| Human Endometrial Stem Cell Isolation from Endometrium and Menstrual Blood
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Author:
Date:
2018-01-20
[Abstract] Human endometrial stem cell/stromal cells (hEnSCs) are isolated from endometrium or menstrual blood and are recognized as a valuable cell type in tissue engineering and cell therapy. Furthermore, hEnSCs, which have CD90 (a mesenchymal marker), CD105 (endoglin), CD44, CD146 (endometrial stem cell markers) and lack CD31 (Endothelial marker), CD34 (hematopoietic marker) and CD133 on the cell surface, are a new source of mesenchymal stem/stromal cells. Additionally, these cells can be encapsulated into self-assembling peptide nanofibers as a 3D scaffold for applications in the treatment of ...
[摘要] 人类子宫内膜干细胞/基质细胞（hEnSCs）是从子宫内膜或经血中分离出来的，在组织工程和细胞治疗中被公认为有价值的细胞类型。 此外，在细胞表面具有CD90（间充质标记），CD105（内皮糖蛋白），CD44，CD146（子宫内膜干细胞标记）和缺乏CD31（内皮标记），CD34（造血标记）和CD133的hEnSCs是新的 间充质干细胞/基质细胞的来源。 此外，这些细胞可以封装成自组装肽纳米纤维作为三维支架应用于治疗神经退行性疾病。 在这里，我们描述了从子宫内膜或经血中分离hEnSC的方案。
【背景】正在研究细胞替代治疗，作为治疗神经退行性疾病（如阿尔茨海默病，中风和脊髓损伤）的新策略（Tavakol等人，2014b; 2015; 2016a和2016c）。子宫内膜干细胞/基质细胞（hEnSCs）可以从经血（Azedi等人，2014和2017）和子宫内膜分离。这些细胞具有脂肪形成（Khanmohammadi等人，2014），成骨（Darzi等人，2012）和软骨形成（Kazemnejad等人， >，2012）分化潜力。此外，这些细胞可以与支架组合用作组织工程应用中智能细胞支架的成分（Tavakol等人，2014a; 2016b和2017）。值得注意的是，诸如外来体，微泡和其他组分的细胞区室被认为比使用全细胞的治疗更安全。 ...
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| Activity-based Pull-down of Proteolytic Standard and Immunoproteasome Subunits
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Author:
Date:
2016-12-20
[Abstract] Activity-based probes (ABP) are small organic molecules that irreversibly bind to the active center of a specific enzyme family and may be coupled to a fluorophore or an affinity tag (Li et al., 2013). Here, we describe a method to pull-down active catalytic standard and immunoproteasome subunits in cell lysates using the biotinylated, proteasome-specific ABP Biotin-Epoxomicin (Bio-EP). Covalent labeling of the active catalytic subunits with Bio-EP is followed by a pull-down using streptavidin-coated beads. After elution from the beads, enriched subunits may be detected via Western ...
[摘要] 基于活性的探针（ABP）是不可逆地结合特定酶家族的活性中心并且可以偶联至荧光团或亲和标签的小有机分子（Li等人，2013）。在这里，我们描述了使用生物素化的蛋白酶体特异性ABP生物素 - 环氧丙素（Bio-EP）在细胞裂解物中下拉活性催化标准和免疫蛋白酶体亚基的方法。用Bio-EP共价标记活性催化亚单位，然后使用链霉抗生物素蛋白包被的珠子进行下拉。从珠中洗脱后，可以通过Western印迹，串联质谱法（Li et al。，2013）或其他技术检测富集的亚单位。
背景 蛋白酶体是存在于真核细胞的细胞核和细胞质中的桶形多分子酶复合物。蛋白质降解是重要的，包括加工MHC I呈递的抗原肽，并调节许多细胞过程（Kammerl和Meiners，2016）。在造血起源的细胞中，标准（组成型）蛋白酶体通常被免疫蛋白酶体（Meiners等人，2014）所替代，其在三种不同的催化活性β-亚基的掺入中不同（图1）。
为了研究单个催化亚基的分子功能并调节生理过程，亚基特异性蛋白酶体抑制剂的发展是必不可少的。 de ...
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