| Increasing the Membrane Permeability of a Fern with DMSO
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Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract] Cell membrane prevents the entrance of extra molecules (e.g., transcription and translation inhibitors) into the cell. For studying the physiological effects of transcription and translation inhibitors on Hymenophyllum caudiculatum fronds, we incubate fronds with 0.1% DMSO to test if this increases cell membrane permeability relative to incubation with ultrapure water. The study showed that DMSO could significantly improve the cell membrane permeability of filmy fronds.
[摘要] 细胞膜防止额外分子（例如，转录和翻译抑制剂）进入细胞。 为了研究转录和翻译抑制剂对Hymenophyllum caudiculatum叶的生理影响，我们将叶用0.1％DMSO温育以测试它是否相对于用超纯水孵育增加细胞膜渗透性。 该研究表明DMSO可显着提高膜状叶的细胞膜透性。
【背景】薄膜蕨类植物最显着的特征之一是，除了维管组织外，叶子由单细胞层组成，缺少气孔。 在我们以前的工作中（Garcéset al。 2018年），我们用放线菌酮或放线菌素D孵育了Hymenophyllum caudiculatum叶，分别研究翻译或转录抑制的作用。 如果与薄膜蕨类植物一起孵育的外源抑制剂不影响植物生理，可能是因为抑制剂不能进入细胞。 为了改善抑制剂进入细胞，我们测试了0.1％DMSO水溶液是否对细胞膜通透性有影响，观察到碘化丙啶（PI）进入细胞。
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| Tracking Endocytosis and Intracellular Trafficking of Epitope-tagged Syntaxin 3 by Antibody Feeding in Live, Polarized MDCK Cells
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Author:
Date:
2018-02-05
[Abstract] The uptake and trafficking of cell surface receptors can be monitored by a technique called ‘antibody-feeding’ which uses an externally applied antibody to label the receptor on the surface of cultured, live cells. Here, we adapt the traditional antibody-feeding experiment to polarized epithelial cells (Madin-Darby Canine Kidney) grown on permeable Transwell supports. By adding two tandem extracellular Myc epitope tags to the C-terminus of the SNARE protein syntaxin 3 (Stx3), we provided a site where an antibody could bind, allowing us to perform antibody-feeding experiments on cells with ...
[摘要] 细胞表面受体的摄取和贩卖可以通过被称为“抗体 - 进纸”技术，其在外部使用上应用的抗体来标记培养的活细胞的表面上的受体进行监测。在这里，我们适应传统的抗体喂养实验极化上皮细胞（Madin-Darby犬肾）生长在透性transwell支持。通过添加两个串联胞外Myc表位标签的SNARE蛋白突触3（Stx3）的C末端，我们提供了一种站点，其中与抗体可以结合，使我们能够用不同的顶端和基底外侧膜对细胞进行抗体 - 喂养实验。通过这个程序，我们观察到Stx3的内吞和细胞内运输。具体而言，我们评估从基底外侧膜Stx3的内在化速率和在时间和空间上使用固定在不同时间点的细胞免疫荧光显微镜随后的内吞观察路径。为此，介绍了以下可追踪单层的贩运行为：来自限制膜的靶蛋白。
【背景】SNARE蛋白突触3（Stx3）是已知的建立在极化上皮细胞顶端 - 基底极性（低等人，1996年Delgrossi 等人，1997年Weimbs 等人，1997;低等人，1998;黎等人，2002;低等人
一个典型的12孔细胞培养皿的阱内的transwell小室的聚碳酸酯膜的细胞培养插入物的图1示意图。斯特朗细胞是在膜的顶部和培养将形成紧密的单层做密封关聚碳酸酯膜将顶端介质隔室与基底外侧介质隔室分开。 ...
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