| Escherichia coli Infection of Drosophila
|
|
Author:
Date:
2017-05-05
[Abstract] Following septic insults, healthy insects, just like vertebrates, mount a complex immune response to contain and destroy pathogens. The failure to efficiently clear bacterial infections in immuno-compromised fly mutants leads to higher mortality rates which provide a powerful indicator for genes with important roles in innate immunity. The following protocol is designed to reproducibly inject a known amount of non-pathogenic E. coli into otherwise sterile flies and to measure the survival of flies after infection. The protocol can be easily adapted to different types of bacteria.
[摘要] 在败血症后，健康的昆虫就像脊椎动物一样，会发生复杂的免疫反应，以遏制和破坏病原体。在免疫损害的蝇突变体中未能有效地清除细菌感染导致更高的死亡率，这为在先天免疫中具有重要作用的基因提供了强有力的指标。以下协议被设计为可重复地注射已知量的非致病性E。大肠杆菌进入其他无菌苍蝇，并测量感染后苍蝇的存活率。该方案可以轻松适应不同类型的细菌。
背景 经典的感染实验包括口服感染果蝇（Chakrabarti等人，2016）或用浸在浓缩细菌溶液中的针（Romeo和Lemaitre，2008）。与这些方案不同，我们的实验程序允许我们确定感染部位，并精确控制注射到每只苍蝇中的细菌的剂量。这提供了均匀性和重复性，并且允许我们适应不同实验的细菌负荷（Akbar等人，2011和2016）。
|
|
|
| Electroshock Induced Seizures in Adult C. elegans
|
|
Author:
Date:
2017-05-05
[Abstract] The nematode Caenorhabditis elegans is a useful model organism for dissecting molecular mechanisms of neurological diseases. While hermaphrodite C. elegans contains only 302 neurons, the conserved homologous neurotransmitters, simpler neuronal circuitry, and fully mapped connectome make it an appealing model system for neurological research. Here we developed an assay to induce an electroconvulsive seizure in C. elegans which can be used as a behavioral method of analyzing potential anti-epileptic therapeutics and novel genes involved in seizure susceptibility. In ...
[摘要] 线虫秀丽隐杆线虫是解剖神经系统疾病分子机制的有用的模型生物。而雌雄同体线虫仅包含302个神经元，保守的同源神经递质，更简单的神经元电路和完全映射的连接体使其成为神经学研究的吸引人的模型系统。在这里，我们开发了一种诱发电刺激性癫痫发作的检测方法。线虫可用作分析潜在的抗癫痫药物和涉及癫痫发作敏感性的新基因的行为方法。在该测定中，当电流通过液体时，将蠕虫悬浮在水溶液中。在休克开始时，蠕虫会短暂瘫痪和抽搐，并在恢复正常的正弦运动后不久。运动恢复的时间被用作从癫痫发作恢复的指标，可以通过掺入改变神经元和肌肉兴奋性的药物来减少或延长。
背景 我们有兴趣使用强大的遗传模型，即秀丽隐杆线虫，开发可以容易地被药理学操作的电惊厥发作测定。无脊椎动物模型已被用于癫痫发作研究几十年（Lee和Wu，2002），但是没有专门研究电刺激性癫痫发作的方案。线虫。过去，多组已经开发出响应于化学前同质醇如GABA A受体阻断剂戊戊四唑（PTZ）和微毒素（PTX）以及乙酰胆碱酯酶抑制剂涕灭威分析麻痹的方法（Williams等人，2004; Vashlishan等人，2008）。虽然这些方法通常分析麻痹的时间，我们的方法量化了从电击诱发的癫痫发作恢复所需的时间（Risley等，2016）。
|
|
|