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NaCl

氯化钠

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: S5886
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Other protocol()

Flow Cytometry Analysis and Fluorescence-activated Cell Sorting of Myeloid Cells from Lung and Bronchoalveolar Lavage Samples from Mycobacterium tuberculosis-infected Mice
Author:
Date:
2020-05-20
[Abstract]  Mycobacterium tuberculosis (Mtb) is transmitted by aerosol and can cause serious bacterial infection in the lung that can be fatal if left untreated. Mtb is now the leading cause of death worldwide by an infectious agent. Characterizing the early events of in vivo infection following aerosol challenge is critical for understanding how innate immune cells respond to infection but is technically challenging due to the small number of bacteria that initially infect the lung. Previous studies either evaluated Mtb-infected cells at later stages of infection when the number of ... [摘要]  [摘要 ] 结核分枝杆菌(Mtb)通过气溶胶传播,可引起严重的肺部细菌感染,如果不及时治疗,可能致命。Mtb现在已成为全球传染病致死的主要原因。表征气溶胶激发后体内感染的早期事件对于了解先天免疫细胞如何对感染做出反应至关重要,但由于最初会感染肺的细菌数量少,因此在技术上具有挑战性。先前的研究或者在肺部细菌数量高得多时在感染后期评估Mtb感染的细胞,或者在体外使用 评估骨髓细胞对Mtb反应的模型系统。在这里,我们介绍一种使用荧光细菌,大剂量气溶胶感染模型和流式细胞术跟踪气溶胶感染和荧光激活细胞分选(FACS)之后立即分离肺中Mtb感染细胞的方法,以分离幼稚的旁观者,和Mtb感染的细胞用于下游应用,包括RNA测序。该协议提供了在肺环境中监视Mtb感染和细胞特异性反应的能力,已知该环境可调节常驻和募集人群的功能。使用此协议,我们发现肺泡巨噬细胞通过上调受转录因子Nrf2调节并有害于细菌早期控制的细胞保护性转录反应,在体内对Mtb感染作出反应。

[背景 ] 气溶胶传播是结核分枝杆菌(Mtb)感染自然周期的关键组成部分,有助于细菌的毒性并导致其在肺部的独特感染模式(North ,1995;Riley 等,1995)。 ; Pai et ...

Purification of Rice Stripe Virus
Author:
Date:
2020-03-20
[Abstract]  Although many spherical and rod-shaped plant virus purification protocols are now available, only a few protocols on filamentous plant virus purification have been published. Here, we report a protocol for large-scale purification of Rice stripe virus (RSV) from RSV-infected rice tissues. RSV virions with high infectivity were first precipitated with polyethylene glycol (PEG) followed by pelleting through primary ultracentrifugation, ultracentrifugation in a glycerol cushion and ultracentrifugation in density gradient. The purified RSV virions can not only be viewed as filamentous particles ... [摘要]  [摘要 ] 尽管现在可以使用许多球形和杆状植物病毒的纯化方案,但有关丝状植物病毒纯化的协议却只有少数。在这里,我们提出一个协议水稻的大规模纯化小号牛肚v IRUS 从RSV感染的水稻组织(RSV)。首先用聚乙二醇(PEG)沉淀具有高感染力的RSV 病毒颗粒,然后通过一次超速离心,在甘油垫层中超速离心和密度梯度超速离心沉淀。纯化的RSV 病毒体不仅可以在电子显微镜下观察为丝状颗粒,而且还可以通过昆虫载体直接注入昆虫体内或在送入水稻之前通过膜饲喂获得。

[背景 ] 许多purificatio n,用于球形和棒状病毒协议已被发表(安德烈é 等人,2002; BALKE 。等人,2018) 。这些协议都依赖于化学沉淀或密度梯度离心。但是,丝状病毒的纯化方案目前受到限制。

大米小号肚v 病毒属(RSV)是负链RNA病毒,属于属纤细病毒,订单Bunyavirales 。在许多东亚国家,RSV经常对水稻生产造成严重损害(Whitfield 等,2015; Liu 等,2018)。与生产球状和包膜病毒体的Bunyavirales 顺序中的其他成员不同,RSV 病毒体是丝状的。然而,RSV基因组编码在纯化的RSV 病毒体中未发现的糖蛋白(Toriyama,19 86; Lu 等人,2019)。已知RSV ...

Cell-free Reconstitution of the Packaging of Cargo Proteins into Vesicles at the trans Golgi Network
Author:
Date:
2020-03-05
[Abstract]  Protein sorting at the trans Golgi network (TGN) plays important roles in targeting newly synthesized proteins to their specific destinations. The aim of this proposal is to reconstitute the packaging of non-Golgi resident cargo proteins into vesicles at the TGN, utilizing rat liver cytosol, semi-intact mammalian cells and nucleotides. The protocol describes how to perform the vesicle formation assay, how to isolate vesicles and how to detect cargo proteins in vesicles. This reconstitution assay can be used to quantitatively measure the efficiency of the packaging of a specific cargo ... [摘要]  [摘要] 反式高尔基体网络(TGN)上的蛋白质分选在将新合成的蛋白质靶向其特定目的地方面起着重要作用。该提议的目的是利用大鼠肝细胞溶质,半完整的哺乳动物细胞和核苷酸,在TGN处将非高尔基驻留的货物蛋白重新包装成囊泡。该协议描述了如何进行囊泡形成测定,如何分离囊泡以及如何检测囊泡中的货物蛋白。该重构测定法可用于定量测量在特定实验条件下将特定货物蛋白包装到TGN的运输小泡中的效率。

[背景] 的反式高尔基体网络(TGN)是在分泌运送路径的必要的交通枢纽。为了确保水泡运输的保真度,真核细胞利用各种蛋白质分选设备将特定的货物蛋白质准确地包装到TGN的运输小泡中,然后运至特定的目的地(Guo 等人,2014)。为了加深我们对TGN分选过程特异性的理解,重要的是开发一种能够忠实地重构TGN囊泡形成和货物分选过程的分析方法。该测定法可用于直接和定量地测量特定因子在调节特定货物蛋白包装到运输小泡中的作用。从内质网(ER)将货物蛋白包装到COPII囊泡中的无细胞重构已得到很好的建立(Kim 等,2005; Kim 等,2007; Merte 等,2010; Yuan 等。,2018;Niu 等,2019;)。已经开发出一种体外测定法,其在TGN处重构特定货物蛋白TGN46在运输小泡中的释放(Ponnambalam 等,1996;Wakana ...

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