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Date:
2018-02-20
[Abstract] Here, we present a detailed protocol on setting up embryonic renal organ cultures using a culture method that we have optimised for anatomical maturation and imaging. Our culture method places kidney rudiments on glass in a thin film of medium, which results in very flat cultures with all tubules in the same image plane. For reasons not yet understood, this technique results in improved renal maturation compared to traditional techniques. Typically, this protocol will result in an organ formed with distinct cortical and medullary regions as well as elongated, correctly positioned loops of ...
[摘要] 在这里，我们提出了一个详细的协议，建立胚胎肾脏器官培养使用培养方法，我们已经优化解剖成熟和成像。 我们的培养方法是将肾脏的基质放在玻璃上，形成一层薄薄的培养基，培养的平面非常平坦，所有的肾小管都在同一图像平面上。 由于尚未理解的原因，与传统技术相比，该技术导致肾成熟的改善。 通常情况下，这个协议将导致器官形成不同的皮层和髓质区域，以及拉长，正确定位的亨利循环。 本文介绍了我们的方法并提供了详细的建议。 我们已经在Sebinger等人（2010）和Chang和Davies（2012）上发表了关于该技术性能的定性和定量评估。
【背景】哺乳动物的后肾（永久性）肾发育于位于中胚层尾端的简单遗传。在小鼠胚胎日（'E'）10，这些基因形成并由两种形态上可区分的组分组成;产生为Wolffian（肾）导管的憩室的上皮性输尿管芽，以及形成在导管旁的后肾间质（metanephrogenic mesenchyme）。随着发育进展，输尿管芽进入后肾间质，经历多轮生长和分枝，形成“树”。这后来重塑以产生一个成熟的集合管系统，其中肾小管从中心腔，肾盂放射（Lindstrom等人，2015）。肾盂排水到输尿管，从输尿管芽的原始茎形成。随着输尿管芽发育，它诱导来自后肾间充质细胞的细胞在其每个尖端周围凝结形成“帽间充质”（Schreiner，1902; ...
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