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Heraeus Multifuge X1R Centrifuge

公司名称: Thermo Fisher Scientific
产品编号: HeraeusTM MultifugeTM X1R
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Expression and Purification of the Cas10-Csm Complex from Staphylococci
Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract]  CRISPR-Cas (Clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR-associated proteins) is a class of prokaryotic immune systems that degrade foreign nucleic acids in a sequence-specific manner. These systems rely upon ribonucleoprotein complexes composed of Cas nucleases and small CRISPR RNAs (crRNAs). Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus are bacterial residents on human skin that are also leading causes of antibiotic resistant infections (Lowy, 1998; National Nosocomial Infections Surveillance, 2004; Otto, 2009). Many staphylococci possess Type ... [摘要]  CRISPR-Cas(聚集的定期间隔的短回文重复-CRISPR相关蛋白)是一类以序列特异性方式降解外来核酸的原核免疫系统。这些系统依赖于由Cas核酸酶和小型CRISPR RNA(crRNA)组成的核糖核蛋白复合物。表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌是人皮肤上的细菌居民,也是抗生素抗性感染的主要原因(Lowy,1998; National Nosocomial Infection Surveillance,2004; Otto,2009) 。许多葡萄球菌具有III型A CRISPR-Cas系统(Marraffini和Sontheimer,2008; Cao等人,2016),已被证明可预防质粒转移并防止病毒性捕食者(Goldberg这些生物体中,等等,2014; Hatoum-Aslan等人,2014; Samai等人,2015)。因此,在天然葡萄球菌背景中获得对这些系统的机械理解可以导致对影响这些病原体的进化和存活的因素的重要见解。 III-A型CRISPR-Cas系统编码称为Cas10-Csm的五亚单位效应复合物(Hatoum-Aslan等人,2013)。在这里,我们描述了一种用于表达和纯化Cas10-Csm的方法。表皮样背景或异源性S。金黄色葡萄球菌背景。该方法由两步纯化方案组成,包括Ni 2 + - ...

Extraction, Purification and Quantification of Diffusible Signal Factor Family Quorum-sensing Signal Molecules in Xanthomonas oryzae pv. oryzae
Author:
Date:
2017-03-20
[Abstract]  Bacteria use quorum-sensing (QS) systems to monitor and regulate their population density. Bacterial QS involves small molecules that act as signals for bacterial communication. Many Gram-negative bacterial pathogens use a class of widely conserved molecules, called diffusible signal factor (DSF) family QS signals. The measurement of DSF family signal molecules is essential for understanding DSF metabolic pathways, signaling networks, as well as regulatory roles. Here, we describe a method for the extraction of DSF family signal molecules from Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo ... [摘要]  细菌使用群体感知(QS)系统监测和调节其人口密度。细菌QS涉及作为细菌通信信号的小分子。许多革兰氏阴性细菌病原体使用一类广泛保守的分子,称为扩散信号因子(DSF)家族QS信号。 DSF家族信号分子的测量对于了解DSF代谢途径,信号网络以及调节作用至关重要。在这里,我们描述了从Xanthomonas oryzae pv提取DSF家族信号分子的方法。 ( Xoo )细胞沉淀和Xoo 培养上清液。我们使用超高效液相色谱系统(UPLC)与准确的质量飞行时间质谱仪(TOF-MS)联合测定DSF家族信号的水平。在UPLC / MS系统的帮助下,DSF的检测限低至1μM,大大提高了在细菌培养和反应混合物中检测DSF DSF家族信号分子的能力。

背景 黄单胞菌属 oryzae pv。米糠X ae))))))))))y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y y十二碳烯酸(DSF),顺式-2-十二碳烯酸(BDSF),顺式-10-甲基-2-十二碳烯酸(IDSF)和顺式<顺式 -11-甲基十二烷-2,5-二烯酸(CDSF),以调节毒力因子产生(图1)。 DSF家族信号的生物合成,感知和周转需要Xoo 中的rpf ...

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