| A Rodent Model for Chronic Brain Hypoperfusion Related Diseases: Permanent Bilateral Occlusion of the Common Carotid Arteries (2VO) in Rats
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Author:
Date:
2018-01-05
[Abstract] Permanent occlusion of bilateral common carotid arteries (2VO) in rat is considered as a suitable animal model to mimic chronic brain hypoperfusion status, which is proved to be a risk factor to precede the Alzheimer’s disease or/and vascular dementia. In this protocol, we describe how to successfully ligate the bilateral common carotid arteries covered by anterior cervical muscle group, and provide the details for understanding the surgical procedures of 2VO.
[摘要] 大鼠双侧颈总动脉（2VO）的永久闭塞被认为是模拟慢性脑灌注不足状态的合适动物模型，其被证明是阿尔茨海默病或/和血管性痴呆之前的危险因素。 在此协议中，我们描述了如何成功结扎颈前肌群覆盖的双侧颈总动脉，并提供了解2VO手术的详细信息。
【背景】目前，慢性脑灌注不足（CBH）被认为是轻度认知障碍的临床前状态，认为其在痴呆之前（Ruitenberg等人，2005; Gorelick等人 >，2011）。然而，CBH如何产生痴呆在很大程度上是未知的。
20世纪70年代首次建立了双侧颈总动脉（2VO）永久闭塞的方法（Eklof和Siesjo，1972）。由于大鼠中的2VO引起无运动功能障碍的CBH，因此被认为是引起CBH状态的合适的动物模型（Tanaka等人，1996）。在2VO程序之后，三个阶段在理论上由脑血流量（CBF）和大鼠代谢变化决定（Farkas等人，2007）。在开始2VO过程之后，急性局部缺血的第一阶段持续约2-3天（Ohta等人，1997; Otori等人，2003; Tomimoto等人，等人，2003）。在此期间，CBF急剧下降，并在接下来的4周内保持在显着低水平，葡萄糖利用率降低（Otori等人，2003），ATP和磷酸肌酸的突然消耗（Plaschke，2005 ...
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| RNA Extraction from Wistar Rat Cochlea for qRT-PCR
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Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract] Otology research has developed considerably in recent years and molecular analysis is crucial to identify metabolic pathways and therapeutic targets. However, the structure of the cochlea limits the amount of cell mass, and special care is required for RNA extraction. Studies applying this technique to the cochlea are scarce in the literature, and difficulties in this area exist. In the context, we describe a method for extracting RNA in Wistar rats for qRT-PCR analyses in order to clarify certain aspects and obtain good quality material.
[摘要] 近年来，耳科学研究发展迅速，分子分析对鉴定代谢途径和治疗靶点至关重要。 然而，耳蜗的结构限制了细胞的数量，特别注意RNA提取。 在耳蜗中使用这种技术的研究在文献中很少，而且在这方面存在困难。 在此背景下，我们描述了提取Wistar大鼠的RNA进行qRT-PCR分析的方法，以澄清某些方面并获得优质的材料。
【背景】了解涉及毛细胞损伤的分子机制对于保持听力非常重要。 来自mRNA的qRT-PCR用于代谢途径和可能的治疗靶标的研究。 耳科学研究通常使用小型啮齿动物，尽管用保存良好的RNA分离感觉细胞样品用于转录分析是一个重大挑战。 用这些动物进行的研究已经提出了在新生儿耳蜗中提取RNA的有效方法，然而，由于少量mRNA的回收，成年耳蜗呈现局限性。 为了评估获得的RNA的质量，可以进行紫外吸收和琼脂糖凝胶电泳。 在此，我们描述了从成年Wistar大鼠获得mRNA的方法，其随后可用于qRT-PCR测定。
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| Stereotaxic Surgery for Suprachiasmatic Nucleus Lesions in Mice
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Author:
Date:
2017-06-20
[Abstract] Site-specific lesions are invaluable methods for investigating the function of brain regions within the central nervous system and can be used to study neural mechanisms of behaviors. Precise stereotaxic surgery is required to lesion small regions of the brain such as the suprachiasmatic nucleus (SCN), which harbors the master circadian clock. In this protocol, we describe stereotaxic surgery optimized for bilateral lesion of the mouse SCN by loading electric current. Success of the SCN lesion is verified histologically and behaviorally by monitoring arrhythmic locomotor activity. The ...
[摘要] 位点特异性病变是调查中枢神经系统中脑区功能的有价值的方法，可用于研究神经行为机制。 需要精确的立体定位手术来对大脑的小区域进行损伤，例如含有主昼夜节律钟的视交叉上核（SCN）。 在本协议中，我们介绍了通过加载电流优化小鼠SCN双侧病变的立体定位手术。 通过监测心律失常运动活动，组织学和行为学验证了SCN病变的成功。 SCN损伤的小鼠允许评估主昼夜节律钟的消融的行为，生化和生理后果。
【背景】视交叉上核（SCN）是哺乳动物脑下丘脑内的一个小区域。它位于视交叉的两侧，包含约20,000个神经元。 SCN被称为主昼夜节律振荡器（时钟）的位置，并且与亮 - 暗循环同步所需。 SCN的消融是评估主昼夜节律钟的生理影响的有用策略。
与通过病毒注射或SCN特异性启动子的基因修饰相比，SCN的电解损伤具有能够快速和局部消除主昼夜节律钟的优点。通过Nissl染色手术后可以通过电脉冲定位病变，手术后一天可以开始监测活动节律。此外，通过施用化学物质的病变通常导致非特异性损伤，因此其不像电脉冲的损伤那样精确，特别是对于诸如SCN的小靶标。因此，该协议提供了一个有用的策略来评估主昼夜节律钟的效果（输出）。
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