| Examination of the Interaction between a Membrane Active Peptide and Artificial Bilayers by Dual Polarisation Interferometry
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Author:
Date:
2017-01-05
[Abstract] Examining the interaction of peptides with lipid bilayers to determine binding kinetics is often performed using surface plasmon resonance (SPR). Here we describe the technique of dual polarisation interferometry (DPI) that provides not only information on the kinetics of the peptide binding to the bilayer, but also how the peptide affects the lipid order of the bilayer.
[摘要] 检查肽与脂质双层相互作用以确定结合动力学通常使用表面等离子体共振（SPR）进行。在这里，我们描述了双极化干涉测量技术（DPI），它不仅提供了结合双层的肽的动力学信息，而且还提供肽如何影响双层的脂质顺序。
背景 寻求新药开发有效治疗耐药性感染是一个严重的挑战。一组分子，抗菌肽，由于其对细菌，真菌和癌细胞的活性范围，显示出有希望的有效的新疗法（Mader和Hoskin，2006; van der Weerden等人，2013） ）。抗菌肽的细胞杀伤能力通常涉及与膜的相互作用（Brogden，2005; Zasloff，2002）。为了开发这些肽作为有效的治疗剂，我们需要了解肽与细胞膜的相互作用的性质以及为什么这种相互作用导致细胞死亡。也就是说，我们需要实时了解肽和膜之间发生的全部事件序列;从肽与双层的初始静电相互作用到磷脂选择性，到膜的最终破坏，包括脂质顺序的变化。
＆nbsp;大多数检查肽 - 脂质相互作用的技术在整个过程中提供信息的能力有限。例如，表面等离子体共振（SPR）实时提供结合数据，但不显示肽结合如何影响膜结构（Green et al。，2000; ...
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| Determination of VPS34/PIK3C3 Activity in vitro Utilising 32P-γATP
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Author:
Date:
2016-08-20
[Abstract] VPS34 is the only class III phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) in mammalian cells and produces the vast majority of cellular phosphatidylinositol-3-phosphate [PI(3)P]. PI(3)P is a key signalling lipid that plays many membrane trafficking roles in processes such as endocytosis and autophagy. VPS34 is a key cellular regulator, loss of function can have catastrophic effects and is embryonic lethal (Zhou et al., 2011). The levels of cellular PI(3)P can be determined by fluorescent staining techniques and can be used to monitor effects upon VPS34 activity, however it is important to ...
[摘要] VPS34是哺乳动物细胞中唯一的III类磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K），并且产生绝大多数细胞磷脂酰肌醇-3-磷酸[PI（3）P]。 PI（3）P是一个关键的信号脂质，在诸如内吞作用和自噬的过程中起许多膜运输的作用。 VPS34是关键的细胞调节剂，功能丧失可具有灾难性作用并且是胚胎致死的（Zhou等人，2011）。 细胞PI（3）P的水平可以通过荧光染色技术确定，并且可以用于监测对VPS34活性的影响，然而重要的是验证任何变化由VPS34介导，特别是作为PI（3）的替代途径， P生产是可能的，例如通过II类PI3K（Devereaux等人，2013）。 直接在体外测定VPS34活性可以是描绘特定刺激的作用的关键阶段。
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