| Direct Visualization of the Multicopy Chromosomes in Cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942
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Author:
Date:
2018-08-05
[Abstract] Cyanobacteria are prokaryotic organisms that carry out oxygenic photosynthesis. The fresh water cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942 is a model organism for the study of photosynthesis and gene regulation, and for biotechnological applications. Besides several freshwater cyanobacteria, S. elongatus 7942 also contains multiple chromosomal copies per cell at all stages of its cell cycle. Here, we describe a method for the direct visualization of multicopy chromosomes in S. elongatus 7942 by fluorescence in situ hybridization (FISH).
[摘要] 蓝细菌是进行含氧光合作用的原核生物。 淡水蓝藻 Synechococcus elongatus PCC 7942是用于研究光合作用和基因调控以及生物技术应用的模式生物。 除了几种淡水蓝藻， S. 细胞 7942在其细胞周期的所有阶段每个细胞还含有多个染色体拷贝。 在这里，我们描述了一种直接可视化 S中多拷贝染色体的方法。 通过荧光原位杂交（FISH）测定细菌 7942。
【背景】蓝藻是原核微生物，其利用与高等植物中的叶绿体类似的产氧光合系统。虽然 Escherichia coli 和枯草芽孢杆菌等细菌具有单个圆形染色体，但是几种淡水蓝细菌每个细胞有多个圆形染色体（Mann和Carr，1974; Labarre 等人，1989; Binder和Chisholm，1995）。淡水蓝藻 Synechococcus elongatus PCC 7942（以下简称 S.longatus 7942）每个细胞携带3-8个染色体拷贝（Griese et al。，2011; Watanabe et al。，2012; Watanabe et al。，2015）。已经建立了荧光报告子 - 操纵子系统来获取 S的多拷贝染色体的图像。 elongatus 7942（Chen et al。，2012; Jain et ...
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| CRISPR-PCS Protocol for Chromosome Splitting and Splitting Event Detection in Saccharomyces cerevisiae
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Author:
Date:
2017-05-20
[Abstract] Chromosome engineering is an important technology with applications in basic biology and biotechnology. Chromosome splitting technology called PCS (PCR-mediated Chromosome Splitting) has already been developed as a fundamental chromosome engineering technology in the budding yeast. However, the splitting efficiency of PCS technology is not high enough to achieve multiple splitting at a time. This protocol describes a procedure for achieving simultaneous and multiple chromosome splits in the budding yeast Saccharomyces cerevisiae by a new technology called CRISPR-PCS. At least four ...
[摘要] 染色体工程是应用于基础生物学和生物技术的重要技术。染色体分裂技术称为PCS（PCR介导的染色体分裂）已经被开发为发芽酵母中的基本染色体工程技术。然而，PCS技术的分割效率不够高，不能一次实现多次分割。该协议描述了通过称为CRISPR-PCS的新技术在芽状酵母酿酒酵母中实现同时和多个染色体分裂的过程。基因组中至少四个独立的位点可以通过一次转化来分裂。与常规PCS技术相比，获得多重分裂酵母菌株的总时间和劳动力大大降低。
背景 能够快速有效地操纵多个遗传基因座或染色体区域的染色体工程技术变得越来越重要。这些技术为阐明染色体和基因组功能提供了有力的手段。此外，它可以用于通过创建广泛的遗传变体来繁殖有用的菌株。在芽殖酵母酿酒酵母（Saccharomyces ...
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