Immunofluorescence Analysis of Human Endocervical Tissue Explants Infected with Neisseria gonorrhoeae
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Author:
Date:
2018-02-05
[Abstract] Colonization and penetration of the epithelium is the infection-initiating route of mucosal pathogens. The epithelium counteracts infection by eliciting host cell responses while maintaining the mucosal barrier function. The obligate human sexually transmitted bacterium Neisseria gonorrhoeae, or gonococcus (GC) infects the female reproductive tract primarily from the endocervical epithelium. Due to lack of an infection model that mimics all aspects of human infections in the female reproductive tract, GC pathogenesis is poorly understood. This protocol takes advantage of the ...
[摘要] 上皮的定植和穿透是粘膜病原体的感染启动途径。 上皮细胞通过引发宿主细胞应答来抵抗感染,同时维持粘膜屏障功能。 专性人类性传播细菌淋病奈瑟氏球菌或淋球菌属(GC)主要从宫颈内膜上皮感染女性生殖道。 由于缺乏模仿女性生殖道人类感染的各个方面的感染模型,GC发病机制知之甚少。 该方案利用培养物中繁殖的人宫颈组织的生存力和功能完整性来产生体外感染模型。 这种组织模型保持了感染目标和环境的性质,而没有任何操作,如病毒永生化上皮细胞。 使用免疫荧光显微镜,分析GC与子宫颈上皮细胞的相互作用。
【背景】淋病奈瑟菌(GC)感染人类生殖器上皮,引起淋病,一种常见的性传播感染。女性感染可导致严重的并发症,如盆腔炎,引起输卵管瘢痕和堵塞,易发生异位妊娠或不孕。由于抗生素耐药菌株的流行率增加,淋病又成为重要的公共卫生问题。由于人类是GC的唯一宿主,因此缺乏模仿人类感染各个方面的感染模型是推进我们对GC发病机理的理解的主要障碍。我们建立了人宫颈组织外植体模型和免疫荧光显微镜分析来检测GC感染妇女GC感染的主要部位人间宫颈细胞的机制。这种体外模型保持了宫颈上皮细胞的正常细胞构筑和组织完整性。使用这种模型和免疫荧光分析,我们表明,气相色氨酸定居和渗透到子宫颈组织,在那里他们可能导致症状和播散性淋球菌感染。 ...
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Isolation and Culture of the Islets of Langerhans from Mouse Pancreas
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Author:
Date:
2016-06-20
[Abstract] The islets of Langerhans are clusters of endocrine cells located within the pancreas. Insulin-producing beta cells are the major cell type within islets, with glucagon-producing alpha cells and somatostatin-producing delta cells the other major cell types. The beta cells are the target of immune-mediated destruction in type 1 diabetes (Graham et al., 2012). Failure of beta cell function accompanied by loss of beta cell mass is also a feature of type 2 diabetes (Wali et al., 2013). Therefore studying the biology of pancreatic islets is important to understand the pathogenesis ...
[摘要] 朗格汉斯岛是位于胰腺内的内分泌细胞簇。胰岛素生成β细胞是胰岛内的主要细胞类型,产生胰高血糖素的α细胞和生长抑素生成的δ细胞是其他主要细胞类型。 β细胞是免疫介导的1型糖尿病破坏的靶标(Graham等,2012)。 β细胞功能衰竭伴有β细胞量的丧失也是2型糖尿病的特征(Wali等,2013)。因此,研究胰岛的生物学对于了解糖尿病的发病机制和开发新的疗法是重要的。这里我们描述了小鼠胰岛的分离。这需要温和的酶促和机械消化外分泌组织和密度梯度分离(Chong et al。,2004; Liu和Shapiro,1995; Thomas et al。,1998)。然后,我们将描述胰岛如何可以整体培养或分散到单个细胞中,用于各种体外和体内分析。使用该协议可靠地导致200-400个胰岛的隔离,这取决于鼠标的应变。
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