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Fisher ScientificTM Multi-Purpose Tube Rotators

公司名称: Fisher Scientific
产品编号: 88-861-049
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Purification of FLAG-tagged Secreted Proteins from Mammalian Cells
Author:
Date:
2017-08-05
[Abstract]  This protocol describes a method for purifying glycosylated FLAG-tagged secreted proteins with disulfide bonds from mammalian cells. The purified products can be used for various applications, such as ligand binding assays. [摘要]  该方案描述了一种用于从哺乳动物细胞中用二硫键纯化糖基化的FLAG标记的分泌蛋白的方法。 纯化的产物可用于各种应用,例如配体结合测定。
【背景】电子。大肠杆菌是从原核生物和真核生物生产重组蛋白质的首选生物之一。细菌表达系统的主要优点是生产率高,成本低。然而,成熟蛋白质对于功能分析是必需的(例如,配体结合测定)。大多数分泌的真核蛋白通过共价聚糖键和在内质网中形成二硫键进行翻译后修饰。这些共价修饰对于分泌的成熟蛋白的一般稳定性和折叠是必需的。因此,生产哺乳动物分泌蛋白质的最佳方法是使用哺乳动物宿主来确保经过适当的翻译后修饰的重组蛋白的产生。在以下方案中,我们已经描述了从哺乳动物细胞中纯化分泌蛋白质的详细程序。该方案用于生产标记有FLAG标签的蛋白质,但也适用于其他标记(例如,His标签)蛋白质的蛋白质。

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