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Author:
Date:
2020-12-05
[Abstract] During immune responses, B cells home to lymph nodes (LN), where they encounter antigens. Homing starts with capture and L-selectin-dependent rolling on the activated endothelium of high endothelial venules (HEV). After recognition of chemokines presented on HEV, activation of B cell integrins occurs mediating firm arrest. Subsequently, B cells crawl to the spot of extravasation to enter the LN. Extravasation can be visualized and quantified in vivo by intravital microscopy (IVM) of the inguinal LN. Here, we describe an established protocol that permits detailed in vivo analysis of B cell ...
[摘要] [摘要]在免疫反应期间，B细胞归巢于淋巴结（LN ），在那里它们遇到抗原。归巢始于在高内皮小静脉（HEV）的活化内皮细胞上进行捕获和L-选择蛋白依赖性滚动。在识别出存在于HEV上的趋化因子后，B细胞整合素的激活发生了介导的牢固停滞。随后，B细胞爬到外渗点进入LN。外渗可通过腹股沟淋巴结的活体显微镜检查（IVM）进行体内可视化和定量。在这里，我们描述了一个已建立的协议，该协议允许在无菌炎症条件下对LN的B细胞募集的详细体内分析。我们描述了数据采集，出口，定量，并使用专门的软件进行统计分析。LN的IVM是一种强大的技术，可以更好地了解体内炎症过程中B细胞的迁移行为。
[背景]次级LN在战术上定位为通过淋巴系统排出抗原，因此在人体不同部位的免疫反应中起着基本作用。这意味着原位免疫细胞的募集，抗原的遭遇以及免疫反应的增强（Tan and Watanabe，2010; Tavares et ...
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Author:
Date:
2017-06-20
[Abstract] The main purpose of this sophisticated and highly versatile method is to visualize and quantify structural vessel wall properties, cellular recruitment, and lipid/dextran extravasation under physiological conditions in living arteries. This will be of interest for a broad range of researchers within the field of inflammation, hypertension, atherosclerosis, and even the pharmaceutical industry. Currently, many researchers are using in vitro techniques to evaluate cellular recruitment, like transwell or flow chamber systems with cultured cells, with unclear physiological comparability. ...
[摘要] 这种复杂和多功能方法的主要目的是在活体动物的生理条件下可视化和量化结构血管壁性质，细胞募集和脂质/葡聚糖外渗。这对于广泛的炎症，高血压，动脉粥样硬化甚至制药行业的研究人员都是有兴趣的。目前，许多研究人员正在使用体外技术来评估细胞募集，如具有培养细胞的transwell或流动室系统，具有不清楚的生理学可比性。这里介绍的方法详细描述了使用复杂而灵活的方法来研究在动脉血流条件下体外新鲜和活的鼠颈动脉中的动脉壁特性和白细胞募集。该模型模拟体内情况，并允许使用从两个不同供体分离的细胞和动脉（例如，野生型与特异性敲除）组合成一个实验，从而提供关于白细胞和/或内皮细胞特性的信息两个捐助者。因此，该模型可以被认为是复杂和侵入性体内研究的替代方案，例如对比实验。
【背景】该方法的核心是应用双光子激光扫描显微镜（TPLSM）来显示安装在动脉造影腔室中的体外颈动脉，其已显示模拟体内情况下存在的生理条件（Megens et al。，2007）。新鲜的动脉，在我们这种情况下是小鼠颈动脉，但该方法也适用于其他类似大小的血管（包括人类血管）（Bloksgaard等，2015），仔细提取并安装在使用细线的两个玻璃微量移液管的动脉造影室。该腔室应提供足够的空间以用显微镜物镜（优选为具有> ...
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