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Glycerol

甘油

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: G5516
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Nuclear/Cytoplasmic Fractionation of Proteins from Caenorhabditis elegans
Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract]  C. elegans is widely used to investigate biological processes related to health and disease. To study protein localization, fluorescently-tagged proteins can be used in vivo or immunohistochemistry can be performed in whole worms. Here, we describe a technique to localize a protein of interest at a subcellular level in C. elegans lysates, which can give insight into the location, function and/or toxicity of proteins. [摘要]  ℃。 线虫>广泛用于研究与健康和疾病相关的生物过程。 为了研究蛋白质定位,荧光标记的蛋白质可用于体内>或免疫组织化学可在整个蠕虫中进行。 在这里,我们描述了一种在 C中亚细胞水平定位感兴趣的蛋白质的技术。 线虫>裂解物,可以洞察蛋白质的位置,功能和/或毒性。
【背景】亚细胞分级已用于不同的模式生物中以鉴定和研究细胞核,细胞膜和细胞质中的蛋白质功能。 例如,当聚集倾向蛋白定位于细胞核或细胞质中时,它们的毒性可能更大(Kontopoulos et al。>,2006; Barmada et al。>,2010)。 在这里,我们提供了一个协议(改编自Chen et al。>,2000和La Rocca et al。>,2007)来定位的细胞核和细胞质组分中的特定蛋白质。>℃。线虫>。

Rice Ragged Stunt Virus Propagation and Infection on Rice Plants
Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract]  Virus inoculation is a basic experimental procedure to evaluate the resistance of a rice variety or a transgenic material upon virus infection. We recently demonstrated that Rice Ragged Stunt Virus (RRSV), an oryzavirus that is transmitted by brown planthopper (BPH), can suppress jasmonic acid-mediated antiviral defense through the induction of microRNA319 and facilitate virus infection in rice. To verify this, we performed virus inoculation experiments on wild-type rice plants and miR319-TCP21-associated transgenic rice plants through a modified group inoculation method. ... [摘要]  病毒接种是评估水稻品种或转基因材料对病毒感染的抗性的基本实验程序。 我们最近证明,由褐飞虱(BPH)传播的 Rice Ragged Stunt Virus >(RRSV)是一种 oryzavirus >,可以通过诱导抑制茉莉酸介导的抗病毒防御 microRNA319并促进水稻中的病毒感染。 为了验证这一点,我们通过改良的组接种方法对野生型水稻植物和miR319-TCP21相关的转基因水稻植物进行了病毒接种实验。 在这里,我们介绍了水稻植物RRSV繁殖和感染过程的详细程序。
【背景】研究病毒发病机制和筛选抗病毒水稻品种已经在克服水稻病毒病和保持粮食安全方面做了大量工作。 在该领域中,病毒接种是评估转基因材料或水稻品种的抗性的必要且可靠的方法。 水稻粗糙特技病毒>(RRSV)可以在许多亚洲国家以持续繁殖的方式通过褐飞虱传播水稻褴褛特技病(Ling et al。>,1978; Hibino,1979)。 两种经典方法,包括单苗接种和组接种,已用于进行病毒接种实验(Zhang et al。>,2013)。 通过修改传统的群体接种方法,我们提供了一种与自然感染条件非常相似的便捷方法。

Expression and Ni-NTA-Agarose Purification of Recombinant Hepatitis C Virus E2 Ectodomain Produced in a Baculovirus Expression System
Author:
Date:
2018-10-05
[Abstract]  In this protocol, we describe the production and purification of the ectodomain of the E2661 envelope protein (amino acids 384-661) of the Hepatitis C virus, which plays a fundamental role in the entry of the virus into the host cell. This protein has been expressed in both prokaryotic and eukaryotic systems but in small quantities or without native protein characteristics. In our case, we use the Baculovirus expression system in insect cells. E2661 is secreted into the extracellular medium and purified by means of affinity chromatography a Ni-NTA-column because the ... [摘要]  在该协议中,我们描述了丙型肝炎病毒的E2 661 包膜蛋白(氨基酸384-661)的胞外域的产生和纯化,其在病毒进入中起基础作用。 进入宿主细胞。 该蛋白质已经在原核和真核系统中表达,但是少量或没有天然蛋白质特征。 在我们的例子中,我们在昆虫细胞中使用杆状病毒表达系统。 E2 661 被分泌到细胞外培养基中并通过亲和层析Ni-NTA-柱纯化,因为该蛋白质在其氨基末端具有六个组氨酸的标签。 纯化的蛋白质具有天然样构象,并且大量生产,每升约5-6mg。
【背景】丙型肝炎病毒(HCV)是全世界慢性肝炎,肝硬化和肝细胞癌的主要原因(Major et al。,2001; Alter,2006)。此时,没有HCV疫苗,抗病毒药物用于治疗HCV感染(Imran et al。,2014)。然而,治疗费用昂贵且不是100%有效(Kohli et al。,2014)。 HCV包膜糖蛋白E2负责与细胞受体的相互作用,因此它是研究病毒感染周期的第一步的主要候选者。由于糖基化和聚集,先前的表达系统产生低水平的异质蛋白质,并且难以区分经历生产性和非生产性折叠的分子(Flint ...

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