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1M Tris-HCl, pH 8.5 Solution. 1000ml, sterile

公司名称: Teknova
产品编号: T1085
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Protocol for HeLa Cells Infection with Escherichia coli Strains Producing Colibactin and Quantification of the Induced DNA-damage
Author:
Date:
2017-08-20
[Abstract]  Strains of Escherichia coli bearing the pks genomic island synthesize the genotoxin colibactin. Exposure of eukaryotic cells to E. coli producing colibactin induces DNA damages, ultimately leading to cell cycle arrest, senescence and death. Here we describe a simple method to demonstrate the genotoxicity of bacteria producing colibactin following a short infection of cultured mammalian cells with pks+ E. coli. [摘要]  具有pks基因组岛的大肠杆菌菌株合成基因毒素大肠杆菌素。 将真核细胞暴露于产生大肠杆菌的大肠杆菌诱导DNA损伤,最终导致细胞周期停滞,衰老和死亡。 在这里,我们描述了一种简单的方法来证明在用pks +大肠杆菌培养的哺乳动物细胞的短时间感染后,产生大肠杆菌素的细菌的遗传毒性。
【背景】大肠杆菌素是在大肠杆菌的肠外致病,共生和益生菌菌株中发现的基因毒素(Nougayrede等,2006)。大肠杆菌素也由其他肠杆菌科产生,包括肺炎克雷伯杆菌,产气肠杆菌和柠檬酸杆菌(Putze等人,2009)。大肠杆菌素是通过由多酮酶和非核糖体肽合酶(PKS和NRPS),定制和成熟酶以及外排泵组成的多酶机械合成的聚酮化合物/非核糖体肽杂化化合物(综述:Taieb等人。,2016)。该合成机制编码在52kb的基因组,即'pks'岛上。 Colibactin在感染pks +细菌的真核细胞中诱导DNA损伤。由大肠杆菌素诱导的遗传毒性作用需要活的pks +细菌与真核细胞的直接接触。事实上,杀死的细菌或细菌上清液或裂解物没有观察到遗传毒性作用。因此,为了证明产生大肠杆菌的大肠杆菌的基因毒性,培养的哺乳动物细胞(例如HeLa细胞)在4小时内用活的pks ...

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