| Embryonic Intravitreous Injection in Mouse
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] Axons of retinal ganglion cells (RGCs) relay visual information from the retina to lateral geniculate nucleus (LGN) and superior colliculus (SC), which are two major image-forming visual nuclei. Wiring of these retinal projections completes before vision begins. However, there are few studies on retinal axons at embryonic stage due to technical difficulty. We developed a method of embryonic intravitreous injection of dyes in mice to visualize retinal projections to LGN and SC. This study opens up the possibility of understanding early visual circuit wiring in mice embryos.
[摘要] 视网膜神经节细胞（RGC）的轴突将视觉信息从视网膜传递到外侧膝状核（LGN）和上丘（SC），这是两个主要的成像视觉核。 在视力开始之前完成这些视网膜投射的布线。 然而，由于技术困难，很少有关于胚胎期视网膜轴突的研究。 我们开发了一种胚胎玻璃体内注射染料的方法，用于观察LGN和SC的视网膜投射。 这项研究开辟了理解小鼠胚胎早期视觉电路布线的可能性。
【背景】早在胚胎第14.5天（E14.5）小鼠中，视网膜轴突开始向LGN和SC投射。 为了研究胚胎中的轴突投射，需要在注射手术前保持胚胎存活至少10小时，玻璃内注射染料。 以前的研究表明，胚胎可以使用含氧小鼠血清进行体外培养。 然而，营养多样性，氧饱和度和温度调节等问题会影响胚胎的生理状况。 在我们的研究中，我们通过胚胎中的子宫壁和眼睑进行玻璃体内注射，并在注射后将它们保存在子宫中。 从E15.5到E18.5很好地标记了对LGN和SC的视网膜轴突投射。
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| Intra-amniotic Injection of Mouse Embryos
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Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract] Recent outbreaks of infectious neuro-developmental diseases such as congenital Zika syndrome - have led to a demand for prognosis data from animal models. We developed an intra-amniotic injection mice model that allows Zika virus (ZIKV) infected mice to grow to puberty. In this system, ZIKV is injected into the amniotic fluid of pregnant mice and infected embryos thereafter. ZIKV-infected mice show several symptoms of clinical ‘congenital Zika syndrome’, including decreased brain volume and mis-laminated retina. We also evaluated several behavioral functions of these ZIKV-infected mice, for ...
[摘要] 最近爆发的传染性神经发育疾病，例如先天性寨卡综合征 - 已经导致对来自动物模型的预后数据的需求。 我们开发了羊膜内注射小鼠模型，其允许寨卡病毒（ZIKV）感染的小鼠生长至青春期。 在此系统中，ZIKV被注入怀孕小鼠的羊水中，然后感染胚胎。 ZIKV感染的小鼠显示出临床'先天性Zika综合征'的几种症状，包括脑容积减少和视网膜错层。 我们还评估了这些ZIKV感染小鼠的几种行为功能，例如，在小鼠到达青春期后，它们具有视觉和运动缺陷。 这种技术可用于筛选和评估候选药物，并有助于评估感染性神经发育疾病的预后。
【背景】自第一例人感染ZIKV病例以来，已有60多年的历史，但2007年仅记录了14例ZIKV感染的人类病例。 预后数据远远落后于2015年最近爆发的ZIKV。有证据表明小鼠模型可能对预后研究有效，因为之前的报道证明ZIKV在小鼠中的神经毒性。 因此，ZIKV感染的各种方法包括静脉注射，腹腔注射，足垫注射和脑注射已被用于研究胚胎期或婴儿期期间个体的先天性寨卡综合征。 这里给出的羊膜内注射模型具有两个有利的特征。 首先，可以使用野生型小鼠（C57 BL / 6J），并且研究不限于具有免疫缺陷的小鼠。 其次，ZIKV感染的小鼠可长成青春期，这对试图评估预后的研究是有益的。
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| Isolation and Purification of Schwann Cells from Spinal Nerves of Neonatal Rat
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Author:
Date:
2017-10-20
[Abstract] Primary cultured Schwann cells (SCs) are widely used in the investigation of the biology of SC and are important seed cells for neural tissue engineering. Here, we describe a novel protocol for harvesting primary cultured SCs from neonatal Sprague-Dawley (SD) rats. In the present protocol, dissociated SCs are isolated from the spinal nerves of neonatal rats and purified by the treatment of cytosine arabinoside (AraC).
[摘要] 原代培养的雪旺氏细胞（SCs）广泛用于SC的生物学研究，是神经组织工程的重要种子细胞。 在这里，我们描述了从新生Sprague-Dawley（SD）大鼠中收获原代培养的SC的新方案。 在本方案中，解离的SCs从新生大鼠的脊神经中分离并通过治疗阿糖胞苷（AraC）进行纯化。
【背景】SC是周围神经系统（PNS）的神经胶质细胞。主要SCs的分离和纯化是研究SC生物学的关键步骤。此外，纯化的原代培养的SC是用于神经组织工程的重要种子细胞。迄今为止，已经基于Brockes（Brockes等人，1979）的方法报道了培养SC的各种方法。通过报道的方法，坐骨神经主要用于SC隔离，因为它们尺寸大并且可以容易地获得。然而，坐骨神经的SC容易被成纤维细胞污染，因为结缔组织难以清除。特别是神经管和神经束是成纤维细胞的主要来源。没有特殊处理，污染的成纤维细胞比SCs快得多，并且将很快成为培养物中主要的细胞。在过去几十年中，已经开发出许多用于从污染成纤维细胞中分离SC的纯化方法。这些纯化方法的细节包括单一或组合的抗有丝分裂处理（Wood，1976），抗体介导的细胞溶解（Brockes等人，1979），免疫选择（Assouline等人，，1983; ...
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