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compactTM

公司名称: Bruker
产品编号: compactTM
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Isolation and Detection of the Chlorophyll Catabolite Hydroxylating Activity from Capsicum annuum Chromoplasts
Author:
Date:
2017-09-20
[Abstract]  Hydroxylation of chlorophyll catabolites at the so-called C32 position (Hauenstein et al., 2016) is commonly found in all plant species analyzed to date. Here we describe an in vitro hydroxylation assay using Capsicum annuum chromoplast membranes as a source of the hydroxylating activity, which converts the substrate epi-pFCC (epi-primary Fluorescent Chlorophyll Catabolite) (Mühlecker et al., 2000) to epi-pFCC-OH. [摘要]  所谓C32位置的叶绿素分解代谢物的羟基化(Hauenstein et al。,2016)通常在迄今为止分析的所有植物物种中发现。 在这里,我们描述了使用Capsicum annuum chromoplast membrane作为羟基化活性的来源的体外羟基化测定法,其将底物epi-pFCC(外显子荧光叶绿素Catabolite)(Mühlecker等,2000)转化为epi-pFCC-OH。
【背景】在叶片衰老和果实成熟期间,吸光叶绿素被降解成非荧光分解代谢物,以防止氧化损伤。叶绿素分解途径(PAO / phyllobilin途径)由几个酶催化的连续步骤组成,最终降解产物称为叶绿素,最终储存在液泡中(Kräutler,2016)。外源荧光叶绿素Cepolite(epi-pFCC)是第一种非光毒性中间体。在叶绿体中形成后,可以发生epi-pFCC的侧链修饰,其中大部分发生在叶绿体外。然而,这些修饰之一是由内部叶绿体包膜酶TIC55(铁氧还蛋白(Fd)依赖性非血红素加氧酶家族的成员)催化的C32位置(图1)的羟基化。 TIC55含有Rieske和单核铁结合结构域,并显示其需要Fd还原系统以及分子氧作为其羟基化活性。在这里我们描述了TIC55的体外酶测定法,其用于表征红辣椒色素体的表达pFCC羟基化酶活性。
图1.叶绿素分解途径的概述,突出了从epi-pFCC到epi-pFCC-OH的TIC55催化反应。 ...

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