STANDARD PROBE

公司名称: Sonics & Materials

产品编号: 630-0435

Large-scale Purification of Type III Toxin-antitoxin Ribonucleoprotein Complex and its Components from Escherichia coli for Biophysical Studies

Parthasarathy Manikandan, Kavyashree Nadig and Mahavir Singh

Published online: 2023-07-05

Bio-protocol()

Company-protocol()

Other protocol()

Producing GST-Cbx7 Fusion Proteins from Escherichia coli

Author:

Thao Ngoc Huynh and Xiaojun Ren,

Date:

2017-06-20

[Abstract] This protocol describes the production of GST-Cbx7 fusion proteins from E. coli, originally developed in the recent publication (Zhen et al., 2016). The pGEX-6P-1-GST plasmids encoding the Cbx7 variants were transformed into BL21 competent cells. The fusion protein production was induced by isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside and they were purified by Glutathione Sepharose 4B. This protocol can be adapted for the purification of other proteins. [摘要] 该方案描述了最近在最近的出版物（Zhen等，2016）中开发的大肠杆菌GST-Cbx7融合蛋白的生产。将编码Cbx7变体的pGEX-6P-1-GST质粒转化到BL21感受态细胞中。通过异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导融合蛋白的产生，并用谷胱甘肽琼脂糖4B纯化。该方案可以适用于其他蛋白质的纯化。
【背景】Polycomb组（PcG）蛋白通过调节高阶染色质结构调节基因表达（Kerppola，2009; Simon和Kingston，2013）。 PcG蛋白通常存在于两种主要复合物Polycomb镇压复合物（PRC）1和2（Kerppola，2009; Simon和Kingston，2013）中。 PRC2是甲基转移酶，其催化组蛋白H3（H3K27me2 / 3）上赖氨酸27的二甲基和三甲基化（Cao等，2002）; PRC1是在赖氨酸119（H2AK119Ub）上单核苷酸组氨酸H2A的泛素连接酶（Wang等，2004）。哺乳动物PRC1复合物进一步分为典型和变体PRC1（Gao等，2012，Tavares等，2012）。规范PRC1由每个Ring1（Ring1A / Ring1B），Pcgf（Mel18 / Bmi1），Phc（Phc1 / 2/3）和Cbx（Cbx2 / 4/6/7/8）蛋白之一组成。 ...

产品评论

STANDARD PROBE

免责声明