{{'Search' | translate}}
 

TWEEN® 20

TWEEN ® 20

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: P1379
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Purification of Soluble Recombinant Human Tau Protein from Bacteria Using Double-tag Affinity Purification
Author:
Date:
2018-11-20
[Abstract]  Dysfunction of the microtubule-associated protein Tau (encoded by the MAPT gene) has been implicated in more than twenty neurodegenerative diseases, including Alzheimer’s. As such, the physiological and disease-relevant functions of Tau have garnered great interest in the research community. One barrier hampering investigations into the functions of Tau and the generation of pharmacological agents targeting Tau has been the difficulty of obtaining soluble Tau protein in purified form. Here, we describe a protocol that uses dual affinity tag purification to selectively purify soluble ... [摘要]  微管相关蛋白Tau(由 MAPT 基因编码)的功能障碍已经涉及20多种神经退行性疾病,包括阿尔茨海默病。 因此,Tau的生理和疾病相关功能引起了研究界的极大兴趣。 妨碍对Tau功能的研究和产生靶向Tau的药理学试剂的一个障碍是难以获得纯化形式的可溶性Tau蛋白。 在这里,我们描述了一种方案,该方案使用双亲和标签纯化从细菌中选择性纯化可溶性重组Tau蛋白,所述细菌对于下游应用具有功能活性,包括免疫,微管结合测定和蛋白质 - 蛋白质相互作用研究。
【背景】Tau传统上被定义为微管结合蛋白;然而,在人类疾病中,Tau可以与轴突微管分离并错误定位到其他神经元区室,包括体细胞,树突和突触,其中与非微管蛋白和结构的相互作用驱动神经元功能障碍(Iqbal et al。 ,2016; Wang和Mandelkow,2016; Zhou et al。,2017; McInnes et al。,2018)。尽管神经原纤维缠结形式的Tau聚集体通常存在于死后患病的脑组织中,但研究表明,可溶性Tau,而不是聚集的Tau,是神经元功能障碍的主要原因(Crimins et al。,2012 ; Polydoro et al。,2014; Koss et al。,2016)。因此,研究Tau在疾病中的可溶性功能,例如鉴定蛋白质 - ...

Nuclear/Cytoplasmic Fractionation of Proteins from Caenorhabditis elegans
Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract]  C. elegans is widely used to investigate biological processes related to health and disease. To study protein localization, fluorescently-tagged proteins can be used in vivo or immunohistochemistry can be performed in whole worms. Here, we describe a technique to localize a protein of interest at a subcellular level in C. elegans lysates, which can give insight into the location, function and/or toxicity of proteins. [摘要]  ℃。 线虫>广泛用于研究与健康和疾病相关的生物过程。 为了研究蛋白质定位,荧光标记的蛋白质可用于体内>或免疫组织化学可在整个蠕虫中进行。 在这里,我们描述了一种在 C中亚细胞水平定位感兴趣的蛋白质的技术。 线虫>裂解物,可以洞察蛋白质的位置,功能和/或毒性。
【背景】亚细胞分级已用于不同的模式生物中以鉴定和研究细胞核,细胞膜和细胞质中的蛋白质功能。 例如,当聚集倾向蛋白定位于细胞核或细胞质中时,它们的毒性可能更大(Kontopoulos et al。>,2006; Barmada et al。>,2010)。 在这里,我们提供了一个协议(改编自Chen et al。>,2000和La Rocca et al。>,2007)来定位的细胞核和细胞质组分中的特定蛋白质。>℃。线虫>。

Identifying Protein Interactions with Histone Peptides Using Bio-layer Interferometry
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  Histone post-translational modifications (PTMs) regulate numerous cellular processes, including gene transcription, cell division, and DNA damage repair. Most histone PTMs affect the recruitment or exclusion of reader proteins from chromatin. Here, we present a protocol to measure affinity and interaction kinetics between histone peptides and the recombinant protein using Bio-layer interferometry. [摘要]  组蛋白翻译后修饰(PTM)调节许多细胞过程,包括基因转录,细胞分裂和DNA损伤修复。 大多数组蛋白PTM影响从染色质中募集或排除读取蛋白。 在这里,我们提出了一个协议,使用生物层干涉测量法测量组蛋白肽和重组蛋白之间的亲和力和相互作用动力学。

【背景】真核染色质结构大致分为常染色质和异染色质(Cheung和Lau,2005),异染色质结构根据组蛋白翻译后修饰(PTM)的组合进一步细分。这些PTM不仅改变染色质构象,还在基因表达和蛋白质募集中建立直接调节作用(Felsenfeld和Groudine,2003; Allshire和Madhani,2017)。组蛋白PTM的无数组合 - 包括乙酰化,磷酸化,甲基化,泛素化,生物素化,SUMO化和脯氨酸异构化,统称为“组蛋白标记” - 可以被发现,特别是在从核小体核心突出的非结构化N末端尾部( Guetg和Santoro,2012)。这些PTM通过不同“读者”或效应蛋白的活动调节许多细胞过程,包括基因转录,细胞分裂和DNA损伤修复(Suganuma和Workman,2011)(Musselman et al。, 2012)。因此,已经做出很大努力来识别读者的组蛋白修饰。

使用常规方法(例如,表面等离子体共振[SPR]和SPR成像[SPRi]生物传感器)研究读取蛋白与其靶蛋白PTM之间的相互作用通常需要大量底物或复杂的多步实验方法并且由于各种方法特定的限制而变得复杂。这些问题排除了量化相互作用强度的简便性和准确性(Phizicky和Fields,1995; ...

产品评论