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Date:
2017-06-20
[Abstract] Soft agar colony formation assay is established to estimate the anchorage-independent growth ability of cells. In this assay, a bottom layer of agar with complete media is poured and solidified first, followed by an upper layer containing a specified number of cells suspended in medium-agar mixture. After two weeks of incubation, the number of colonies will be counted, serving as an indicator of malignancy of tumor cells.
[摘要] 建立软琼脂集落形成测定法来估计细胞的锚定依赖性生长能力。 在该测定中，首先将具有完全培养基的琼脂的底层倾倒并固化，然后将含有特定数量的悬浮于中等琼脂混合物中的细胞的上层。 孵化两周后，将计数菌落数，作为肿瘤细胞恶性肿瘤的指标。
【背景】无固定生长是细胞在固体表面独立生长的能力，被认为是致癌作用的标志（de Larco和Todaro，1978）。软琼脂集落形成测定是评估细胞粘附非依赖性生长以检测恶性细胞的致瘤性潜力的良好方法（Roberts等人，1985），其由Puck等人描述的板集落形成测定。在1956年，细胞接种到培养板上以测定细胞形成菌落的能力（Puck等，1956）。板集落形成测定的局限性在于它仅显示针对锚定依赖性生长的细胞能力，正常细胞可以从其脱离（一种在锚定依赖性细胞脱离周围的细胞外基质时发生的程序性细胞死亡形式）并生存（Taddei等，2012）。相比之下，恶性细胞能够不附着于底物而增殖和生长。因此，开发了软琼脂集落形成测定法来表征体外这种能力（Hamburger and Salmon，1977; Yuan et al。，2017）。软琼脂集落形成实验广泛适用于细胞分化，转化和肿瘤发生的研究以及抗肿瘤治疗的疗效评价。
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