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公司名称: Greiner Bio One International

产品编号: 227270

Induction of Acute or Disseminating Bacterial Pneumonia in Mice and Sampling of Infected Organs for Studying the Host Response to Bacterial Pneumonia

Wanhai Qin, Zhe Liu, Tom van der Poll and Alex F. de Vos

Published online: 2022-01-05

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Other protocol()

Quantification of Bacterial Attachment to Tissue Sections

Author:

Batya Isaacson, Tehila Hadad, Gilad Bachrach and Ofer Mandelboim,

Date:

2018-03-05

[Abstract] Here we describe a method to test bacterial adhesion to paraffin embedded tissue sections. This method allows examining binding of different bacterial strains, transfected with a fluorescent protein reporter plasmid to various tissues, to better understand different mechanisms such as colonization. This assay provides a more physiological context to bacterial binding, than would have been achieved using adhesion assays to cell lines. The sections can be imaged using fluorescent microscopy and adhesion of various bacterial strains can be quantified and tested, simultaneously. [摘要] 在这里我们介绍一种方法来测试石蜡包埋组织切片的细菌粘附。该方法允许检查用荧光蛋白报道质粒转染的不同细菌菌株与各种组织的结合，以更好地理解不同的机制，例如定殖。该测定为细菌结合提供了更多的生理学背景，比使用细胞系的粘附测定法已经实现的更多。可以使用荧光显微镜对切片进行成像，并且可以同时量化和测试各种细菌菌株的粘附。

【背景】许多类型的细菌（共生的和致病的）表达各种粘附分子，允许它们结合到宿主的不同表面（Gur等人，2015; Abed等人，2016年;艾萨克森等人，2017年）。这种粘附是至关重要的，因为它是殖民化的第一步，并在不同的环境中在竞争和生存中发挥作用（Schilling et al。，2001）。这些粘附素中的许多是凝集素，在各种细胞上的糖蛋白上的结合糖部分，如上皮细胞和其他细胞（Abed等人，2016; Isaacson等人，2016）。多年来，许多研究宿主 - 病原体相互作用的小组使用细胞系和组织培养来试图了解细菌对细胞的粘附。组织切片为定植研究提供了更多的生理学背景，因为它们提供了使用体外组织培养几乎不可能获得的组织和结构。此外，在永生化或癌细胞中，细菌可以结合的表面分子的表达模式可能会改变。为了更好地理解细菌粘附的生理学背景，在正常和病理条件下，我们选择使用细菌附着到组织切片。

Expression and Purification of a Mammalian P2X7 Receptor from Sf9 Insect Cells

Author:

Akira Karasawa and Toshimitsu Kawate,

Date:

2017-09-05

[Abstract] The P2X7 receptor is an extracellular ATP-gated ion channel found only in eukaryotes (Bartlett et al., 2014). Due to its unique properties among P2X receptors, such as formation of a large conductance pore, the P2X7 receptor has been implicated in devastating diseases like chronic pain (North and Jarvis, 2013). However, mechanisms underlying the P2X7 specific properties remain poorly understood, partly because purification of this eukaryotic membrane protein has been challenging. Here we describe a detailed protocol for expressing and purifying a mammalian P2X7 receptor using an ... [摘要] P2X7受体是仅在真核生物中发现的胞外ATP门控离子通道（Bartlett等，2014）。由于其P2X受体之间的独特性质，例如大电导孔的形成，P2X7受体已经涉及破坏性疾病如慢性疼痛（North和Jarvis，2013）。然而，P2X7特异性属性的机制仍然知之甚少，部分原因是纯化这种真核膜蛋白是一个挑战。在这里，我们描述了使用昆虫细胞 - 杆状病毒系统表达和纯化哺乳动物P2X7受体的详细方案。 P2X7受体在作为GFP融合蛋白的Sf9昆虫细胞中表达，并用含有Triton X-100洗涤剂的缓冲液溶解。然后使用Strep-Tactin亲和层析在含有十二烷基麦芽糖苷的缓冲液中纯化P2X7-GFP融合蛋白。在通过凝血酶酶切割连接的GFP和Strep-标签后，使用大小排阻色谱分离P2X7受体。该方法通常从6L的Sf9培养物产生约2mg的纯化蛋白质。纯化的蛋白质可以用含有15％甘油的缓冲液在4℃下储存至少2个月，并用于各种功能和结构研究（Karasawa和Kawate，2016）。
【背景】P2X7受体是嘌呤能P2X受体家族的七种亚型之一，并且是广泛疾病如神经退行性疾病，癫痫和神经性疼痛的有希望的新型药物靶点（North和Jarvis，2013; Bhattacharya和Biber， ...

Isolation and Primary Culture of Various Cell Types from Whole Human Endometrial Biopsies

Author:

Flavio Santos Vasconcelos Barros, Jan Joris Brosens and Paul John Brighton,

Date:

2016-11-20

[Abstract] The isolation and primary culture of cells from human endometrial biopsies provides valuable experimental material for reproductive and gynaecological research. Whole endometrial biopsies are collected from consenting women and digested with collagenase and DNase I to dissociate cells from the extracellular matrix. Cell populations are then isolated through culturing, filtering and magnetic separation using cell-surface antigen markers. Here we provide a comprehensive protocol on how to isolate and culture individual cell types from whole endometrial tissues for use in in vitro ... [摘要] 从人子宫内膜活组织检查中分离和原代培养细胞为生殖和妇科研究提供了有价值的实验材料。从同意的妇女收集完整的子宫内膜活检组织并用胶原酶和DNA酶I消化以从细胞外基质中分离细胞。然后通过使用细胞表面抗原标记物的培养，过滤和磁性分离来分离细胞群。在这里，我们提供了如何从整个子宫内膜组织分离和培养个体细胞类型以用于体外实验的全面方案。

[背景] 人子宫内膜是子宫内层最粘的层。其由柱状上皮和基础基质层组成，其经历循环再生，生长和响应于循环激素的转化。子宫内膜衬里分化为腺分泌表型为囊胚植入和成功怀孕提供了一个好客的环境。在没有怀孕这个层脱落，导致月经。从人子宫内膜活组织检查中分离和培养细胞允许在体外功能评估和与患者结果相关的细胞特征的研究。子宫内膜细胞的分离和培养是研究妇科和产科医学的许多方面的非常宝贵的研究模型，包括不孕，植入失败，复发性流产和月经紊乱。全人子宫内膜活检包含人子宫内膜基质细胞（HESCs），腔和子宫内膜上皮细胞（HEEC），红细胞和免疫细胞的混合群体。 ...

产品评论

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