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(1-Oxyl-2,2,5,5-tetramethyl-∆3-pyrroline-3-methyl) Methanethiosulfonate

公司名称: Toronto Research Chemicals
产品编号: O875000
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Nitroxide Labeling of Proteins and the Determination of Paramagnetic Relaxation Derived Distance Restraints for NMR Studies
Author:
Date:
2017-04-05
[Abstract]  Site-specific attachment of paramagnetic spin labels to biomolecules causes distance-dependent line-broadening effects, which can be exploited to study the structure and dynamics of these molecules in solution. This protocol describes how to attach nitroxide spin labels to proteins and how to collect and analyze NMR data using these labeled samples. We also explain how to derive distance restraints for paramagnetic relaxation enhancement nuclear magnetic resonance (PRE-NMR) studies. [摘要]  顺磁自旋标记与生物分子的位点特异性连接导致距离依赖性线宽增加效应,可用于研究溶液中这些分子的结构和动力学。 该协议描述了如何将氮氧自由标记连接到蛋白质上,以及如何使用这些标记的样品收集和分析NMR数据。 我们还解释了如何导出顺磁性松弛增强核磁共振(PRE-NMR)研究的距离约束。

该协议描述了如何使用顺磁性松弛增强核磁共振(PRE-NMR)方法将氮氧自由标记附着到蛋白质上以及如何使用修饰的蛋白质来导出距离约束。顺磁自旋标记对蛋白质的位点特异性附着增强了附近细胞核的横向松弛率,导致了可用于导出距离约束的线宽变化效应(Battiste和Wagner,2000; Iwahara等人。 ,2004; Clore和Iwahara,2009)。已经使用PRE衍生的距离限制来表征各种分子的结构,包括膜蛋白(Roosild等人,2005),显示域间动力学的多结构域蛋白(Sjodt 单链蛋白(Battiste和Wagner,2000),蛋白质-DNA复合物(Clore和Iwahara,2009),瞬时蛋白质 - 蛋白质相互作用(Tang等人, ,2007; ...

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