| Direct Visualization of the Multicopy Chromosomes in Cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942
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Author:
Date:
2018-08-05
[Abstract] Cyanobacteria are prokaryotic organisms that carry out oxygenic photosynthesis. The fresh water cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942 is a model organism for the study of photosynthesis and gene regulation, and for biotechnological applications. Besides several freshwater cyanobacteria, S. elongatus 7942 also contains multiple chromosomal copies per cell at all stages of its cell cycle. Here, we describe a method for the direct visualization of multicopy chromosomes in S. elongatus 7942 by fluorescence in situ hybridization (FISH).
[摘要] 蓝细菌是进行含氧光合作用的原核生物。 淡水蓝藻 Synechococcus elongatus PCC 7942是用于研究光合作用和基因调控以及生物技术应用的模式生物。 除了几种淡水蓝藻， S. 细胞 7942在其细胞周期的所有阶段每个细胞还含有多个染色体拷贝。 在这里，我们描述了一种直接可视化 S中多拷贝染色体的方法。 通过荧光原位杂交（FISH）测定细菌 7942。
【背景】蓝藻是原核微生物，其利用与高等植物中的叶绿体类似的产氧光合系统。虽然 Escherichia coli 和枯草芽孢杆菌等细菌具有单个圆形染色体，但是几种淡水蓝细菌每个细胞有多个圆形染色体（Mann和Carr，1974; Labarre 等人，1989; Binder和Chisholm，1995）。淡水蓝藻 Synechococcus elongatus PCC 7942（以下简称 S.longatus 7942）每个细胞携带3-8个染色体拷贝（Griese et al。，2011; Watanabe et al。，2012; Watanabe et al。，2015）。已经建立了荧光报告子 - 操纵子系统来获取 S的多拷贝染色体的图像。 elongatus 7942（Chen et al。，2012; Jain et ...
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| Photothrombotic Induction of Capillary Ischemia in the Mouse Cortex during in vivo Two-Photon Imaging
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Author:
Date:
2017-07-05
[Abstract] Photothrombosis of blood vessels refers to the activation of a circulating photosensitive dye with a green light to induce clotting in vivo (Watson et al., 1985). Previous studies have described how a focused green laser could be used to noninvasively occlude pial arterioles and venules at the brain surface (Schaffer et al., 2006; Nishimura et al., 2007; Shih et al., 2013). Here we show that small regions of the capillary bed can similarly be occluded to study the ischemic response within the capillary system of the mouse cerebral cortex. The ...
[摘要] 血管的血栓形成是指用绿光激活循环的光敏染料，以在体内诱发凝血（Watson等人，1985）。以前的研究已经描述了如何将聚焦的绿色激光器用于非侵入性地封闭脑表面的小动脉和小静脉（Schaffer等人，2006; Nishimura等人， 2007; Shih等人，2013）。这里我们显示毛细血管床的小区域可以类似地闭塞，以研究小鼠大脑皮质毛细管系统内的缺血反应。这种方法的优点是缺血区被限制在约150-250μm的直径。这允许退化过程的更高质量的双光子成像，否则由于过度的光子散射，否则难以用大规模中风的模型来可视化。毛细血管闭塞的结果是血脑屏障（BBB）的泄漏。在这里，通过使用双光子成像数据集，我们展示了如何通过确定静脉内染料外渗的空间范围和定位来量化毛细血管渗漏。
【背景】存在许多动物模型通过闭塞主要大脑动脉大规模诱发缺血（Carmichael，2005）。然而，在体内双光子成像中不能获得中风的一些方面。在经历更严重缺血的区域，由于离子不平衡而导致细胞膨胀，这种水肿过程有助于增加光散射，大大降低了体内双光子成像的质量和深度。较小的局部缺血区域将减少光子散射，并且仍然允许与局部缺血相关的神经血管变化随着时间的推移在体内更清晰地显现。
我们最近表明，空间受限区域的缺血可以通过聚焦的血栓形成的皮质毛细血管床照射产生（Underly等人，2017）。毛细血管闭塞是高度可重复的，可以针对特定的位置，并通过颅骨成像窗口在精确的时间开始。所得到的缺血区域占据通过典型颅窗可接近的面积的1％（图1D和1E），允许在一个窗口中检查多个笔触。 ...
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