| Spinal Cord Preparation from Adult Red-eared Turtles for Electrophysiological Recordings during Motor Activity
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Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract] Although it is known that the generation of movements is performed to a large extent in neuronal circuits located in the spinal cord, the involved mechanisms are still unclear. The turtle as a model system for investigating spinal motor activity has advantages, which far exceeds those of model systems using other animals. The high resistance to anoxia allows for investigation of the fully developed and adult spinal circuitry, as opposed to mammals, which are sensitive to anoxia and where using neonates are often required to remedy the problems. The turtle is mechanically stable and natural ...
[摘要] 虽然已知在位于脊髓的神经元回路中很大程度地进行运动的产生，但是所涉及的机制仍不清楚。乌龟作为调查脊柱运动活动的示范系统具有优势，远远超过使用其他动物的模型系统。对缺氧的高抗性允许对完全发育和成年脊髓电路进行调查，而不是对缺氧敏感的哺乳动物，并且通常需要使用新生儿来补救问题。乌龟是机械稳定的，天然感觉输入可以诱导多种复杂的运动行为，而不需要神经化学物质的应用。在这里，我们提供了如何使成年龟准备的详细方案，也称为电生理调查的综合准备。在这里，通过机械感觉激活，通过细胞内，细胞外和电图记录来记录单细胞和网络活性，可以诱导后肢刮擦反射。该准备工作是由Petersen等人（2014）和Petersen和Berg（2016）以及其他正在进行的研究开发的。
【背景】脊髓电生理学的研究传统上与机械并发症有关，因为许多运动部件和脊柱的灵活性。为了规避这个问题，脊髓经常从柱中解剖出来并移动到可以进行稳定的电生理记录的室。然而，该过程具有缺点，例如，如果要研究多个电动机行为，则适当激活电动机电路是复杂的。此外，缺乏供血和缺乏氧气对电路的健康和完整性有严重影响。一个可以规避所有这些问题的实验模型是龟制剂（Keifer and ...
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| A Co-culture Model for Determining the Target Specificity of the de novo Generated Retinal Ganglion Cells
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Author:
Date:
2017-04-05
[Abstract] In glaucoma, the output neurons of the retina, the retinal ganglion cells (RGCs), progressively degenerate, leading to irreversible blindness (Ahram et al., 2015). The ex vivo stem cell method to replace degenerated RGCs remains a potentially viable approach (Levin et al., 2004). However, the success of the approach depends upon the ability of the de novo generated RGCs to connect over the long distance with specific targets in the central visual pathway. Here, we describe a protocol to examine the target specificity of the de novo generated RGCs ...
[摘要] 在青光眼中，视网膜的输出神经元，视网膜神经节细胞（RGC）逐渐退化，导致不可逆的失明（Ahram等人，2015）。 替代退化RGCs的离体干细胞方法仍然是潜在可行的方法（Levin等人，2004）。 然而，该方法的成功取决于生成RGC的远程连接与中心视觉通路中特定目标的能力。 在这里，我们描述了一种协议，用于使用共培养方法来检查产生RG的产生RGCs的靶特异性，其中RGCs神经突被允许在特异性（上丘（SC））和非特异性 （下丘，IC）构造目标。
青光眼是全球不可逆失明的最常见原因之一（Tham等人，2014）。其特征在于RGC的进行性退化，视网膜的主要输出神经元，其与大脑连接用于视觉感知。不幸的是，目前尚无治疗RGCs变性的治疗方法。无论是外科手术，药理学还是神经保护，管理方法都不能扭转退行性变化（Danesh-Meyer，2011）。鉴于这种棘手的情况，干细胞治疗已经成为替代死亡RGCs的潜在可行方法。这种方法的成功需要：1）功能性和非致瘤性RGC与多能干细胞的定向分化，以及2）产生RGC的新生靶标特异性。我们的实验室最近展示了一种化学定义的方法，通过重述发育机制（Teotia等人，2016），允许RGCs从胚胎干（ES）/诱导的多能干细胞（iPS）细胞中的定向分化。所得的RGC是稳定的，功能性的和非致瘤性的。然而，远离干细胞在青光眼RGC变性中的生物细胞的成功取决于它们的轴突在中心视觉途径中找到适当靶标的能力。移植后，RGC的轴突必须在视网膜内导航，作为视神经退出，决定在视交叉处交叉或不交叉，并达到建立视网膜连接的具体目标。我们已经证明ES ...
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| Analysis of the Virulence of Uropathogenic Escherichia coli Strain CFT073 in the Murine Urinary Tract
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Author:
Date:
2017-02-05
[Abstract] This urinary tract infection model was used to monitor the efficacy of a new virulence factor of the uropathogenic Escherichia coli strain CFT073 in vivo. The new virulence factor which we designated TIR-containing protein C (TcpC) blocks Toll-like receptor signaling and the NLRP3 inflammasome signaling cascade by interacting with key components of both pattern recognition receptor systems (Cirl et al., 2008; Waldhuber et al., 2016). We infected wild type and knock-out mice with wildtype CFT073 and a mutant CFT073 strain lacking tcpC. This protocol ...
[摘要] 该尿路感染模型被用于监测新生的致病性大肠杆菌菌株CFT073在体内的功效。我们指定含TIR的蛋白C（TcpC）的新的毒力因子通过与模式识别受体系统的关键组分相互作用来阻断Toll样受体信号传导和NLRP3炎性信号级联反应（Cirl等人）。 ，2008; Waldhuber等人，2016）。我们用野生型CFT073和缺乏tcpC的突变体CFT073菌株感染野生型和敲除小鼠。该协议描述了小鼠如何感染，如何制备CFT073以及如何监测感染。该方案源于我们以前发表的工作，并允许我们证明TcpC是一种强大的毒力因子，通过增加CFT073在尿液和肾脏中的细菌负担。此外，TcpC负责肾脓肿的发展，因为感染具有野生型但不是tcpC的缺乏CFT073突变体的小鼠引起这种并发症。
背景 尿路感染（UTIs）是全世界最常见的细菌感染（Dielubanza和Schaeffer，2011），主要是由欧洲病原大肠杆菌（UPEC）引起的（Zhang和Foxman，2003）。复发性感染率高（Dielubanza和Schaeffer，2011），抗生素抗性E的出现也有所增加。大肠杆菌菌株（Eurosurveillance editorial，2015）。因此，为了开发新的治疗剂，对宿主和细菌因子对尿路感染病理生理学的了解具有很高的相关性。
＆nbsp;鼠类UTI模型系统是主要使用的动物模型系统，用于研究UPEC分离株和细菌 ...
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