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1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (16:0-18:1 PC)

公司名称: Avanti Lipids Polar
产品编号: 850457
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Assay to Measure Interactions between Purified Drp1 and Synthetic Liposomes
Author:
Date:
2017-05-05
[Abstract]  A mitochondrion is a dynamic intracellular organelle that actively divides and fuses to control its size, number and shape in cells. A regulated balance between mitochondrial division and fusion is fundamental to the function, distribution and turnover of mitochondria (Roy et al., 2015). Mitochondrial division is mediated by dynamin-related protein 1 (Drp1), a mechano-chemical GTPase that constricts mitochondrial membranes (Tamura et al., 2011). Mitochondrial membrane lipids such as phosphatidic acid and cardiolipin bind Drp1, and Drp1-phospholipid interactions provide key ... [摘要]  线粒体是一种动态的细胞内细胞器,主动分裂和融合以控制细胞的大小,数量和形状。线粒体分裂和融合之间的调节平衡是线粒体功能,分布和周转的基础(Roy等,2015)。线粒体分化是由动力蛋白相关蛋白1(Drp1)介导的,其是限制线粒体膜的机械化学GTP酶(Tamura等人,2011)。线粒体膜脂质如磷脂酸和心磷脂结合Drp1,并且Drp1磷脂相互作用提供线粒体分裂的关键调控机制(Montessuit等人,2010; Bustillo-Zabalbeitia等人2014年; Macdonald等人,2014年; Stepanyants等人,2015; Adachi等人,2016)。在这里,我们描述了使用纯化的重组Drp1和具有定义的一组磷脂的合成脂质体定量测量Drp1与脂质的相互作用的生物化学实验。该测定使得可以定义蛋白质 - 脂质相互作用的特异性以及头基和酰基链的作用。

背景 蛋白质和膜脂质的相互作用对于细胞如细胞器分裂中生物膜的重塑至关重要。在线粒体分裂中,Drp1限制线粒体膜并驱动该膜重塑过程。我们最近显示,信号磷脂,磷脂酸与Drp1相互作用,并通过限制线粒体上的组装分裂机制(Adachi等人,2016)产生启动步骤。 Drp1识别磷脂酸的头基和酰基链。为了分析Drp1-磷脂酸结合,我们建立了几种蛋白质 - ...

Liposome Flotation Assays for Phosphoinositide-protein Interaction
Author:
Date:
2017-03-05
[Abstract]  Phosphoinositides are rare membrane lipids involved in the control of the major cellular functions and signaling pathways. They are able to recruit specific effector proteins to the cytosolic face of plasma membrane and organelles to coordinate a vast variety of signaling and trafficking processes, as well to maintain specific identity of the different subcellular compartments (Di Paolo and De Camilli, 2006; Lemmon, 2003). Therefore, analysis of these effectors’ binding properties and specificity towards different phosphoinositides is crucial for the understanding of their cellular functions. ... [摘要]  磷酸肌醇是涉及控制主要细胞功能和信号通路的稀有膜脂质。他们能够将特异性效应物蛋白募集到质膜和细胞器的胞质表面,以协调各种信号传递和转运过程,并保持不同亚细胞区室的特定身份(Di Paolo和De Camilli,2006; Lemmon, 2003)。因此,这些效应物对不同磷酸肌醇的结合特性和特异性的分析对于了解其细胞功能至关重要。该方案描述了表征蛋白质与不同含磷酸肌醇的囊泡结合的方法。

背景 分析蛋白质 - 磷酸肌醇结合和对磷酸肌醇家族不同成员的特异性的几种方法:脂质覆盖,脂质浮选测定和表面等离子体共振(SPR)。脂质浮选测定法包括将单层囊泡与目的蛋白质孵育,随后在蔗糖垫上浮选囊泡,其将单独的囊泡结合的蛋白质与未结合的蛋白质和囊泡分离。与其他方法相比,脂质浮选测定是i)在技术上比SPR更容易和更便宜,ii)与蛋白质重叠测定相比,更具体和更接近于生理条件,因为它模拟膜的曲率,其中脂质被干燥平的硝酸纤维素膜。该方案描述了重组GST标记的蛋白质与确定大小和脂质组成的单层囊泡的结合,特别是关于对不同单磷酸化磷酸肌醇(PIP)的特异性。

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