| Quantification of Neisseria meningitidis Adherence to Human Epithelial Cells by Colony Counting
|
|
Author:
Date:
2018-02-05
[Abstract] To cause an infection, the human specific pathogen Neisseria meningitides must first colonize the nasopharynx. Upon tight interaction with the mucosal epithelium, N. meningitidis may cross the epithelial cellular barrier, reach the bloodstream and cause sepsis and/or meningitis. Since N. meningitidis niche is restricted to humans the availability of relevant animal models to study host-pathogen interactions are limiting. Therefore, most findings that involve N. meningitidis colonization derive from studies using cultured human cell lines. Human epithelial ...
[摘要] 为了引起感染，人类特定的病原体脑膜炎奈瑟氏脑必须首先在鼻咽中定居。 与粘膜上皮紧密相互作用时， 脑膜炎双球菌可能穿过上皮细胞屏障，到达血流并引起败血症和/或脑膜炎。 由于 N meningitidis niche限于人类。 因此，大多数涉及N 脑膜炎菌群定植来源于使用培养的人类细胞系的研究。 在最初的病原体坚持。 在这里，我们描述了一个标准协议来量化N的遵守情况。 脑膜炎双球菌对上皮细胞FaDu细胞的作用。 感染后收集的细胞裂解物的集落计数用于量化对上皮细胞的粘附。
【背景】作为细菌发病机制的重要一步。细菌粘附素与宿主细胞表面受体之间的分子相互作用决定了定植位点（Soto and Hultgren，1999）。鼻咽中的上皮层形成人类限制性病原体N的第一个细胞屏障。 meningitidis 遇到和无症状殖民。牢固粘附，并与宿主细胞相互作用可导致上皮细胞和进入血液的渗透，在危及生命的败血症和/或脑膜炎（斯蒂芬斯，2009）得到的。从细菌膜延伸出来的长细丝（称为IV型菌毛（Tfp））与PilC1尖端定位的粘附素在初始依从性中起关键作用。脑膜炎到鼻咽上皮细胞（Marceau等，1995; Rudel等，1995）。 Tfp不仅促进与宿主细胞的相互作用，而且参与细菌聚集体的发育，这可以有助于高水平的粘附和抵抗剪切应力（Helaine等，2005，Mikaty ...
|
|
|
| Immunofluorescence Analysis of Human Endocervical Tissue Explants Infected with Neisseria gonorrhoeae
|
|
Author:
Date:
2018-02-05
[Abstract] Colonization and penetration of the epithelium is the infection-initiating route of mucosal pathogens. The epithelium counteracts infection by eliciting host cell responses while maintaining the mucosal barrier function. The obligate human sexually transmitted bacterium Neisseria gonorrhoeae, or gonococcus (GC) infects the female reproductive tract primarily from the endocervical epithelium. Due to lack of an infection model that mimics all aspects of human infections in the female reproductive tract, GC pathogenesis is poorly understood. This protocol takes advantage of the ...
[摘要] 上皮的定植和穿透是粘膜病原体的感染启动途径。 上皮细胞通过引发宿主细胞应答来抵抗感染，同时维持粘膜屏障功能。 专性人类性传播细菌淋病奈瑟氏球菌或淋球菌属（GC）主要从宫颈内膜上皮感染女性生殖道。 由于缺乏模仿女性生殖道人类感染的各个方面的感染模型，GC发病机制知之甚少。 该方案利用培养物中繁殖的人宫颈组织的生存力和功能完整性来产生体外感染模型。 这种组织模型保持了感染目标和环境的性质，而没有任何操作，如病毒永生化上皮细胞。 使用免疫荧光显微镜，分析GC与子宫颈上皮细胞的相互作用。
【背景】淋病奈瑟菌（GC）感染人类生殖器上皮，引起淋病，一种常见的性传播感染。女性感染可导致严重的并发症，如盆腔炎，引起输卵管瘢痕和堵塞，易发生异位妊娠或不孕。由于抗生素耐药菌株的流行率增加，淋病又成为重要的公共卫生问题。由于人类是GC的唯一宿主，因此缺乏模仿人类感染各个方面的感染模型是推进我们对GC发病机理的理解的主要障碍。我们建立了人宫颈组织外植体模型和免疫荧光显微镜分析来检测GC感染妇女GC感染的主要部位人间宫颈细胞的机制。这种体外模型保持了宫颈上皮细胞的正常细胞构筑和组织完整性。使用这种模型和免疫荧光分析，我们表明，气相色氨酸定居和渗透到子宫颈组织，在那里他们可能导致症状和播散性淋球菌感染。 ...
|
|
|
| Live-cell Imaging of Neisseria meningitidis Microcolony Dispersal Induced by Lactate or Other Molecules
|
|
Author:
Date:
2018-01-20
[Abstract] To efficiently colonize the nasopharyngeal epithelium, the human restricted pathogen Neisseria meningitidis follows a multistep adhesion cascade. First, the bacteria adhere to host cells and aggregate into spherical shaped structures called microcolonies. Several hours later, single bacteria start dispersing from the microcolonies and form a monolayer on top of the host cells. Once in proximity to host cells meningococci can adhere tightly to the epithelial surface or become internalized. This can eventually result in invasion of the mucosal surfaces and gain access to the ...
[摘要] 为了有效地定居鼻咽上皮，人类限制性病原体脑膜炎奈瑟氏球菌遵循多步粘附级联。首先，细菌粘附到宿主细胞并聚集成称为微菌落的球形结构。几个小时后，单细菌开始从微菌落分散并在宿主细胞上形成单层。一旦接近宿主细胞，脑膜炎球菌可紧密地粘附在上皮表面或内化。这最终可能导致粘膜表面的侵入并进入血液，导致危及生命的疾病。乳酸是一种来源于人类上皮细胞的代谢物，之前已被证明能诱导N的快速分散。 meningitidis 来自微菌落。在这里，我们描述基于活细胞成像的宿主细胞自由方法来检查宿主来源的乳酸对N的时间的影响。 meningitides microcolony扩散。虽然在这个协议中我们使用乳酸盐，它可以很容易地修改，以测试其他分子的影响。
【背景】ñ。脑膜炎是引起败血症和/或脑膜炎的专性人类病原体。鼻咽上皮的初始附着和随后形成的小菌落是建立感染的第一步。为了导致疾病N。脑膜炎奈瑟球必须穿过鼻咽粘膜上皮屏障，其天然储库，并进入血液（Stephens，2009; ...
|
|
|