| Assaying Mechanonociceptive Behavior in Drosophila Larvae
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Author:
Date:
2018-02-20
[Abstract] Drosophila melanogaster larvae have been extensively used as a model to study the molecular and cellular basis of nociception. The larval nociceptors, class IV dendritic arborization (C4da) neurons, line the body wall of the animal and respond to various stimuli including noxious heat and touch. Activation of C4da neurons results in a stereotyped escape behavior, characterized by a 360° rolling response along the body axis followed by locomotion speedup. The genetic accessibility of Drosophila has allowed the identification of mechanosensory channels and circuit elements ...
[摘要] 果蝇幼虫已广泛用作研究伤害感受的分子和细胞基础的模型。 幼虫伤害感受器，IV类树突状树枝状（C4da）神经元，排列在动物体壁上，并对各种刺激作出反应，包括有害的热和触觉。 激活C4da神经元导致刻板脱逃行为，其特征在于沿着身体轴线的360°滚动响应，随后是运动加速。 果蝇的遗传可及性允许识别伤害性反应所需的机械感受通道和电路元件，使其成为理解伤害性功能和行为的细胞和分子基础的有用和直接的读数。 我们已经优化了该协议以检测果蝇幼虫中的机械伤害行为。
【背景】伤害感受，是检测和避免有害刺激的先天能力，在整个动物界高度保守。果蝇幼虫能够检测并避免各种有害刺激，包括有害触觉，热和光（Tracey等人，2003; Hwang等人， ，2007; Xiang et al。，2010）。高于特定阈值（> 30mN）的机械刺激在所有幼虫阶段（Almeida-Carvalho等人，2017）都引发了定型滚动逃避反应，其被认为已经进化以避免通过寄生蜂如L。 boulardi （Hwang et。，2007）。这种逃避反应是由伤害性C4da神经元的激活介导的，伤害性C4da神经元具有覆盖整个体壁的感觉树突，允许动物检测有害线索。 C4da神经元表达属于DEG / ENaC家族的几种机械感受通道（Pickpocket [ppk]，ppk26 / ...
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| Assaying Thermo-nociceptive Behavior in Drosophila Larvae
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Author:
Date:
2018-02-20
[Abstract] Thermo-nociception, the detection and behavioral response to noxious temperatures, is a highly conserved action to avoid injury and ensure survival. Basic molecular mechanisms of thermal responses have been elucidated in several model organisms and are of clinical relevance as thermal hypersensitivity (thermos-allodynia) is common in neuropathic pain syndromes. Drosophila larvae show stereotyped escape behavior upon noxious heat stimulation, which can be easily quantified and coupled with molecular genetic approaches. It has been successfully used to elucidate key molecular ...
[摘要] 热伤害感受，对有害温度的检测和行为反应，是一种高度保守的行为，可避免受伤并确保生存。 热反应的基本分子机制已在几种模型生物体中阐明，并且与神经性疼痛综合征中常见的热超敏反应（热异常性疼痛）相关，因此具有临床相关性。 果蝇幼虫在有毒热刺激下显示刻板脱逃行为，其可以容易地量化并且与分子遗传学方法结合。 它已被成功地用于阐明参与热伤害性反应的关键分子组分和电路。 我们提供了一个详细的和更新的这个前面描述的方法（Tracey et al。，2003年）的协议，使用快速调节的热探针将确定的局部热刺激应用于幼虫。
【背景】果蝇幼虫对40°C以上的热刺激具有逃避反应（Tracey等人，2003），可能防止细胞损伤和损伤。伤害性感觉神经元，IV类树突状树枝状化（C4da）神经元的激活对于这种反应是必需和充分的（Hwang等人，2007）。使用加热探针（> 40°C，图1，图5，图6）应用局部热伤害性刺激通常会引发刻板行为，包括沿着幼虫体轴360°滚动和增加运动速度。先前的研究已经表明瞬时受体电位（Trp）通道无痛（Tracey等人，2003）和TrpA1（Neely等人，2011; Zhong等人，因为它们在C4da神经元中的表达和功能是伤害性逃避反应所必需的，所以它们是对该系统中的有害热应答的感觉通道。
虽然对幼虫的机械和热水伤害性刺激产生非常类似的滚动逃避反应（Hwang ...
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| Infection of Soybean Plants with the Insect Bacterial Symbiont Burkholderia gladioli and Evaluation of Plant Fitness
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Author:
Date:
2017-12-20
[Abstract] To investigate the establishment and consequences of host-microbe interactions, it is important to develop controlled infection assays suitable for each system, as well as appropriate methods to evaluate successful infection and its associated effects. Here, we describe a procedure for bacterial inoculation of soybean plants, followed by the assessment of systemic infection and impact on plant fitness. Soybean (Glycine max) seedlings were mechanically wounded using a device that mimics insect herbivory and inoculated with known cell numbers of Burkholderia gladioli bacteria ...
[摘要] 为了研究宿主 - 微生物相互作用的建立和后果，开发适用于每个系统的受控感染测定法以及评估成功感染及其相关作用的适当方法是重要的。在这里，我们描述了大豆植物的细菌接种程序，然后评估全身感染和对植物健康的影响。使用模拟昆虫食草动物的装置对大豆（Glycine max）幼苗进行机械性伤害，并用先前从昆虫宿主分离的已知细胞数目的伯克霍尔德氏菌（B.coli）进行接种。通过监测植物发育过程中身高，开花时间和叶绿素含量的变化以及通过与用无菌水接种的植物相比量化种子产量来评估对植物的影响。使用定量PCR和荧光原位杂交（FISH）在来自发育植物的组织中检查细菌感染的存在和增殖。
微生物与不同的真核生物建立共生关系，对宿主的适应性有着深远的影响，从有益到不利（Frank，1997）。在许多情况下，这些协会是直接或间接的影响与其他生物，如潜在的替代主机相互作用。举例来说，植物，微生物和昆虫之间有许多三方相互作用，其中微生物共生体在不同宿主之间传播并影响相关生物体的生理或生态（Frago等人）。 ，2012; Gilbert et al。，2012）。在植物性的Lagriinae甲虫中，与来自植物致病性分支的细菌（Burkholderia gladioli）建立了共生伙伴关系，表明这种关联在三方相互作用的情况下发展。先前已经证明了从 Lagria villosa ...
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