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Endo Hf

公司名称: New England Biolabs
产品编号: P0703
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[2-3H]Mannose-labeling and Analysis of N-linked Oligosaccharides
Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract]  Modifications of N-linked oligosaccharides of glycoproteins soon after their biosynthesis correlate to glycoprotein folding status. These alterations can be detected in a sensitive way by pulse-chase analysis of [2-3H]mannose-labeled glycoproteins, with enzymatic removal of labeled N-glycans, separation according to size by HPLC and radioactive detection in a scintillation counter. [摘要]  其生物合成后不久,糖蛋白的N-连接寡糖的修饰与糖蛋白折叠状态相关。 可以通过脉冲追踪分析[2- 3 H]甘露糖标记的糖蛋白,通过酶切除标记的N-聚糖来检测这些变化,根据大小通过HPLC分离和放射性 在闪烁计数器中检测。
【背景】在将新生多肽进入ER后,进行若干翻译后修饰,这对于折叠,成熟和质量控制过程至关重要。加入核糖寡糖Glc 3 N 3 GlcNAc 2以产生N-连接的糖蛋白是非常常见的修饰,首先发生(Benyair等人,2011)。前体N-聚糖的加工通过在早期分泌室(Tannous等人,2015)中创建识别标签来引导糖蛋白成熟和质量控制机制。在后期阶段,在整个分泌途径中,寡糖的核心作为将糖链扩展成复合聚糖的平台,其结构涉及糖蛋白的运输和功能(Kamiya等人, ,2012)。由于早期N-连接的聚糖修饰反映糖蛋白生物合成和质量控制,寡糖加工已成为许多研究的主题(Avezov等人,2010; Hosokawa等人。,2010; Ninagawa等人,2014; Ogen-Shtern等人,2016)。糖蛋白组学方法大大改善了N-聚糖的表征,但它们不允许研究早期分泌途径中聚糖加工的动力学。
 这里我们描述一种用于分离和分析代谢标记的N-连接寡糖的简化脉冲追踪方法。该方法包括通过[2- H] ...

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