| Surgical Induction of Endometriosis in Female Mice
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Author:
Date:
2020-09-20
[Abstract] Endometriosis is a common gynecological disease characterized by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. It is frequently associated with pain, infertility and a reduced quality of life, and it lacks adequate treatment. Several rodent models of endometriosis have been developed through heterologous and homologous transplantation of endometrial tissue into the abdominal compartment. Here we describe a surgical procedure to generate a syngeneic model of endometriosis in immunocompetent mice with intact uterine and ovarian tissues. In this model, four uterine fragments ...
[摘要] [摘要 ] 子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病，其特征是子宫腔外存在子宫内膜组织。它经常与疼痛，不育和生活质量下降有关，并且缺乏适当的治疗。子宫内膜异位症的几种啮齿动物模型是通过将子宫内膜组织异源和同源移植到腹腔中而开发的。在这里，我们描述了在具有完整子宫和卵巢组织的免疫功能小鼠中产生子宫内膜异位症的同基因模型的手术程序。在该模型中，将来自供体小鼠在二头肌的四个子宫碎片缝合到受体小鼠的腹壁上。手术一个月后，子宫内膜植入物发展成具有腺上皮和间质的囊肿，模仿了子宫内膜异位症女性中观察到的子宫内膜异位病变。因此，该小鼠模型为研究子宫内膜异位症的病理生理学和潜在治疗方法的有效性提供了有价值的工具。
[背景 ] 子宫内膜异位是由子宫外子宫内膜组织的生长所定义的一种慢性妇科疾病，主要在骨盆和腹部表面生长（Zondervan et al。，2018）。它影响了育龄妇女的10％，并且与疼痛，不孕症和生活质量下降有关（Fourquet 等人，2011;Márki 等人，2017; Zondervan 等人，2018）。子宫内膜异位症的可用药物和手术疗法具有不良作用，并且无法长期缓解症状（Falcone和Flyckt，2018年）。因此，需要新的治疗策略，其发展依赖于动物模型的建立，该模型概括了临床子宫内膜异位症的病理生理和行为特征。
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| Testing Bone Formation Induction by Calvarial Injection Assay in vivo
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Author:
Date:
2020-03-20
[Abstract] Bone formation occurs during embryogenesis, skeletal growth and during the process of skeletal renewal throughout life. In the process of bone formation, osteoblasts lay down a collagen-containing matrix, termed osteoid, which is gradually hardened by incorporation of mineral crystals. Although osteoblasts can be induced to differentiate and to deposit mineral in culture, this system does not always provide results that reflect the ability of agents to stimulate bone formation in vivo. This protocol describes a rapid and reliable method for testing local administration of agents on ...
[摘要]
[摘要 ] 骨骼形成发生在胚胎发生，骨骼生长以及整个生命的骨骼更新过程中。在骨形成过程中，成骨细胞沉积了一种含胶原蛋白的基质（称为类骨质），该基质通过掺入矿物质晶体而逐渐硬化。尽管可以诱导成骨细胞分化并在培养物中沉积矿物质，但该系统并不总是提供反映试剂在体内刺激骨骼形成能力的结果。该协议描述了一种快速可靠的方法，用于测试体内局部骨形成剂的局部给药。 在这种方法中，连续5天给小鼠注射相关药物。在用于测试的试剂之前和之后注射荧光染料标记，并通过未脱钙的骨组织学和组织形态计量术收集并分析样品。这提供了一种评估试剂刺激骨形成能力的可靠方法，如果使用短期修饰，也可以用于测试骨中对相同刺激的基因反应。
[背景 ] 骨形成是为骨架的发展所需的基本过程，对于骨骼生长的进展，并保持整个生命骨结构作为骨架不断重塑。骨形成是通过三个步骤发生的过程：（1）富含胶原的类骨质沉积，（2）通过在胶原纤维周围沉积生物磷灰石晶体而发生的类骨矿化，以及（3）矿化的骨质成熟（Blank and Sims ，2019）。这三个步骤由源自共同祖细胞的两种细胞类型介导。成骨细胞沉积类骨质并开始矿化，并且随着类骨质的沉积，一些成骨细胞被包埋在骨基质内并分化为骨细胞（Dallas and Bonewald ，2010）。这些嵌入的细胞还控制骨骼矿化的程度和性质（Vrahnas 等，2019）。 ...
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| Resin-embedded Thin-section Immunohistochemistry Coupled with Triple Cellular Counterstaining
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Author:
Date:
2017-04-05
[Abstract] This protocol was developed to study protein localisation within the vascular bundles of developing tomato fruit however, it can be applied to any resin embedded plant tissue. The vascular bundle is comprised of many different cells that all have unique properties. The mature sieve elements are enucleated and contain sieve plates that comprise of callose. This method has utilised these properties of the sieve element by combining immunohistochemistry for cell wall invertase with counterstaining of aniline blue for callose, DAPI for nucleus and cell structure is shown with the final staining ...
[摘要] 该方案被开发用于研究番茄果实的维管束内的蛋白质定位，但可应用于任何树脂嵌入植物组织。 血管束由许多不同的细胞组成，它们都具有独特的特性。 成熟的筛分元素被去核并含有包含胼lose质的筛板。 该方法通过将细胞壁转化酶的免疫组织化学与苯胺蓝复染以胼cal质结合使用筛选元件的这些性质，细胞核的DAPI和细胞结构用细胞壁的最终染色显示为calcofluor白色。 必须注意的是，按照本协议，这些部分至关重要的是使用明胶平坦固定在滑块上，因此盖板滑移不会移动样品部分。 该方案将适用于所有植物组织，并通过进行复染试验，提供细胞内蛋白质定位的其他证据。
免疫定位一直是用于研究蛋白质在组织内的定位的方法。 该方案不仅局限于感兴趣的蛋白质，还涉及周围组织中的分子结构。 据信成熟的筛子元素被去核并且在筛板内具有丰富的胼cal质沉积。 因此，为了代表这些生物学现象，应用了复染程序。 由于本研究中感兴趣的蛋白质也被认为是定位在质外体中，进一步的复染显示蛋白质和细胞壁的共标记。
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