| Protocol to Test the Effect of Sorbitol in vitro on Hybrid Larch (Larix x eurolepis Henry) Emblings
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] This protocol presents a method to test the effect of sorbitol in vitro on hybrid larch plants derived from somatic embryogenesis. We have tested four different media variants, one control variant without sorbitol and three variants of decreasing water potential corresponding to sorbitol concentrations in the culture medium of 4%, 10%, and 20%. We cultured two hybrid larch clones on these media during 35 days and assessed their vitality and weight growth after this time.
[摘要] 该方案提供了一种测试山梨醇体外对体细胞胚胎发生的杂交落叶松植物的影响的方法。 我们测试了四种不同的培养基变体，一种不含山梨糖醇的对照变体和三种降低水势的变体，对应于培养基中山梨糖醇浓度为4％，10％和20％。 我们在35天内在这些培养基上培养了两个杂交落叶松克隆，并在此之后评估它们的活力和体重增长。
【背景】林木育种可受益于允许在其发育的早期阶段对植物系进行高通量筛选的方法。这些方法有助于界定后期在田间测试的基因型的数量，这是在林木物种需要相当大的空间的情况下的问题。一种可能性是在体外测试幼苗，该过程具有促进均匀和良好控制的实验条件的额外优点。对生物和非生物胁迫因子的耐受性的方面可以例如在体外进行筛选。其中，干旱压力在改善计划中受到特别关注。模拟缺水的常用方法是在根部支持培养基中添加渗透压，从而降低水的可用性。渗透压剂可以是离子型NaCl或非离子型甘露醇，山梨糖醇或PEG（聚乙二醇）（Singh和Singh，2015）。我们已经开发出一种方案，该方案允许测试山梨糖醇在体外对来自体细胞胚胎发生的杂交落叶松嵌入的影响。
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| Isolation of Ribosomal Particles from the Unicellular Cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803
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Author:
Date:
2017-03-20
[Abstract] Isolation of ribosomal particles is an essential step in the study of ribosomal components as well as in the analysis of trans-acting factors that interact with the ribosome to regulate protein synthesis and modulate the expression profile of the cell in response to different environmental conditions. In this protocol, we describe a procedure for the isolation of 70S ribosomes from the unicellular cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 (hereafter Synechocystis). We have successfully used this protocol in our study of the cyanobacterial ribosomal-associated ...
[摘要] 核糖体颗粒的分离是研究核糖体组分以及与核糖体相互作用以调节蛋白质合成并调节细胞表达谱的反式因子的分析中必不可少的步骤响应不同的环境条件。在本协议中，我们描述了从单细胞蓝细菌集胞藻分离70S核糖体的过程。 PCC 6803（以下简称集胞藻）。我们已经成功地使用这个方案来研究蓝细菌核糖体相关蛋白LrtA，它是细菌HPF（冬眠促进因子）的同系物（Galmozzi等人，2016）。
背景 据报道蓝藻核糖体几乎没有生物化学研究。已经通过差速离心分离70S核糖体颗粒，然后通过二维电泳分析核糖体蛋白质（Sato et al。，et al。 ，1998）。核糖体也已经从聚球藻（Spechococcus）进行制备。 PCC 6301细胞使用组合差速离心和蔗糖步骤梯度的方案（Sugita等人，2000）。通过差速离心分离细胞提取物也被用于制备核糖体样品用于在不同的聚球藻菌株中开发体外翻译系统（Mutsuda和Sugiura，2006 ）。基于针对聚球藻（Sugita等人，2000）所述的方法，本文所述的针对集胞藻的方法允许使用以下方式纯化核糖体颗粒线性蔗糖梯度的超速离心。
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