| Artificial Inoculation of Epichloë festucae into Lolium perenne, and Visualisation of Endophytic and Epiphyllous Fungal Growth
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Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract] Natural hosts for the fungal endophyte Epichloë festucae include Festuca rubra (fine fescue) and Festuca trachyphylla (hard fescue). Some strains also form stable associations with Lolium perenne (perennial ryegrass). L. perenne is a suitable host to study fungal endophyte–grass interactions, such as endophytic fungal growth within the plant and epiphyllous growth on the plant surface. Here we provide a detailed protocol based on work by, for artificial inoculation of E. festucae into L. perenne, and newly developed staining and ...
[摘要] 真菌内生菌Epichloëfestucae的天然宿主包括 Festuca rubra （细羊茅）和 Festuca trachyphylla （硬羊茅）。一些菌株也与黑麦草（多年生黑麦草）形成稳定的关联。 升。 perenne 是研究真菌内生菌 - 草相互作用的合适宿主，例如植物内生真菌生长和植物表面的叶生生长。在这里，我们提供了一个基于工作的详细协议，用于 E的人工接种。 festucae 进入 L. perenne ，以及新开发的染色和可视化技术，用于观察内生和附生的菌丝和表达菌，这是一种类似真菌的结构，用于离开植物。染色方法使用葡聚糖结合苯胺蓝二铵盐（AB）和几丁质结合小麦胚凝集素缀合的Alexa Fluor ® 488-（WGA-AF488）的组合。该协议将是研究Epichloë -grass相互作用的有用工具，特别是不同Epichloë - 草关联，各种内生菌 - 宿主发育阶段的比较，以及分析突变Epichloë菌株。
【背景】Latch和Christensen（1985）开发了一种用Epichloë内生菌人工感染草的方案。这项工作一直是广泛的 E的基础。 festucae Fl1- L. perenne 共生研究（Scott et al。，2012年综述）。在我们最近的工作中，我们描述了一种新发现的真菌结构，即能够实现 E的表达式。 ...
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| The Sulfur Oxygenase Reductase Activity Assay: Catalyzing a Reaction with Elemental Sulfur as Substrate at High Temperatures
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Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] The sulfur oxygenase reductase (SOR) reaction is a dioxygen-dependent disproportionation of elemental sulfur (S0), catalyzed at optimal temperatures between 65 °C and 85 °C. Thiosulfate and sulfite are formed as oxidized products as well hydrogen sulfide as reduced product. External co-factors are not required. Usually, the SOR assay is performed in a milliliter scale in S0-containing Tris-buffer at high temperatures followed by colorimetric product quantification. In order to make the SOR assay more sensitive and better reproducible, several modifications were ...
[摘要] 硫加氧酶还原酶（SOR）反应是元素硫的二氧依赖性歧化（S 0 ），在65℃至85℃之间的最佳温度下催化。 硫代硫酸盐和亚硫酸盐作为还原产物形成氧化产物以及硫化氢。 不需要外部辅助因素。 通常，SOR测定在高温下以含有S 0含有Tris缓冲液的毫升标度进行，随后进行比色产物定量。 为了使SOR测定更灵敏和更好的再现性，与原始SOR测定相比，实施了几个修改（Kletzin，1989）。 在这里，我们提供修饰的SOR测定和以下反应产物的定量。
【背景】硫氧化酶还原酶（SOR）催化与亚硫酸盐，硫代硫酸盐和硫化氢作为可检测产物的元素硫的二氧依赖性歧化。最初发现的SOR来自超嗜热，硫氧化古菌和细菌。报道的温度最佳值在65℃和85℃之间，pH值在pH5和pH7.4之间是最佳的（Emmel等人，1986; Kletzin，1989; Sun等人， ，2003; Pelletier等人，2008）。令人惊讶的是，源自嗜温细菌的新生儿烟草属（SOUTH）等（2012）的嗜碱性细菌和碱性嗜碱性硫代弧菌悖论的SORs（Rühlet al。还有在pH8.4和pH9.0下分别具有约80℃的温度最佳值。大多数SOR可以在E中生产。大肠杆菌通过异源基因表达，并且只有该酶的第一个描述源自从其天然来源纯化的蛋白质（Emmel等人，1986; Kletzin，1989; Pelletier et al。 ...
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| Wheat Root-dip Inoculation with Fusarium graminearum and Assessment of Root Rot Disease Severity
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Author:
Date:
2017-03-20
[Abstract] Fusarium graminearum is one of the most common and potent fungal pathogens of wheat (Triticum aestivum) and other cereals, known for causing devastating yield losses and mycotoxin contaminations of food and feed. The pathogen is mainly considered as a paradigm for the floral disease Fusarium head blight, while its ability to colonize wheat plants via root infection has been examined recently. F. graminearum has a unique infection strategy which comprises complex, specialized structures and processes. Root colonisation negatively affects plant development and leads ...
[摘要] 禾本科镰刀菌是小麦（小麦）和其他谷物中最常见和最有效的真菌病原体之一，已知会引起食品和饲料的破坏性产量损失和霉菌毒素污染。病原体主要被认为是镰刀菌枯萎病花粉病的典范，而最近已经检查了通过根系感染定植小麦植物的能力。 F。 graminearum 具有独特的感染策略，包括复杂的专门结构和过程。根系定殖对植物发育负面影响，并导致组织适应真菌策略的全身植物侵袭。小麦根系 - 小麦根。 graminearum 提供了一系列研究领域，例如（i）与坏死性病原体相对未知的根系相互作用; （ii）有助于（总体）镰刀菌抗性的基因和途径; （iii）诱导全身（全植株）抗性; （iv）各种宿主组织中的致病策略;和（v）对幼苗和成年植物（根/穗）感染的单基因型应答的年龄相关变化。提出的镰刀菌根腐病生物测定可以有效地感染小麦根，评估疾病的严重性和进展以及疾病动态的统计分析。
背景 根腐病（FRR）生物测定法使用根浸法进行接种，结合不同的疾病严重性参数测量。本协议主要适用于其他根真菌相互作用的研究。所提出的根浸接种被证明是一种有效和可靠的方法来研究小麦根 - 镰刀菌相互作用（表型和组织学）和筛选小麦基因型对根系感染的响应（Wang et al。 al 。，2015）。使用描述的方案，FRR疾病的遗传，分子和代谢组学方面同时经过不同研究方法的生物学重复和一致性观察结果的可靠结果进行了检查。这一点与在黄萎病的研究中所作的观察结果相对应，其特征在于在浸种或浸种方法方面的有效性和可靠性优于根浸渍（Trapero等人＆lt; ...
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