核苷酸,在TGN处将非高尔基驻留的货物蛋白重新包装成囊泡。该协议描述了如何进行囊泡形成测定,如何分离囊泡以及如何检测囊泡中的货物蛋白。该重构测定法可用于定量测量在特定实验条件下将特定货物蛋白包装到TGN的运输小泡中的效率。

[背景] 的反式高尔基体网络(TGN)是在分泌运送路径的必要的交通枢纽。为了确保水泡运输的保真度,真核细胞利用各种蛋白质分选设备将特定的货物蛋白质准确地包装到TGN的运输小泡中,然后运至特定的目的地(Guo 等人,2014)。为了加深我们对TGN分选过程特异性的理解,重要的是开发一种能够忠实地重构TGN囊泡形成和货物分选过程的分析方法。该测定法可用于直接和定量地测量特定因子在调节特定货物蛋白包装到运输小泡中的作用。从内质网(ER)将货物蛋白包装到COPII囊泡中的无细胞重构已得到很好的建立(Kim 等,2005; Kim 等,2007; Merte 等,2010; Yuan 等。,2018;Niu 等,2019;)。已经开发出一种体外测定法,其在TGN处重构特定货物蛋白TGN46在运输小泡中的释放(Ponnambalam 等,1996;Wakana ...

Modifying Styrene-maleic Acid Co-polymer for Studying Lipid Nanodiscs by Direct Fluorescent Labeling
Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract]  This protocol was developed to functionalize styrene maleic acid (SMA) by direct fluorescent labeling in an easy way, accessible to biochemistry laboratories. This novel method is based on the coupling of carboxylic acids to primary amines using a carbodiimide, a reaction commonly used for protein chemistry. The procedure uses the hydrolyzed styrene-maleic acid copolymer and occurs entirely in aqueous solution with mild conditions compatible with many biomolecules. [摘要]  该协议旨在通过直接荧光标记以简单的方式使苯乙烯马来酸(SMA)功能化,生物化学实验室可以使用。 该新方法基于使用碳二亚胺(一种常用于蛋白质化学的反应)将羧酸偶联到伯胺上。 该方法使用水解的苯乙烯 - 马来酸共聚物并且完全在水溶液中发生,具有与许多生物分子相容的温和条件。

【背景】膜蛋白体外的表征可能非常具有挑战性(Grisshammer和Tate,1995)。除了过度表达和膜分离的困难之外,还需要从其天然环境中提取膜蛋白。必需的溶解步骤通常需要使用去污剂来代替天然脂质环境,这通常会导致膜蛋白的结构和/或活性的丧失(Duquesne 等人,2016)。出于这个原因,已经开发了几种替代选择,例如amphipols(Popot,2010),以避免与洗涤剂相关的一些困难并保持膜蛋白的溶解度。几年前,苯乙烯马来酸(SMA)共聚物更常用作低分子量洗涤剂策略的替代品(Dorr et al。,2014; Jamshad et al。 ,2015; Prabudiansyah et al。,2015)。已经证明SMA能够自发地溶解生物膜并产生平均尺寸为10nm的圆盘形颗粒。这些纳米圆盘(称为SMALP)含有嵌入来自膜和SMA共聚物的脂质中的蛋白质混合物,将颗粒保持在溶液中(Knowles 等人,,2009)。 ...

Increasing the Membrane Permeability of a Fern with DMSO
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract]  Cell membrane prevents the entrance of extra molecules (e.g., transcription and translation inhibitors) into the cell. For studying the physiological effects of transcription and translation inhibitors on Hymenophyllum caudiculatum fronds, we incubate fronds with 0.1% DMSO to test if this increases cell membrane permeability relative to incubation with ultrapure water. The study showed that DMSO could significantly improve the cell membrane permeability of filmy fronds. [摘要]  细胞膜防止额外分子(例如,转录和翻译抑制剂)进入细胞。 为了研究转录和翻译抑制剂对Hymenophyllum caudiculatum叶的生理影响,我们将叶用0.1%DMSO温育以测试它是否相对于用超纯水孵育增加细胞膜渗透性。 该研究表明DMSO可显着提高膜状叶的细胞膜透性。

【背景】薄膜蕨类植物最显着的特征之一是,除了维管组织外,叶子由单细胞层组成,缺少气孔。 在我们以前的工作中(Garcéset al。 2018年),我们用放线菌酮或放线菌素D孵育了Hymenophyllum caudiculatum叶,分别研究翻译或转录抑制的作用。 如果与薄膜蕨类植物一起孵育的外源抑制剂不影响植物生理,可能是因为抑制剂不能进入细胞。 为了改善抑制剂进入细胞,我们测试了0.1%DMSO水溶液是否对细胞膜通透性有影响,观察到碘化丙啶(PI)进入细胞。

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