| Validating Candidate Congenital Heart Disease Genes in Drosophila
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Author:
Date:
2017-06-20
[Abstract] Genomic sequencing efforts can implicate large numbers of genes and de novo mutations as potential disease risk factors. A high throughput in vivo model system to validate candidate gene association with pathology is therefore useful. We present such a system employing Drosophila to validate candidate congenital heart disease (CHD) genes. The protocols exploit comprehensive libraries of UAS-GeneX-RNAi fly strains that when crossed into a 4XHand-Gal4 genetic background afford highly efficient cardiac-specific knockdown of endogenous fly orthologs of human genes. A ...
[摘要] 基因组测序工作可能涉及大量基因和从头突变作为潜在的疾病风险因素。 因此，用于验证候选基因与病理学关联的高通量体内模型系统是有用的。 我们提出了使用果蝇来验证候选先天性心脏病（CHD）基因的这种系统。 这些方案利用了UAS-GeneX-RNAi飞行菌株的综合文库，当跨越4XHand-Gal4遗传背景时，提供了人类基因内源性直向同源物的高效心脏特异性敲低。 一组定量测定评估多种心脏参数的表型严重程度。 这些包括发育致死率，幼虫和成人心脏形态以及成年人的长寿。 这些方案最近被用于评估患者全外显子测序所涉及的100多个候选CHD基因（Zhu等，2017）。
【背景】（Bier和Bodmer，2004; Cagan，2011; Zhang et al。，2013; Owusu-Ansah和Perrimon，2014; Diop和Bodmer，2015; Na et al。等等，2015），75％的人类疾病相关基因由飞行基因组中的功能同系物表示（Reiter et al。，2001）。尽管将果蝇发育表型直接与患者症状联系起来是一个挑战，果蝇可以作为一个非常复杂和有效的平台来测试和验证候选疾病基因功能在开发中，这可以很容易地扩大到评估大量的候选基因从患者基因组测序工作中确定。基于进化保守的心脏发育遗传机制，果蝇已被用于研究与冠心病相关20多年的基因（Bier和Bodmer，2004; ...
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| Bone Marrow-derived Endothelial Progenitor Cell Intercellular Adhesion Assay
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Author:
Date:
2016-08-20
[Abstract] Cell-cell adhesion ensures tight contacts between neighbouring cells, which is necessary for cell segregation, as well as for the morphological and functional differentiation of different tissues. Evidently there are cell-cell recognition systems that make cells of the same type preferentially adherent to one another. Homotypic cell adhesion is particularly important in mediating a range of physiological processes such as cell survival, migration and remodeling of vessels. Thus in the present study we selected two populations of endothelial progenitor cells which are from the same donor to ...
[摘要] 细胞粘附保证了相邻细胞之间的紧密接触，这对于细胞分离以及不同组织的形态和功能分化是必要的。显然，存在使相同类型的细胞优先彼此粘附的细胞 - 细胞识别系统。同型细胞粘附在介导一系列生理过程例如细胞存活，迁移和血管重塑中特别重要。因此，在本研究中，我们选择两个来自相同供体的内皮祖细胞群体，以研究小分子化合物Icariin对同型细胞粘附的可能影响。许多血管生成因子可以破坏细胞间连接的组织，导致内皮屏障开放。在本研究中，我们观察到Icariin治疗减少EPC中VE-钙粘蛋白表达的水平，表明细胞 - 细胞粘附减少 - 证明Icariin的促血管生成作用。总之，所观察到的EPCs的同型粘附的丧失可能有助于由Icariin施加的增强的血管生成作用。
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