| In vitro Brainstem-spinal Cord Preparation from Newborn Rat
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Author:
Date:
2016-11-20
[Abstract] The brainstem-spinal cord preparation of newborn rat contains neural networks able to produce motor output in absence of sensory feedback. These neural structures, commonly called central pattern generators (CPGs), are involved in many vital functions such as respiration (Morin and Viala, 2002; Giraudin et al., 2008) or locomotion (Juvin et al., 2005). Here we describe a procedure for the isolation of the brainstem-spinal cord tissue of neonatal rat (0-2 days old). A surgical method under binocular microscope allows the brainstem and the spinal cord to be isolated in vitro ...
[摘要] 新生大鼠的脑干 - 脊髓制备包含能够在没有感觉反馈的情况下产生运动输出的神经网络。 这些神经结构，通常称为中枢模式发生器（CPG），涉及许多重要功能，如呼吸（Morin和Viala，2002; Giraudin等，2008）或运动（Juvin等，2005）。 在这里，我们描述了分离新生大鼠脑干脊髓组织（0-2天）的程序。 双目显微镜下的手术方法允许脑干和脊髓在体外被分离，并且马达输出被记录。 然后，该制剂可用于多种实验方法，例如电生理学，药理学或解剖学研究，并且构成研究CPG之间相互作用的有用模型（Juvin等人，2007; 2012; Giraudin等，2012; Le Gal 等人，2014; 2016）。
【背景】历史上，开发了新生儿啮齿动物的体外脊髓来研究脊柱反射（Otsuka和Konishi，1974）。 1984年，Suzue率先开发出新生大鼠的体外脑脊髓脊髓制剂。因此，有可能证明孤立的中枢神经系统能够自发产生所谓的虚构的呼吸活动。之后，可以确定运动员节奏生成所依赖的CPG的位置（Cazalets等，1995; Kjaerulff和Kiehn，1996; Ballion等，2001）和那些从事呼吸节律生成（Smith et al ，1991; ...
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| A Modified Chromogenic Assay for Determination of the Ratio of Free Intracellular NAD+/NADH in Streptococcus mutans
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Author:
Date:
2016-08-20
[Abstract] Nicotinamide adenine dinucleotide is a coenzyme present in all kingdoms of life and exists in two forms: oxidized (NAD+) and reduced (NADH). NAD(H) is involved in a multitude of essential metabolic redox reactions, providing oxidizing or reducing equivalents. The ratio of free intracellular NAD+/NADH is fundamentally important in the maintenance of cellular redox homeostasis (Ying, 2008). Various chromogenic cycling assays have been used to determine the ratio of NAD+/NADH in both bacterial and mammalian cells for more than forty years (Bernofsky and Swan, ...
[摘要] 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸是存在于生命的所有王国中的辅酶，并且以两种形式存在：氧化（NAD +）和还原（NADH）。 NAD（H）参与多种必需的代谢氧化还原反应，提供氧化或还原等价物。游离细胞内NAD + /NADH的比率在维持细胞氧化还原稳态中是根本重要的（Ying，2008）。已经使用各种显色循环测定来测定细菌和哺乳动物细胞中NAD +/NAD +/NADH的比率超过四十年（Bernofsky和Swan，1973; Nisselbaum和Green，1969）。 /> 在这里，我们详细描述了测定变异链球菌中游离细胞内NAD + 与NADH的比率的测定法。该循环测定是Bernofsky和Swan（Bernofsky和Swan，1973）首先描述的方案的修改版本，使用Frezza等人描述的提取缓冲液。 （2011），随后是由Gibbon和Larher描述的减少的MTT降水（Gibon和Larher，1997）。如图1所示，使用乙醇脱氢酶来驱动一系列氧化还原反应，利用来自样品提取物的外源添加的乙醇和NAD +作为初始底物，吩嗪乙硫酸盐（PES）作为电子载体，以及噻唑基蓝色四唑溴化物（MTT）作为末端电子受体。使用6M ...
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