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Date:
2017-09-05
[Abstract] Reactive oxygen species (ROS) are cell signaling molecules synthesized inside the cells as a response to routine metabolic processes. In stress conditions such as ultraviolet radiation (UVR), ROS concentration increases several folds in the cells that become toxic for the cell survival. Here we present the method for in vivo detection of ROS by using an oxidant-sensing probe 2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA) in cyanobacteria. This method provides reliable, simple, rapid and cost effective means for detection of ROS in cyanobacteria.
[摘要] 活性氧（ROS）是细胞内合成的细胞信号分子，作为对常规代谢过程的反应。 在紫外线照射（UVR）等应激条件下，ROS浓度在细胞中增加数倍，对细胞存活有毒性。 在这里，我们介绍了通过使用蓝细菌中的氧化剂感测探针2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）来体内检测ROS的方法。 该方法提供可靠，简单，快速和成本有效的检测蓝细菌中的ROS的方法。
【背景】蓝藻是最古老的含氧光合自养体;它们在水生和陆地生态系统的生物量生产中发挥重要作用，并作为各种增值产品的来源（Vaishampayan等，2001;Häderet al。，2007; Fischer，2008）。近年来，臭氧层的消耗导致太阳紫外线辐射（UVR）涌入增加，这对所有存在于地球上的生物（包括蓝细菌）都是有害的（Holzinger和Lutz，2006）。 UVR通过作用于DNA /蛋白质或间接通过活性氧（ROS）的氧化损伤直接伤害蓝细菌（He和Häder，2002）。在植物，藻类和哺乳动物细胞中，已经使用各种荧光和化学发光方法检测ROS（Crow，1997; He和Häder，2002; Soh，2006; Wu et al。，2007; Palomero et al。，2008）。
2'，7'-二氯二氟荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）是一种非荧光，细胞可渗透的染料，其在细胞酯酶的作用下在细胞内水解成其极性但非荧光形式的DCFH，因此保留在细胞中。通过细胞内ROS和其他过氧化物的作用氧化DCFH使分子变成其可通过各种荧光方法检测的2'，7'-二氯荧光素（DCF）的高度荧光形式（He和Häder，2002; ...
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