| Assays for Oxidative Responses of Fusarium graminearum Strains to Superoxide Radicals
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Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract] The ascomycete fungus Fusarium graminearum is a major causal agent of Fusarium head blight (FHB), a devastating disease affecting small grains cereals worldwide. To better understand the pathogenesis of this fungus, we provide here an easy-to-use protocol to examine the sensitivity of the wild-type and mutant strains of F. graminearum to oxidative stress from superoxide anions (O2•-) generated by menadione. Similarly, this assay can also be used to detect other stress responses of different fungal strains to various stress agents. The change in stress ...
[摘要] 子囊菌真菌 Fusarium graminearum 是 Fusarium 头枯病（FHB）的主要致病因子，FHB是一种影响全世界小粒谷物的破坏性疾病。 为了更好地了解这种真菌的发病机理，我们在此提供了一种易于使用的方案来检测 F的野生型和突变株的敏感性。 禾谷镰刀菌对由甲萘醌产生的超氧阴离子（O2 • - ）的氧化应激。 类似地，该测定也可用于检测不同真菌菌株对各种应激物的其他应激反应。 突变体的应激反应的变化可以为突变基因的生物学功能提供线索。
【背景】子囊菌真菌 Fusarium graminearum （以前也被称为 Gibberella zeae 的性状）不仅是 Fusarium 头枯病和幼苗的主要致病因子小麦和大麦枯萎病，也是玉米赤霉病茎腐病的重要致病因子之一（Dal Bello et al。，2002; Bai and Shaner，2004; Kazan et al。，2012）。除了导致谷物大量减产外，这种真菌还会产生影响人类和动物健康的真菌毒素。因此，这种真菌受到广泛关注，在所有研究的植物病原真菌中排名第四（Dean et al。，2012）。
F。禾本科植物对死有机物进行过冬，特别是对受感染的小粒和玉米作物残留物进行过度研究。为了在如此广泛的环境中生存， F. graminearum ...
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| Enzymatic Activity Assay for Invertase in Synechocystis Cells
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Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract] Invertase can catalyze the hydrolysis of sucrose, and is widely distributed in cells of cyanobacteria and plants. Being responsible for the first step for sucrose metabolism, invertase plays important physiological roles and its enzymatic activity is frequently needed to be determined. All the methods for determination of the invertase activity are dependent on detection of the glucose product generated by the invertase. Here we describe an ion chromatography based protocol of our laboratory for determination of cyanobacterial intracellular invertase activity.
[摘要] 转化酶可催化蔗糖的水解，广泛分布于蓝细菌和植物细胞中。 负责蔗糖代谢的第一步，转化酶起着重要的生理作用，其酶活性经常需要确定。 所有测定转化酶活性的方法都依赖于转化酶产生的葡萄糖产物的检测。 在这里我们描述了我们的实验室用于测定蓝细菌细胞内转化酶活性的基于离子色谱的方案。
【背景】转化酶和蔗糖在蓝细菌中发挥重要的生理作用（Curatti，et al。，2008; Kolman等人，2015）和高等植物（Vargas等人， ，2003; Vargas et。，2010）。转化酶（EC 3.2.1.26）可以催化蔗糖降解成葡萄糖和果糖。由于转化酶的这种特性，任何可用于测定葡萄糖或果糖的方法理论上都将用于转化酶酶活性测定。实际上，大多数转化酶酶活性测定基于检测产生的葡萄糖产物。
一些公司已经开发了用于转化酶活性测定的几种试剂盒，例如来自abcam（USA）的ab197005，来自Novus Biologicals（USA）的KA1629，来自Sigma-Aldrich（USA）的MAK118。通过使用这些试剂盒，由转化酶反应产生的葡萄糖产物将被氧化并通过比色（570nm）或荧光法（λem/ ex = 585 / ...
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| Glycogen and Extracellular Glucose Estimation from Cyanobacteria Synechocystis sp. PCC 6803
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Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract] Cyanobacteria, which have the extraordinary ability to grow using sunlight and carbon dioxide, are emerging as a green host to produce value-added products. Exploitation of this highly promising host to make products may depend on the ability to modulate the glucose metabolic pathway; it is the key metabolic pathway that generates intermediates that feed many industrially important pathways. Thus, before cyanobacteria can be considered as a leading source to produce value-added products, we must understand the interaction between glucose metabolism and other important cellular activities such ...
[摘要] 具有使用阳光和二氧化碳生长的非凡能力的蓝细菌正在成为生产高附加值产品的绿色主机。 利用这种非常有希望的宿主来制造产品可能取决于调节葡萄糖代谢途径的能力; 它是产生中间产物的关键代谢途径，这些中间产物为许多工业上重要的途径提供了饲料。 因此，在蓝藻被认为是生产增值产品的主要来源之前，我们必须了解葡萄糖代谢与其他重要细胞活动如光合作用和叶绿素代谢之间的相互作用。 在这里我们描述了测量蓝细菌细胞外葡萄糖和糖原水平的可重复和可靠的方法。
【背景】蓝藻在自然栖息地有一个明暗周期。有鉴于此，他们的新陈代谢主要集中在光合作用，卡尔文循环，糖酵解和TCA循环中，同时进行N-同化;碳以糖原形式储存。在黑暗中，糖原通过糖酵解和氧化磷酸戊糖（OPP）途径，TCA循环的氧化和还原分支以及C4循环代谢（Nagarajan et al。，2014）。因此，从黑暗转变为光照或光照转变为黑暗推动了代谢重新编程。
在实验室中，向培养基中添加葡萄糖也会影响蓝藻的代谢程序。例如，营养和环境条件影响蓝藻集胞藻如何代谢葡萄糖;在光合自养，异养和混合营养条件下，集胞藻代谢葡萄糖的方式不同。先前的研究报道，一些菌株的集胞藻是轻度依赖的并且耐受葡萄糖（Anderson和McIntosh，1991）。光激活异养生长（LAHG）条件的特征在于存在葡萄糖并且在黑暗中用白光或蓝光脉冲生长至少5-15分钟/天。然而，一些集胞蓝细菌葡萄糖不耐受，这意味着它们在黑暗中不能生长在葡萄糖存在下。总之，已经报道在集胞藻的培养基中加入葡萄糖会带来生理和代谢变化，如色素沉着（Ryu等人，2004），碳代谢（Lee等人，2007; ...
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