| Histochemical Staining of Collagen and Identification of Its Subtypes by Picrosirius Red Dye in Mouse Reproductive Tissues
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Author:
Date:
2017-11-05
[Abstract] Collagen is one of the foremost components of tissue extracellular matrix (ECM). It provides strength, elasticity and architecture to the tissue enabling it to bear the wear and tear from external factors like physical stress as well as internal stress factors like inflammation or other pathological conditions. During normal pregnancy or pregnancy related pathological conditions like preterm premature rupture of membranes (PPROM), collagen of the fetal membrane undergoes dynamic remodeling defining biochemical properties of the fetal membrane. The protocol in this article describes the ...
[摘要] 胶原蛋白是组织细胞外基质（ECM）最重要的组成部分之一。它为组织提供了强度，弹性和构造，使其能承受来自外部因素的磨损，如身体压力以及炎症或其他病理状况等内部应激因素。在正常妊娠或与妊娠相关的病理状况如胎膜早破（PPROM）期间，胎膜的胶原经历动态重塑，定义胎膜的生化特性。本文中的方案描述了一种简单，快速，可靠的组织化学染色方法，用苦皮红染色法对总胶原进行染色。该协议可用于多聚甲醛（PFA）和甲醛固定石蜡包埋组织切片。我们进一步描述了胶原蛋白在不同的小鼠生殖组织中的染色和分布，并且还展示了这种技术如何与偏振显微镜组合用于检测不同亚型胶原蛋白的分布。
【背景】胶原蛋白是从皮肤到骨头的所有结缔组织中的主要负载聚合物。当施加机械力时，胶原蛋白网络强烈变硬，从而防止组织的过度变形。有16种胶原蛋白，其中I型，II型和III型胶原蛋白几乎占据了人体胶原蛋白的80％，这些胶原蛋白被挤在一起形成细长的原纤维。 IV型胶原蛋白形成二维网状结构;而其他几种胶原蛋白类型与原纤维型胶原蛋白相关，将它们彼此连接或连接到其他基质组分。这些胶原蛋白与细胞外基质（ECM）的其他成分一起经历不断的重塑以提供所需的生物化学性质如拉伸强度和弹性。这种胶原蛋白的独特属性是生殖组织稳定性的影响因素之一，其失调可能导致不良事件，例如胎盘异常，膜破裂（Hampson等人，1997; Marpaung， ...
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| DQ-Red BSA Trafficking Assay in Cultured Cells to Assess Cargo Delivery to Lysosomes
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Author:
Date:
2017-10-05
[Abstract] Lysosomes are the terminal end of the endocytic pathway having acidic environment required for active hydrolases that degrade the cargo delivered to these compartments. This process of cargo delivery and degradation by endo-lysosomes is a tightly regulated process and important for maintaining cellular homeostasis. Cargos like EGF (Epidermal Growth Factor), Dil-LDL (3,3’-Dioctadecylindocarbocyanine-Low Density Lipoprotein), Dextran, DQ-BSA (Dye Quenched-Bovine Serum Albumin) etc., are routinely used by researchers to analyze the role of various proteins in endocytic pathway. ...
[摘要] 溶酶体是具有降解递送到这些隔室的货物的活性水解酶所需的酸性环境的内吞途径的末端。 这种内溶溶酶体的货物递送和降解过程是一个严格调节的过程，对于维持细胞体内平衡是重要的。 Cargos如EGF（表皮生长因子），Dil-LDL（3,3'-二十八碳基碳代花青 - 低密度脂蛋白），葡聚糖，DQ-BSA（染料淬灭 - 牛血清白蛋白）等常规 由研究人员用来分析各种蛋白质在内吞途径中的作用。 在缺乏或过表达感兴趣的基因的细胞中的DQ-BSA的贩运是用于鉴定各种蛋白质在内吞运输途径中的作用的有用测定。 该方案描述了可用于研究各种细胞类型的吞噬运输的DQ-Red BSA运输测定。
【背景】细胞不断地与其细胞外环境交换物质，并且在这个过程中，它们将货物内部化在质膜的囊泡中。这种内部货物被运送到早期的内体，从那里它可以通过再循环内体回到质膜或进入规范的内吞途径。一旦被注定要退化，货物就会移动到后期的内体，并最终与溶酶体融合，其中活性水解酶消化货物（Jovic等人，2010）。这些内吞室具有其内腔的特征pH。早期内体体内的pH值范围为5.9-6.8，晚期内体的pH范围为4.9-6.0，溶酶体最为酸性，pH范围为4.5-5.0（Maxfield和Yamashiro，1987）。溶酶体的酸性环境对于存在于其管腔中的水解酶和货物降解的活性是必需的（Garg等人，2011; ...
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