| Using Light and Electron Microscopy to Estimate Structural Variation in Thylakoid Membranes
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Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract] The shapes of chloroplasts and the architectures of internal thylakoid membranes are altered by growth and environmental changes (Lichtenthaler et al., 1981; Kutik, 1985; Terashima and Hikosaka, 1995). These morphological alterations proceed via transitional intermediates, during which dynamic and heterogeneous thylakoid membranes are observed in cells (Nozue et al., 2017). Light microscopy is useful for the detection of morphological differences in chloroplasts. The thylakoid architecture of such morphologically variable chloroplasts is confirmed by transmission electron ...
[摘要] 叶绿体的形状和内部类囊体膜的结构被生长和环境变化所改变（Lichtenthaler等，1981; Kutik，1985; Terashima和Hikosaka，1995）。 这些形态改变经由过渡中间体进行，在此期间在细胞中观察到动态和非均匀的类囊体膜（Nozue等人，2017）。 光学显微镜可用于检测叶绿体中的形态差异。 透射电子显微镜（TEM）证实了这种形态变化的叶绿体的类囊体结构。 描述了用光学显微镜结合电子显微镜监测结构变化的方法。
【背景】已经提出了超结构形态学与类囊体膜中的光合作用和代谢途径的功能性偶联（Oswald等人，2001）。 这是由类囊体膜在叶成熟期间和从营养期向开花生长期转变期间的异质性支持的。 形态改变有一定的时间滞后（Nozue等人，2017）。 类囊体膜的重排与叶绿体形状的变化同时发生，叶绿体的形状从具有典型的细长透镜状外观变为通过光学显微镜可识别的肿胀外观。
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| Transplantation of Mesenchymal Cells Including the Blastema in Regenerating Zebrafish Fin
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Author:
Date:
2017-01-20
[Abstract] Regeneration of fish fins and urodele limbs occurs via formation of the blastema, which is a mass of mesenchymal cells formed at the amputated site and is essential for regeneration. The blastema transplantation, a novel technique developed in our previous studies (Shibata et al., 2016; Yoshinari et al., 2012) is a useful approach for tracking and manipulating the blastema cells during fish fin regeneration.
[摘要] 鱼鳍和尿le肢的再生通过形成大气泡，其是在截肢位点处形成的质量的间充质细胞并且对于再生是必需的。胚胎移植是我们以前研究（Shibata等人，2016; Yoshinari等人，2012）开发的一种新技术，是一种有用的方法，用于跟踪和操纵鱼翅再生期间的blastema细胞。
背景在诸如鱼，两栖动物和哺乳动物之类的动物模型的早期胚胎阶段常规进行细胞移植研究，但将移植细胞靶向特定组织是困难的。在我们的研究中开发的Blastema移植是将间充质供体细胞引入宿主翅片射线的有效方法。它使我们能够在鱼翅再生期间跟踪细胞命运和/或操纵细胞信号，如成纤维细胞生长因子（Fgf）。实际上，在我们最近出版的作品中，我们将携带hsp701：显性负性fgf受体和β-肌动蛋白：dsRed2转基因的blastema细胞移植到野生型类型blastema区域并且在鳍状线间充质细胞的子集（Shibata等人，2016）中马齿抑制Fgf信号传导。该方法适用于分析其他细胞信号和通过活细胞成像跟踪细胞命运。
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| Vacuole Structure Analysis during Cell Death Subsequent to Application of Erwinia carotovora Culture Filtrates to Cell Cultures of Nicotiana tabacum
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Author:
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2015-10-20
[Abstract] We recently established an experimental model system for efficient defense-related cell death using tobacco BY-2 cultured cells treated with culture filtrates of the pathogenic bacterium Erwinia carotovora (E. carotovora) (Hirakawa et al., 2015). Applying this experimental system to transgenic BY-2 cells stably expressing the vacuolar membrane marker GFP-VAM3 (Kutsuna and Hasezawa, 2002) allowed us to monitor changes in vacuolar membrane structures including a decrease of transvacuolar strands during cell death (Hirakawa et al., 2015). Our model system can ...
[摘要] 我们最近建立了使用烟草BY-2培养细胞的有效防御相关细胞死亡的实验模型系统，所述培养细胞用致病性细菌欧文氏菌（Erwinia carotovora）（ E。carotovora （Hirakawa ，，2015）。将该实验系统应用于稳定表达液泡膜标记物GFP-VAM3的转基因BY-2细胞（Kutsuna和Hasezawa，2002），使我们能够监测液泡膜结构的变化，包括细胞死亡期间跨血管链的减少（Hirakawa et al。 al。，2015）。我们的模型系统可以帮助调查细胞器动力学在国防相关的细胞死亡。在这里，我们显示应用 E的协议。 carotovora过滤到BY-2细胞和共聚焦观察液泡膜动力学和随后的细胞死亡。我们使用细胞周期同步的BY-2细胞来有效地监测内陷的液泡膜，例如在我们最近的报告中的跨血管链（Hirakawa等人，2015）;然而，我们不描述本文中的细胞周期同步的协议。对于BY-2细胞同步的逐步方案，请参考先前的方案论文（Nagata和Kumagai，1999; Kumagai-Sano等人，2006）。
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