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Magnesium chloride hexahydrate

氯化镁六水合物

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: M9272
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Company-protocol()
Other protocol()

Conjugation Protocol Optimised for Roseburia inulinivorans and Eubacterium rectale
Author:
Date:
2020-04-05
[Abstract]  Roseburia and Eubacterium species of the human gut microbiota play an important role in the maintaince of human health, partly by producing butyrate, the main energy source of our colonic epithelial cells. However, our knowledge of the biochemistry and physiology of these bacteria has been limited by a lack of genetic manipulation techniques. Conjugative transposons previously introduced into Roseburia species could not be easily modified, greatly limiting their applicability as genetic modification platforms. Modular plasmid shuttle vectors have previously been ... [摘要]  [摘要 ] 人体肠道菌群中的玫瑰菌属和真细菌属在维持人类健康中起着重要作用,部分原因是产生丁酸盐,这是我们结肠上皮细胞的主要能源。但是,由于缺乏基因操作技术,我们对这些细菌的生物化学和生理学的认识受到限制。先前引入玫瑰花属物种的共轭转座子不容易被修饰,极大地限制了它们作为基因修饰平台的适用性。MOD ular质粒穿梭载体先前已经开发了用于梭菌物种,其与共享一个分类次序ř oseburia 和真杆菌,提高这些矢量可以在这些生物体中使用的可能性。在这里,我们描述了一种优化缀合协议使得能够自主复制的质粒的从转印大肠杆菌供体菌株为罗斯氏inulinivorans 和真杆菌rectale 。质粒的模块性质及其通过自主复制在受体细菌中得以维持的能力使其成为研究异源基因表达的理想之选,并成为其他遗传工具(包括反义RNA沉默或II 型移动子中断子基因破坏策略)的平台。

[背景 ] 玫瑰菌和真细菌属人类肠道菌群中含量最高的细菌(Zhernakova 等,2016),它们通过利用饮食和宿主衍生的多糖影响人类健康(Scott 等,2006和2011; Cockburn 等) 。,2015 ; 谢里登等人,2016 )并产生促进健康的代谢物丁酸作为发酵终产物(邓肯等人,2002和2006) 。另外,这些物种能够通过鞭毛调节宿主免疫(Neville ...

Histone Deubiquitination Assay in Nicotiana benthamiana
Author:
Date:
2018-03-05
[Abstract]  Histone modifications are a group of post-translational modifications on histones which can alter chromatin structure and affect gene expression. Histone ubiquitination is a histone modification found in particular on histone H2A and H2B. Histone ubiquitination can be reversed by ubiquitin-specific proteases (UBP). Here, we describe an in vivo assay for histone deubiquitination activity. After infiltrating UBP12 into Nicotiana benthamiana leaves, H2Aub was visualized by immunocytochemistry. Nicotiana benthamiana leaves, which show high agro infiltration efficiency, ... [摘要]  组蛋白修饰是一组组蛋白翻译后修饰,可以改变染色质结构并影响基因表达。组蛋白泛素化是组蛋白H2A和H2B特异性发现的组蛋白修饰。泛素特异性蛋白酶(UBP)可以逆转组蛋白泛素化。在这里,我们描述了组蛋白去泛素化活性的体内试验。在将UBP12渗入烟草叶片中后,通过免疫细胞化学观察H2Aub。表现出高的农业渗透效率的本氏烟草叶用于瞬时UBP12表达,用于节省劳力和时间的方案。 H2Aub水平降低表明UBP12的组蛋白去泛素化活性。 N的核的清晰可视化。本生叶使得该方法能够通过使用特异性抗体容易地测量体内组蛋白修饰的水平,从而提供强大的蛋白质功能线索。因此,该协议是组蛋白去泛素化活性的体外试验的有力补充。

【背景】组蛋白修饰在调节染色质结构和基因表达中发挥重要作用。 研究最深入的组蛋白修饰包括甲基化,乙酰化,磷酸化,泛素化和sumoylation。 然而,引入或去除特定组蛋白修饰的酶并不总是已知的。 强大的体外试验可以确定组蛋白修饰酶的催化潜能,但是体内试验方法对于确认体外试验的特异性反映抗体的特异性是必要的。 体内活动。 在这里,我们描述了一个灵活的协议来测试植物组织中组蛋白修饰酶的活性。本塞姆氏。 尽管我们使用该方案来测试遍在蛋白特异性蛋白酶(UBP)对泛素化H2A的活性,但它也可以容易地用于其他特异性抗体可用的组蛋白修饰。

Dual-sided Voltage-sensitive Dye Imaging of Leech Ganglia
Author:
Date:
2018-03-05
[Abstract]  In this protocol, we introduce an effective method for voltage-sensitive dye (VSD) loading and imaging of leech ganglia as used in Tomina and Wagenaar (2017). Dissection and dye loading procedures are the most critical steps toward successful whole-ganglion VSD imaging. The former entails the removal of the sheath that covers neurons in the segmental ganglion of the leech, which is required for successful dye loading. The latter entails gently flowing a new generation VSD, VF2.1(OMe).H, onto both sides of the ganglion simultaneously using a pair of peristaltic pumps. We expect the described ... [摘要]  在这个协议中,我们介绍了一种有效的方法,用于Tomina和Wagenaar(2017)中使用的电压敏感染料(VSD)加载和水蛭神经节成像。 解剖和染料加载程序是成功完成全神经节VSD成像的关键步骤。 前者需要去除覆盖水蛭节段神经节神经元的鞘,这是成功染料加载所需的。 后者需要使用一对蠕动泵同时轻柔地将新一代VSD VF2.1(OMe).H流入神经节的两侧。 我们期望所描述的技术广泛地转化为其他薄且相对透明的神经系统中的宽视场VSD成像。

【背景】双面显微镜是一种宽视野荧光成像系统,由一对精确对准的显微镜组成,用于观察来自对面的神经元制剂并且一次显示不同的焦平面(Tomina and Wagenaar,2017)。通过将该光学系统与新一代电压敏感染料(VSD),VoltageFluor(Miller等人,2012; Woodford等人,2015),荧光可以同时从不同深度的神经元捕获编码具有高保真度膜电压的信号。我们将这种泛神经元记录系统应用于药用水蛭的神经系统,我们利用电生理学方法诱发虚构行为并定量控制可识别神经元的膜电位(Tomina and ...

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