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Date:
2017-01-20
[Abstract] Eukaryotic cells contain various types of cytoplasmic, non-membrane bound ribonucleoprotein (RNP) granules that consist of non-translating mRNAs and a versatile set of associated proteins. One prominent type of RNP granules is Processing bodies (P bodies), which majorly harbors translationally inactive mRNAs and an array of proteins mediating mRNA degradation, translational repression and cellular mRNA transport (Sheth and Parker, 2003). Another type of RNP granules, the stress granules (SGs), majorly contain mRNAs associated with translation initiation factors and are formed upon ...
[摘要] 真核细胞含有各种类型的细胞质，非膜结合的核糖核蛋白（RNP）颗粒，其由非翻译mRNA和多种相关蛋白组成。一种突出类型的RNP颗粒是加工体（P体），其主要包含翻译失活的mRNA和介导mRNA降解，翻译抑制和细胞mRNA运输的蛋白质阵列（Sheth和Parker，2003）。另一种类型的RNP颗粒，应激颗粒（SGs）主要含有与翻译起始因子相关的mRNA并且在应激诱导的翻译失速（Kedersha等人，2000和1999）中形成。从单细胞生物学研究中获得的多个证据支持了一种模型，其中P体和SG在细胞应激期间物理相互作用以将mRNA转运，转移，临时储存或折返到翻译中（Anderson和Kedersha，2008; Decker和Parker，2012）。 P体和/或SG的量化，分布和共定位是研究RNP颗粒的组成及其对基础细胞过程（如压力反应和翻译调节）的贡献的重要工具。在这个协议中，我们描述了一种量化线虫秀丽隐杆线虫体细胞中P体和SGs的方法。
背景 到目前为止，研究P体和SG的大多数方案是针对酵母或人类细胞系开发的（Buchan et al。，2010）。对多细胞生物体内的体细胞RNP颗粒的功能知之甚少。简单的模型生物体。线虫已广泛用于研究与P体和SG不同的种系特异性P颗粒，以及种系发育和功能的重要结构（Updike和Strome，2010）。虽然所提出的方法的原理可以应用于计数种系特异性P颗粒，但该方案集中于体细胞RNP颗粒的定量。几项研究已经确定了在C中通过miRNA途径的翻译失调的体细胞P体的保守功能。 ...
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