| Using the Parafilm-assisted Microdissection (PAM) Method to Sample Rodent Nucleus Accumbens
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Author:
Date:
2020-12-05
[Abstract] Microdissection techniques are very important for anatomical and functional studies focused on neuroscience, where it is often necessary microdissect specific brain areas to perform molecular or anatomical analyses. The parafilm®-assisted microdissection (PAM) was previously described and involves the microdissection of tissue sections mounted on parafilm-covered glass slides. In this work, we describe the use of the PAM method to microdissect rodent nucleus accumbens (NAc). (1) We first describe the best way to perform the mouse euthanasia and how to remove the brain. (2) ...
[摘要] [摘要]显微解剖技术对于专注于神经科学的解剖学和功能研究非常重要，在显微学中，通常有必要对特定的大脑区域进行显微解剖以进行分子或解剖学分析。石蜡膜® -assisted显微切割（PAM）先前描述的，并且涉及安装在封口膜覆盖的载玻片上的组织切片的显微切割。在这项工作中，我们描述了使用PAM方法微分散啮齿动物伏隔核（NAc）。（1）我们首先描述执行小鼠安乐死的最佳方法以及如何去除大脑。（2）接下来，我们介绍如何用石蜡制作的幻灯片® 那将被用来接收大脑切片。（3）接下来，我们描述如何在低温恒温器中处理大脑，如何对齐半球以及如何识别NAc前后限。（4）我们还描述了如何对切片进行染色和脱水，这是促进显微切割和保存大分子的关键步骤。（5）在最后一步，我们描述了如何识别NAc的背腹和后内侧界限，以及最后如何进行该区域的手动显微解剖。这是一种低成本的技术，该技术允许研究者具体microdissect任何脑区域，从该完整的RNA和蛋白质可被提取为执行几个分子分析（例如。，实时PCR，西方印迹和RNA-SEQ）。
[背景]伏隔核（NAC）是位于纹状体的rostroventral部分基底节的一部分。具体而言，NAc是我们称为腹侧纹状体的结构的一部分，该结构也包含嗅觉结节。众所周知，NAc在多巴胺能中脑边缘途径中的作用，其调节动机行为并对情绪和情境行为负责（Baik，2013）。伏隔核已经被牵连的精神疾病（例如，抑郁症），药物成瘾，肥胖，慢性疼痛，这表明在研究这个大脑结构的神经生物学的相关性（内斯特勒和Carlezon，2006;沃尔科夫等，2011;沃尔科夫和Morales，2015；Brandão等，2019； ...
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| Induction of Photothrombotic Stroke in the Sensorimotor Cortex of Rats and Preparation of Tissue for Analysis of Stroke Volume and Topographical Cortical Localization of Ischemic Infarct
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Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract] The photothrombotic model of stroke is commonly used in research as it allows the ischemic infarct to be targeted to specific regions of the cortex with high reproducibility and well-defined infarct borders. Unlike other models of stroke, photothrombosis allows the precise size and location of infarct to be tightly controlled with minimal surgical invasion. Photothrombosis is induced when a circulating photosensitive dye is irradiated in vivo, resulting in focal disruption of the endothelium, activation of platelets and occlusion of the microvasculature (Watson et al., 1985; ...
[摘要] 中风的光血栓形成模型通常用于研究，因为它允许缺血性梗塞针对特定区域的皮层，具有高重现性和明确的梗塞边界。 与其他卒中模型不同，光血栓形成能够以最小的手术入侵严密控制梗死的精确大小和位置。 当在体内辐射循环的光敏染料时诱导光血栓形成，导致内皮的局灶性破坏，血小板的活化和微血管的闭塞（Watson等人，1985年 ; Dietrich等人，1987; Carmichael，2005）。 这里的方案定义了如何将光致血栓形成特异性地靶向大鼠的感觉运动前肢皮层并具有高重现性。 提供了大鼠皮质组织处理的详细方法以允许精确分析脑卒中体积和立体定向确定缺血性损伤的精确皮层区域。
【背景】中风的光血栓形成模型允许在皮层的特定区域中精确布置缺血性梗塞（Carmichael，2005; Underly and Shih，2017）。光血栓形成可用于封闭皮层中的特定动脉和动脉分支（Carmichael et al。，2005），pia的个别血管（Taylor和Shih，2013），并定义了皮质区域如桶（Dietrich等人，1987）和后肢躯体感觉皮层（Que等人，1999）。使用这种方法，在许多实验动物模型中已经产生了高度可重现的缺血性梗塞，包括啮齿动物（Watson等人，1985; Carmichael等人，2005）和非人类动物模型人灵长类动物（Ikeda et ...
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| In vivo Use of Dextran-based Anterograde Cortical Tracers to Assess the Integrity of the Cortical Spinal Tract
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Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract] When injected into the motor cortex of rats, anterograde tracers label fibers of the associated descending corticospinal tract (CST) that originate from pyramidal neurons in the tracer-injected cortex. These fibers can be assessed at the level of the spinal cord to determine the integrity of the descending CST and the spatial distribution of axons in the spinal grey matter. Here we provide detailed methods on the minimally invasive stereotaxic injection of anterograde tracers into the forelimb sensorimotor representation in the rat cortex. In addition, we detail the fixing and processing of ...
[摘要] 当注射到大鼠运动皮层时，顺行示踪剂标记伴随着皮质脊髓束下行（CST）的起源于示踪剂注射皮层中的锥体神经元的纤维。 这些纤维可以在脊髓水平进行评估以确定下降的CST的完整性和脊髓灰质中轴突的空间分布。 在这里，我们提供了在大鼠皮层前肢感觉运动表征的微创立体定向注射顺行示踪剂的详细方法。 此外，我们详细介绍了脊柱组织的固定和加工，以评估CST的完整性和分支到脊髓灰质。
【背景】运动皮层含有上运动神经元，其产生形成CST的下行轴突并终止于脊髓。注入大鼠运动皮层的顺行示踪剂标记这些CST的降纤维，允许其在脊髓水平进行评估（图1）。在啮齿动物模型中，CST的顺行标记广泛用于评估一系列脊髓损伤模型（包括损伤）中的CST完整性（Thallmair等人，1998; Vavrek等人， 2006）和挫伤（Hill等人，2001）。此外，顺行皮质示踪剂已被用于评估不同模型的脑损伤例如皮质卒中中的遗留纤维和CST的可塑性（Wahl等人，2014; Wiersma等人， ...
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