| Measurement of the Galactanase Activity of the GanB Galactanase Protein from Bacillus subtilis
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Author:
Date:
2017-04-05
[Abstract] The activity of the endo-β-1,4-galactanase GanB from B. subtilis on the high molecular weight β-1,4-galactan was determined quantitatively by the measurement of the increase of the reducing power or with the dyed substrate Azo-galactan. The generated degradation products were analyzed using thinlayer-chromatography (TLC) or high-performance anion-exchange chromatography (HPAEC).
[摘要] 来自B的内切-β-1,4-半乳糖苷酶GanB的活性。 通过测量还原力的增加或染色底物偶氮半乳聚糖来定量测定高分子量β-1,4-半乳聚糖上的枯草芽孢杆菌。 使用薄层色谱（TLC）或高效阴离子交换层析（HPAEC）分析产生的降解产物。
枯草芽孢杆菌具有用于植物细胞壁多糖的综合系统，包括编码半乳聚糖利用元素的基因簇ganSPQAB（Watzlawick等人，2016）。 半乳聚糖是高分子量半乳糖，并且在果胶中被认为是I型鼠李糖半乳糖醛酸的侧链。 其降解通过内切β1,4半乳聚糖酶（EC 3.2.1.89）进行。 半乳聚糖的利用。 枯草芽孢杆菌涉及细胞外半乳聚糖酶GanB，裂解链内的高分子半乳聚糖，并产生进入细胞壁的短的低聚物进一步降解。 来自的 ganB 基因。 枯草芽孢杆菌在大肠杆菌（Watzlawick等人，2016）中克隆并表达，纯化的His标记的成熟蛋白的酶学性质由 半乳聚糖酶测定。
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| Hydrogen Peroxide Measurement in Arabidopsis Root Tissue Using Amplex Red
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Author:
Date:
2016-11-05
[Abstract] This protocol describes the measurement of hydrogen peroxide (H2O2) content in Arabidopsis root tissue by using the Amplex® Red Hydrogen Peroxide/Peroxidase Assay Kit. When root tissue is disrupted and resuspended in phosphate buffer, H2O2 is released from the cells. The obtained root extracts containing H2O2 can be mixed with a solution containing Amplex® Red reagent (10-acetyl-3,7-dihydrophenoxazine). In the presence of horseradish peroxidase, the Amplex® Red reagent reacts with H2 ...
[摘要] 该方案描述了在拟南芥根组织中通过使用Amplex来测量过氧化氢（H 2 O 2 O 2）含量。 sup>红色过氧化氢/过氧化物酶测定试剂盒。当根组织被破坏并重新悬浮在磷酸盐缓冲液中时，H 2 O 2 O 2从细胞中释放。可以将获得的含有H 2 O 2 O 2的根提取物与含有Amplex Red试剂（10-乙酰基-3,7-二 - 。在辣根过氧化物酶的存在下，Amplex Red试剂与H 2 O 2以1:1的化学计量反应。所得产物是红色荧光化合物试卤灵，其可以通过荧光测定或分光光度法检测。我们的方案是基于Amplex ®红色过氧化氢/过氧化物酶测定试剂盒的手册，并描述了一步一步的程序，详细描述必要的控制和数据分析。我们还包括旨在帮助用户容易地用其自己的样品再现测定的方案，说明和实施例的修改。
[背景] 活性氧（ROS），例如H 2 O 2 O 2可以在该细胞是发育提示或应激条件的结果。在大量，ROS积累可能是有害的，通过造成细胞损伤。然而，增加的ROS产生也可以具有信号传导作用，并且作为控制下游细胞反应的第二信使。在植物中，对于许多非生物胁迫，例如干旱，盐度，温度胁迫和营养缺乏，已经显示ROS的信号传导作用（Mittler，2002; Mittler和Blumwald，2015; Xia等人）。 ，2015）。在我们最近的出版物Le ...
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