| Using the Parafilm-assisted Microdissection (PAM) Method to Sample Rodent Nucleus Accumbens
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Author:
Date:
2020-12-05
[Abstract] Microdissection techniques are very important for anatomical and functional studies focused on neuroscience, where it is often necessary microdissect specific brain areas to perform molecular or anatomical analyses. The parafilm®-assisted microdissection (PAM) was previously described and involves the microdissection of tissue sections mounted on parafilm-covered glass slides. In this work, we describe the use of the PAM method to microdissect rodent nucleus accumbens (NAc). (1) We first describe the best way to perform the mouse euthanasia and how to remove the brain. (2) ...
[摘要] [摘要]显微解剖技术对于专注于神经科学的解剖学和功能研究非常重要，在显微学中，通常有必要对特定的大脑区域进行显微解剖以进行分子或解剖学分析。石蜡膜® -assisted显微切割（PAM）先前描述的，并且涉及安装在封口膜覆盖的载玻片上的组织切片的显微切割。在这项工作中，我们描述了使用PAM方法微分散啮齿动物伏隔核（NAc）。（1）我们首先描述执行小鼠安乐死的最佳方法以及如何去除大脑。（2）接下来，我们介绍如何用石蜡制作的幻灯片® 那将被用来接收大脑切片。（3）接下来，我们描述如何在低温恒温器中处理大脑，如何对齐半球以及如何识别NAc前后限。（4）我们还描述了如何对切片进行染色和脱水，这是促进显微切割和保存大分子的关键步骤。（5）在最后一步，我们描述了如何识别NAc的背腹和后内侧界限，以及最后如何进行该区域的手动显微解剖。这是一种低成本的技术，该技术允许研究者具体microdissect任何脑区域，从该完整的RNA和蛋白质可被提取为执行几个分子分析（例如。，实时PCR，西方印迹和RNA-SEQ）。
[背景]伏隔核（NAC）是位于纹状体的rostroventral部分基底节的一部分。具体而言，NAc是我们称为腹侧纹状体的结构的一部分，该结构也包含嗅觉结节。众所周知，NAc在多巴胺能中脑边缘途径中的作用，其调节动机行为并对情绪和情境行为负责（Baik，2013）。伏隔核已经被牵连的精神疾病（例如，抑郁症），药物成瘾，肥胖，慢性疼痛，这表明在研究这个大脑结构的神经生物学的相关性（内斯特勒和Carlezon，2006;沃尔科夫等，2011;沃尔科夫和Morales，2015；Brandão等，2019； ...
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| Scanning Electron Microscope (SEM) Imaging to Determine Inflorescence Initiation and Development in Olive
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Author:
Date:
2017-10-05
[Abstract] Here we present a protocol that describes how to image the structure of the olive axillary bud meristem with a scanning electron microscope (SEM) in order to characterize its identity and developmental stage. Briefly, the specimen is fixed with glutaraldehyde, saturated with ethanol, dried in a critical point dryer (CPD) system, dissected, coated with a conducting material and imaged with a scanning electron microscopy (SEM).
[摘要] 在这里，我们提出一个协议，描述如何使用扫描电子显微镜（SEM）图像橄榄腋芽分生组织的结构，以表征其身份和发育阶段。 简言之，将样品用戊二醛固定，用乙醇饱和，在临界点干燥器（CPD）系统中干燥，解剖，用导电材料涂覆并用扫描电子显微镜（SEM）成像。
【背景】橄榄（Olea europaea）中开花诱导和花序开始的确切时间是争议的（Haberman等人，2017）。 在橄榄中，花序在冬季结束时从侧芽出现，春季开花。 我们制定了一个协议，通过在一年中的不同时间用SEM对橄榄芽中的分生组织进行成像，更好地表征橄榄花序开始的时间。 在这些SEM图像中，可以明确地确定分生组织结构，并且分生组织的定义水平可以高于以前研究中呈现的芽分生组织部分的图像。
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| Various Modes of Spinal Cord Injury to Study Regeneration in Adult Zebrafish
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Date:
2016-12-05
[Abstract] Spinal cord injury (SCI) in mammals leads to failure of both sensory and motor functions, due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as inability to replace lost neural cells and to stimulate neurogenesis. In contrast, fish and amphibians are capable of regenerating a variety of their organs like limb/fin, jaw, heart and various parts of the central nervous system (CNS). Zebrafish embryo and adult has become a very popular model to study developmental biology, cell biology and regeneration for various reasons. Adult zebrafish, one of the most important vertebrate models ...
[摘要] 哺乳动物的脊髓损伤（SCI）导致感觉和运动功能的失败，这是由于缺乏低于损伤水平的轴突再生以及不能代替失去的神经细胞和刺激神经发生。相比之下，鱼和两栖动物能够再生各种器官，如肢体/鳍，下巴，心脏和中枢神经系统（CNS）的各个部分。斑马鱼胚胎和成人已经成为一个非常受欢迎的模型，研究发育生物学，细胞生物学和再生由于各种原因。成年斑马鱼是研究再生的最重要的脊椎动物模型之一，可以再生许多身体部位，如鳍，下巴，心脏和CNS。在本文中，我们提供如何在成年鱼脊髓造成不同的损伤方式的信息。目前，哺乳动物SCI的重点是使用挤压和挫伤损伤。为了产生与哺乳动物损伤模式相当的实体，我们已经在成年斑马鱼中引入了粉碎模型以及完全横断损伤，其也被认为是研究轴突再生的有价值的模型。在这里，我们提供高度可重复的手术程序的完整描述，包括一些有代表性的结果。此协议已经从我们以前的出版物， viz 改编。简而言之，我们描述了两种不同的损伤模式，挤压和完全横切，并证实了造成的结果
关键字：脊髓，斑马鱼，挤压伤，横切损伤，再生
[背景] 对哺乳动物脊髓的任何损伤导致瘫痪和功能丧失的毁灭性后果。与哺乳动物，斑马鱼绳的损伤反应是相当不同，导致线的修复和再生，然后功能恢复。已经使用多种损伤方案来研究脊髓损伤和下脊椎动物中的功能恢复（Holtzer 1956; ...
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