| Mimicking Angiogenesis in vitro: Three-dimensional Co-culture of Vascular Endothelial Cells and Perivascular Cells in Collagen Type I Gels
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Author:
Date:
2017-04-20
[Abstract] Angiogenesis defines the process of formation of new vascular structures form existing blood vessels, involved during development, repair processes like wound healing but also linked to pathological changes. During angiogenic processes, endothelial cells build a vascular network and recruit perivascular cells to form mature, stable vessels. Endothelial cells and perivascular cells secret and assemble a vascular basement membrane and interact via close cell-cell contacts. To mimic these processes in vitro we have developed a versatile three-dimensional culture system where ...
[摘要] 血管发生定义了形成现有血管的新血管结构的形成过程，涉及发育过程中的修复过程，如伤口愈合，还与病理变化有关。 在血管生成过程中，内皮细胞建立血管网络并招募血管周围细胞以形成成熟稳定的血管。 内皮细胞和血管周围细胞秘密并组装血管基底膜，并通过细胞间接触进行相互作用。 为了体外模拟这些过程，我们开发了一种通用的三维培养系统，其中血管周围细胞（PVC）与胶原I型凝胶中的人脐带血管内皮细胞（HUVEC）共培养。 这种共培养系统可用于通过广泛的分析选项来确定新生血管生成事件期间的生物化学和细胞过程。
【背景】内皮细胞和血管周围细胞之间的协调相互作用对于根据给定组织内的局部需要形成稳定的血管网是非常重要的。多个分子组分有助于相互作用，但仍然很少了解。需要各种生长因子来吸引内皮细胞到低氧浓度的位点，并建立新的血管，然后被血管周围细胞覆盖。两种细胞类型相互作用以分泌特定的细胞外基质并稳定新形成的血管。在过去已经建立了多个测定法来分析二维基质胶底物上的血管细胞相互作用和血管样网络形成，但是这些测定在三维细胞内提供关于血管内血管周围细胞相互作用和血管基底膜形成的初始步骤的信息是有限的维度微环境。此外，缺乏适合于培养实验的良好表征的血管周围细胞。
我们以前分离出具有血管周围特征的细胞，因为它们表达周细胞特异性标记，产生和分泌细胞外基质蛋白并在体内刺激血管生成过程（Brachvogel等，2005和2007）。这些细胞用于与人脐静脉内皮细胞建立共培养系统，并研究三维微环境中两种细胞类型相互作用后新生血管发生的关键步骤（Pitzler等，2016; ...
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| Isolation of Intestinal Mesenchymal Cells from Adult Mice
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Date:
2016-09-20
[Abstract] During the last 20 years intestinal mesenchymal cells (IMCs) have emerged as an important cell type that plays a central role in intestinal development and homeostasis, by providing both structural support and growth regulatory elements. IMCs also actively participate in wound healing responses, thus regulating pathologic conditions such as tissue repair, inflammation, fibrosis and carcinogenesis (Powell et al., 2011). We have recently demonstrated that intestinal mesenchymal-specific signals play important in vivo physiological roles in intestinal inflammation and ...
[摘要] 在过去20年间，肠间质细胞（IMC）已经作为重要的细胞类型出现，通过提供结构支持和生长调节元件在肠发育和体内平衡中起着中心作用。 IMC还积极参与伤口愈合反应，从而调节病理状况，例如组织修复，炎症，纤维化和癌发生（Powell等人，2011）。 我们最近已经证明肠间充质特异性信号在肠炎症和癌发生中在体内起重要的生理作用（Koliaraki等人，2012; Roulis等人，/em>。，2014; Koliaraki 。。，2015）。 在这里我们描述了用于从成年小鼠肠道分离和培养间充质细胞的酶法。
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| Olfactory Bulb (OB) Transplants
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Author:
Date:
2016-09-05
[Abstract] Transplantation in mouse brain slices is a powerful tool in order to study axon targeting and migrational events during development. Taking advantage of donors and recipients belonging to different genotypes, this technique allows researchers to assess the contribution of donor and/or recipient tissue by performing various combinations and to study cell-autonomous functions or effects that are influenced by the recipient’s environment (Bastakis, et al., 2015). Here we describe the transplantation procedure on sagittal brain slices containing olfactory bulb (OB). Specifically, we have ...
[摘要] 小鼠脑切片中的移植是一个强大的工具，以便研究轴突靶向和发展过程中的迁移事件。 利用属于不同基因型的供体和受体，该技术允许研究人员通过进行各种组合来评估供体和/或受体组织的贡献，并研究受受体环境影响的细胞自主功能或效应（Bastakis， em>等人，2015）。 在这里我们描述的矢状大脑切片包含嗅球（OB）的移植程序。 具体来说，我们已经将背侧OB的近端到外皮部分移植到受体切片上的相同区域。 移植的切片可以培养长达3天，之后由于3D中的生长它们的形态被破坏。 这些切片的重新切片允许更详细的免疫组织化学分析。
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