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Mouse IgM-FITC

公司名称: Miltenyi Biotec
产品编号: 130-093-178
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In vitro Demonstration and Quantification of Neutrophil Extracellular Trap Formation
Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract]  In the recent decade, neutrophil extracellular traps (NETs) have been identified and confirmed as a new anti-microbial weapon of neutrophils. In this protocol, we describe easy methods to demonstrate NET formation by immunofluorescence staining of extracellular chromatin fiber with anti-DNA/Histone H1 antibody and quantification of NETs by using a non-cell-permeable DNA specific dye Sytox orange. [摘要]  近十年来,嗜中性粒细胞胞外捕获物(NETs)已被鉴定并确认为一种新的抗微生物中性粒细胞武器。 在该方案中,我们描述了通过使用抗DNA /组蛋白H1抗体的细胞外染色质纤维的免疫荧光染色和通过使用非细胞可渗透的DNA特异性染料Sytox orange来定量NETs的简便方法来证明NET形成。
【背景】嗜中性粒细胞构成循环白细胞中最大的进化保守部分。他们通过各种机制建立了针对病原体的第一道防线,包括形成嗜中性粒细胞胞外捕获物(NETs)。在此过程中,活化的嗜中性粒细胞从细胞核中排出染色质纤维。入侵的病原体然后被捕获在染色质网络内并被高度浓缩的NET缠结的抗微生物蛋白如髓过氧化物酶(MPO)和弹性蛋白酶(Brinkmann等人,2004)杀死。然而,NETs是一把双刃剑;来自过度活化的嗜中性粒细胞的无限制的NET形成也可能导致严重的组织损伤,例如通过NET的组蛋白组分的细胞毒性作用(Saffarzadeh等人,2012)。中性粒细胞过度活化并具有增强的形成NETs的能力的病理状况的一个例子是系统性红斑狼疮。狼疮患者血清中针对双链DNA及其它组分的抗体水平升高(Knight and Kaplan,2012; Yu and ...

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