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Dimethyl sulfoxide

二甲亚砜(DMSO)

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: D8418
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Modifying Styrene-maleic Acid Co-polymer for Studying Lipid Nanodiscs by Direct Fluorescent Labeling
Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract]  This protocol was developed to functionalize styrene maleic acid (SMA) by direct fluorescent labeling in an easy way, accessible to biochemistry laboratories. This novel method is based on the coupling of carboxylic acids to primary amines using a carbodiimide, a reaction commonly used for protein chemistry. The procedure uses the hydrolyzed styrene-maleic acid copolymer and occurs entirely in aqueous solution with mild conditions compatible with many biomolecules. [摘要]  该协议旨在通过直接荧光标记以简单的方式使苯乙烯马来酸(SMA)功能化,生物化学实验室可以使用。 该新方法基于使用碳二亚胺(一种常用于蛋白质化学的反应)将羧酸偶联到伯胺上。 该方法使用水解的苯乙烯 - 马来酸共聚物并且完全在水溶液中发生,具有与许多生物分子相容的温和条件。

【背景】膜蛋白体外的表征可能非常具有挑战性(Grisshammer和Tate,1995)。除了过度表达和膜分离的困难之外,还需要从其天然环境中提取膜蛋白。必需的溶解步骤通常需要使用去污剂来代替天然脂质环境,这通常会导致膜蛋白的结构和/或活性的丧失(Duquesne 等人,2016)。出于这个原因,已经开发了几种替代选择,例如amphipols(Popot,2010),以避免与洗涤剂相关的一些困难并保持膜蛋白的溶解度。几年前,苯乙烯马来酸(SMA)共聚物更常用作低分子量洗涤剂策略的替代品(Dorr et al。,2014; Jamshad et al。 ,2015; Prabudiansyah et al。,2015)。已经证明SMA能够自发地溶解生物膜并产生平均尺寸为10nm的圆盘形颗粒。这些纳米圆盘(称为SMALP)含有嵌入来自膜和SMA共聚物的脂质中的蛋白质混合物,将颗粒保持在溶液中(Knowles 等人,,2009)。 ...

Increasing the Membrane Permeability of a Fern with DMSO
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract]  Cell membrane prevents the entrance of extra molecules (e.g., transcription and translation inhibitors) into the cell. For studying the physiological effects of transcription and translation inhibitors on Hymenophyllum caudiculatum fronds, we incubate fronds with 0.1% DMSO to test if this increases cell membrane permeability relative to incubation with ultrapure water. The study showed that DMSO could significantly improve the cell membrane permeability of filmy fronds. [摘要]  细胞膜防止额外分子(例如,转录和翻译抑制剂)进入细胞。 为了研究转录和翻译抑制剂对Hymenophyllum caudiculatum叶的生理影响,我们将叶用0.1%DMSO温育以测试它是否相对于用超纯水孵育增加细胞膜渗透性。 该研究表明DMSO可显着提高膜状叶的细胞膜透性。

【背景】薄膜蕨类植物最显着的特征之一是,除了维管组织外,叶子由单细胞层组成,缺少气孔。 在我们以前的工作中(Garcéset al。 2018年),我们用放线菌酮或放线菌素D孵育了Hymenophyllum caudiculatum叶,分别研究翻译或转录抑制的作用。 如果与薄膜蕨类植物一起孵育的外源抑制剂不影响植物生理,可能是因为抑制剂不能进入细胞。 为了改善抑制剂进入细胞,我们测试了0.1%DMSO水溶液是否对细胞膜通透性有影响,观察到碘化丙啶(PI)进入细胞。

In vitro Analysis of Ubiquitin-like Protein Modification in Archaea
Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract]  The ubiquitin-like (Ubl) protein is widely distributed in Archaea and involved in many cellular pathways. A well-established method to reconstitute archaeal Ubl protein conjugation in vitro is important to better understand the process of archaeal Ubl protein modification. This protocol describes the in vitro reconstitution of Ubl protein modification and following analysis of this modification in Haloferax volcanii, a halophilic archaeon serving as the model organism. [摘要]  泛素样(Ubl)蛋白广泛分布于古细菌中并参与许多细胞途径。 为了更好地理解古细菌Ub1蛋白质修饰的过程,重建体外古细菌Ubl蛋白质缀合物的完善方法是很重要的。 该协议描述了Ubl蛋白质修饰的体外重建以及在作为模型生物的嗜盐古细菌Haloferax volcanii 中对这种修饰进行分析。

【背景】泛素(Ub)与靶蛋白共价连接的过程被称为泛素化,其控制真核细胞中大量的细胞过程(Glickman和Ciechanover,2002; Komander和Rape,2012)。遍在蛋白化由一系列酶(包括Ub激活酶(E1),Ub结合酶(E2s)和Ub连接酶(E3s))催化。泛素化的体外重建是确定酶之间或E3与蛋白质底物之间特异性的有用测定法(Zhao等人,2012)。在古细菌中,Ubl蛋白SAMP采用Ub折叠,并且与E1样酶UbaA催化的蛋白靶标异肽连接[Maupin-Furlow,(2014)综述]。尽管E1同系物在古细菌中广泛存在,但基于一级序列比较,在大多数古细菌中未预测经典E2或E3酶。我们最近对Haloferax volcanii的研究表明甲硫氨酸亚砜还原酶A(MsrA)是Ubl蛋白质修饰(sampylation)与UbaA一起在体内温和的氧化条件下和< (体外)(fu="">

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