| Protocol to Test the Effect of Sorbitol in vitro on Hybrid Larch (Larix x eurolepis Henry) Emblings
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] This protocol presents a method to test the effect of sorbitol in vitro on hybrid larch plants derived from somatic embryogenesis. We have tested four different media variants, one control variant without sorbitol and three variants of decreasing water potential corresponding to sorbitol concentrations in the culture medium of 4%, 10%, and 20%. We cultured two hybrid larch clones on these media during 35 days and assessed their vitality and weight growth after this time.
[摘要] 该方案提供了一种测试山梨醇体外对体细胞胚胎发生的杂交落叶松植物的影响的方法。 我们测试了四种不同的培养基变体，一种不含山梨糖醇的对照变体和三种降低水势的变体，对应于培养基中山梨糖醇浓度为4％，10％和20％。 我们在35天内在这些培养基上培养了两个杂交落叶松克隆，并在此之后评估它们的活力和体重增长。
【背景】林木育种可受益于允许在其发育的早期阶段对植物系进行高通量筛选的方法。这些方法有助于界定后期在田间测试的基因型的数量，这是在林木物种需要相当大的空间的情况下的问题。一种可能性是在体外测试幼苗，该过程具有促进均匀和良好控制的实验条件的额外优点。对生物和非生物胁迫因子的耐受性的方面可以例如在体外进行筛选。其中，干旱压力在改善计划中受到特别关注。模拟缺水的常用方法是在根部支持培养基中添加渗透压，从而降低水的可用性。渗透压剂可以是离子型NaCl或非离子型甘露醇，山梨糖醇或PEG（聚乙二醇）（Singh和Singh，2015）。我们已经开发出一种方案，该方案允许测试山梨糖醇在体外对来自体细胞胚胎发生的杂交落叶松嵌入的影响。
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| Ensifer-mediated Arabidopsis thaliana Root Transformation (E-ART): A Protocol to Analyse the Factors that Support Ensifer-mediated Transformation (EMT) of Plant Cells
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Author:
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2017-10-05
[Abstract] Ensifer adhaerens OV14, a soil borne alpha-proteobacteria of the Rhizobiaceae family, fortifies the novel plant transformation technology platform termed ‘Ensifer-mediated transformation’ (EMT). EMT can stably transform both monocot and dicot species, and the host range of EMT is continuously expanding across a diverse range of crop species. In this protocol, we adapted a previously published account that describes the use of Arabidopsis thaliana roots to investigate the interaction of A. thaliana and Agrobacterium tumefaciens. In our laboratory, ...
[摘要] OV14;土壤传播的根瘤菌科的α-变形细菌强化了新型植物转化技术平台，称为“插入式”介导的转化（EMT）。 EMT可以稳定地转化单子叶植物和双子叶植物，并且EMT的宿主范围在不同范围的作物种类上不断扩大。在这个协议中，我们调整了一个以前发布的帐户，描述了使用拟南芥根系来研究 A的相互作用。 thaliana 和根癌土壤杆菌。在我们的实验室，我们通常使用 A。 thaliana 根外植体，以检查增强EMT效用的因素。此外，E-ART协议可用于研究E的转录反应。接种外植体组织后的寄主植物，宿主植物，不同的引物菌株/突变体的可变性以及测试A的易感性。作为破译支持EMT的机制的手段。【背景】推进“Ensifer”介导的转化（EMT）技术以成功地转化双子叶菊，即拟南芥，马铃薯Solanum tuberosum ，Nicotiana tabacum ，Manihot esculenta ，欧洲油菜和单子叶植物;之前曾报道过（Wendt等人，2012; Zuniga-Soto等人），2015; Chavarriaga-Aguirre et al。，2016; Rathore等人，2016）。另外，E的基因组分析。 （2014）发现，该细菌具有7.7Mb的基因组，其包含两条环状染色体（3.96Mb和2.01Mb）和两条质粒（1.61Mb和125Kb） ）。 ...
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| Quantitative Determination of Ascorbate from the Green Alga Chlamydomonas reinhardtii by HPLC
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2016-12-20
[Abstract] Ascorbate (Asc, also called vitamin C) is of vital importance to the cellular functions of both animals and plants. During evolution, Asc has become one of the most abundant metabolites in seed plants; however, Asc contents in cyanobacteria, green algae and bryophytes are very low. Here we describe a sensitive and reliable HPLC method for the quantitative determination of cellular Asc content in the green alga Chlamydomonas reinhardtii.
[摘要] 抗坏血酸（Asc，也称为维生素C）对动物和植物的细胞功能至关重要。 在进化过程中，Asc已经成为种子植物中最丰富的代谢物之一; 然而，蓝藻，绿藻和苔藓植物中的Asc含量非常低。 在这里，我们描述了一种灵敏可靠的HPLC方法，用于定量测定绿藻衣藻中细胞Asc含量。
背景 针对高等植物开发了用于确定细胞Asc含量的先前方案，其中细胞Asc的量足够高以用于分析。 这些方案不适用于绿色藻类，因为植物材料的量和细胞Asc的水平通常都受到限制。 因此，需要开发一种灵敏度提高到μM范围来测量绿藻中细胞Asc的新方法。
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