| Glycogen and Extracellular Glucose Estimation from Cyanobacteria Synechocystis sp. PCC 6803
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Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract] Cyanobacteria, which have the extraordinary ability to grow using sunlight and carbon dioxide, are emerging as a green host to produce value-added products. Exploitation of this highly promising host to make products may depend on the ability to modulate the glucose metabolic pathway; it is the key metabolic pathway that generates intermediates that feed many industrially important pathways. Thus, before cyanobacteria can be considered as a leading source to produce value-added products, we must understand the interaction between glucose metabolism and other important cellular activities such ...
[摘要] 具有使用阳光和二氧化碳生长的非凡能力的蓝细菌正在成为生产高附加值产品的绿色主机。 利用这种非常有希望的宿主来制造产品可能取决于调节葡萄糖代谢途径的能力; 它是产生中间产物的关键代谢途径，这些中间产物为许多工业上重要的途径提供了饲料。 因此，在蓝藻被认为是生产增值产品的主要来源之前，我们必须了解葡萄糖代谢与其他重要细胞活动如光合作用和叶绿素代谢之间的相互作用。 在这里我们描述了测量蓝细菌细胞外葡萄糖和糖原水平的可重复和可靠的方法。
【背景】蓝藻在自然栖息地有一个明暗周期。有鉴于此，他们的新陈代谢主要集中在光合作用，卡尔文循环，糖酵解和TCA循环中，同时进行N-同化;碳以糖原形式储存。在黑暗中，糖原通过糖酵解和氧化磷酸戊糖（OPP）途径，TCA循环的氧化和还原分支以及C4循环代谢（Nagarajan et al。，2014）。因此，从黑暗转变为光照或光照转变为黑暗推动了代谢重新编程。
在实验室中，向培养基中添加葡萄糖也会影响蓝藻的代谢程序。例如，营养和环境条件影响蓝藻集胞藻如何代谢葡萄糖;在光合自养，异养和混合营养条件下，集胞藻代谢葡萄糖的方式不同。先前的研究报道，一些菌株的集胞藻是轻度依赖的并且耐受葡萄糖（Anderson和McIntosh，1991）。光激活异养生长（LAHG）条件的特征在于存在葡萄糖并且在黑暗中用白光或蓝光脉冲生长至少5-15分钟/天。然而，一些集胞蓝细菌葡萄糖不耐受，这意味着它们在黑暗中不能生长在葡萄糖存在下。总之，已经报道在集胞藻的培养基中加入葡萄糖会带来生理和代谢变化，如色素沉着（Ryu等人，2004），碳代谢（Lee等人，2007; ...
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| Assaying Glycogen and Trehalose in Yeast
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Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract] Organisms store carbohydrates in several forms. In yeast, carbohydrates are stored in glycogen (a multi-branched polysaccharide) and in trehalose (a disaccharide). As in other organisms, the amount of stored carbohydrate varies dramatically with physiological state, and accordingly, an assay of stored carbohydrate can help reveal physiological state. Here, we describe relatively easy and streamlined assays for glycogen and trehalose in yeast that can be applied either to a few samples, or in a moderately high-throughput fashion (dozens to hundreds of samples).
[摘要] 生物体以多种形式储存碳水化合物。 在酵母中，碳水化合物储存在糖原（多支链多糖）和海藻糖（二糖）中。 如在其他生物体中，存储的碳水化合物的量与生理状态显着变化，因此，存储的碳水化合物的测定可以帮助揭示生理状态。 在这里，我们描述了酵母中糖原和海藻糖的相对容易和流线型的测定法，其可以应用于少量样品，或以适度高通量的方式（几十至几百个样品）。
【背景】糖原和海藻糖是酵母和许多其他生物的两种储存碳水化合物。在酵母中，当培养基开始耗尽并且细胞生长速率降低时，这两种储存碳水化合物都会积累。测定酵母中存储碳水化合物的方法可追溯到至少1956年（Trevelyan和Harrison，1956a和1956b），并且自（例如，Becker，1978; Quain，1981; Schulze ，1995; Parrou和Francois，1997; Plata等人，2013）等）。测定这两种储存碳水化合物有三个基本步骤：首先，裂解或渗透细胞;第二，从糖原或海藻糖释放葡萄糖;第三，测定所得葡萄糖。
细胞可以机械裂解（Schulze等人，1995），但这不可避免地有点乏味和耗时，并且往往需要更多的细胞。细胞可以被碱渗透，但是糖原形成大的多支化颗粒，并且难以提取，因此一些方案既使用碱和酸提取（Trevelyan和Harrison，1956a和1956b; ...
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