| Primary Culture System for Germ Cells from Caenorhabditis elegans Tumorous Germline Mutants
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Author:
Date:
2017-08-05
[Abstract] The Caenorhabditis elegans germ line is an important model system for the study of germ stem cells. Wild-type C. elegans germ cells are syncytial and therefore cannot be isolated in in vitro cultures. In contrast, the germ cells from tumorous mutants can be fully cellularized and isolated intact from the mutant animals. Here we describe a detailed protocol for the isolation of germ cells from tumorous mutants that allows the germ cells to be maintained for extended periods in an in vitro primary culture. This protocol has been adapted from Chaudhari et al. ...
[摘要] 秀丽隐杆线虫种系是胚芽干细胞研究的重要模型系统。 野生型C。 线虫生殖细胞是合胞体，因此不能在体外培养中分离。 相比之下，来自肿瘤突变体的生殖细胞可以完全被细胞化并从突变动物中完整分离。 在这里，我们描述了从肿瘤突变体中分离生殖细胞的详细方案，其允许生殖细胞在体外原代培养中长时间维持。 该协议已从2016年Chaudhari等人改编。
【背景】秀丽生殖细胞在位于两个性腺臂的远端区域的两个成体干细胞龛中产生（Hansen和Schedl，2013; Kimble和Seidel，2013）。在野生型雌雄同体中，有丝分裂生殖细胞仅限于性腺臂的远端，干细胞生态位。野生型生殖细胞是合胞体，并且包含延伸通过性腺臂中心区域的共同细胞质的开口。 ℃。线虫肿瘤种系突变体在整个性腺中增加了生殖细胞的有丝分裂增殖。我们发现肿瘤种系突变体通常具有完整的细胞生殖细胞，其含有完整的质膜（Chaudhari等人，2016）。这种细胞化允许生殖细胞的分离及其在培养中的维持。该方案描述了分离和维持培养物中肿瘤突变体的生殖细胞的方法学和组织培养基。虽然已经描述了用于C的主要培养物的培养基。 elegans 胚胎和幼虫细胞（Strange等人，2007; Zhang和Kuhn，2013），生殖细胞在这种培养基中不能存活（Chaudhari等人。 ...
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| Determining the Influence of Small Molecules on Hypoxic Prostate Cancer Cell (DU-145) Viability Using Automated Cell Counting and a Cell Harvesting Protocol
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2016-11-20
[Abstract] Cell viability assays are an essential aspect of most cancer studies, however they usually require a considerable labor and time input. Here, instead of using the conventional microscopy and hemocytometer cell counting approach, we developed a cell harvesting protocol and combined it with the automated Countess Automated Cell Counter to generate cell viability data. We investigated the effects of dihydroxylated bile acids on the cell viability of prostate cancer cells grown under hypoxic conditions. We observed that for all conditions, cell viability was relatively unchanged, suggesting these ...
[摘要] 细胞活力测定是大多数癌症研究的一个重要方面，然而，它们通常需要相当多的劳动和时间投入。在这里，而不是使用常规的显微镜和血细胞计数细胞计数方法，我们开发了一个细胞收获协议，并结合自动Countess自动细胞计数器生成细胞活力数据。我们调查二羟基化胆汁酸对缺氧条件下生长的前列腺癌细胞的细胞活力的影响。我们观察到，对于所有条件，细胞活力相对不变，表明这些分子对细胞活力几乎没有或没有影响。自动化方法和细胞收获方案的组合意味着该测定i）容易实施，ii）极其可重复，和iii）其补充更常规的癌症测定数据例如入侵，迁移和粘附。
[背景] 确定任何生物分子的治疗效用是开发新的分子治疗以抵抗癌症进展和发展的关键步骤。作为体外表征的初步步骤，必须评估分子作为抗癌治疗剂的适合性。作为该评估的一部分，细胞活力是小分子的细胞反应的关键决定因素，因为其反映分子维持阈值细胞活力的能力，同时靶向关键癌症进展机制例如。 ，集落性，侵袭和粘附。常规的生存力测定需要包括显微镜，血细胞计数器和手动细胞计数器的大量劳动输入。在这里，我们开发了快速和准确生成细胞活力数据的协议，将补充癌症研究研究（Phelan等人，2016）。
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